主题:【第二届网络原创大赛参赛作品】实验过程中遇到的几个问题和大家分享!

浏览0 回复12 电梯直达
sunpengwjh
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实验过程中遇到的几个问题和大家分享
1、毛细管电泳柱子堵了。如果柱子本身没有质量问题,在我们实验过程中发现没有电流或者说堵了,应该用水冲洗毛细管,并观察是否有水流出,若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂;毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。如果通过上述的方法还不能解决此问题,说明很有可能是柱子质量的问题。
前一段时间在论坛解决一个这样的问题就是这样的情况,柱子一直不通,经过很多排查,最后定为柱子质量问题!
2、进样后仪器运行很长时间不出峰。进样后运行了很长时间不出峰,如图1所示,在刚开始做新样品,或是刚开始接触电泳的很容易碰到这样的情况,实际上这是因为缓冲溶液的pH所致。样品在不同的pH缓冲溶液里边所带的电荷是不一样的,当样品在选用的缓冲溶液里边带负电荷,就很难被检测到,因为这个时候样品的运行速度是电渗流的速度减去电泳的速度,而当样品带正电荷的时候,样品的保留时间等于电渗流的速度加上电泳的速度,这样就很容易被检测到。我最初做的手性药物拆分,经过寻找pH,运行30分钟,成功的检测到了该物质。


                                    图1 电泳谱图


                                          图2电泳谱图

3、进样后出现平台峰如图3所示。这也是我们在试验中经常遇到的问题,这个问题很好解决,只是对出学者来说,还考虑不到这一点。是由于缓冲溶液和溶解样品所用的溶液不是同一种类,或不是同一pH,就很容易出现这种现象,解决 的方法就是配置好的缓冲溶液来溶解样品!


图3电泳平台谱图
4、毛细管电泳仪电极易折断。首先我们要检查电极是不是垂直,如果不垂直,进样的时候或是更换缓冲溶液瓶子的时候,电极插下来就很容易弄断。解决的方法就是将电极认为的拉直。还有就是缓冲溶液的小瓶,这个事大家经常忽略的问题,如果小瓶很久没有更换,瓶盖老化,这也很有可能造成电极的断裂,所以小瓶用一段时间就要检查一下瓶盖是不是老化了,如果老化要及时更换。这个问题在论坛上也会经常看到,电极是铂金的,价格很高,我们在使用的过程中一定要注意。     
以上是在电泳实验过程中常会遇到的问题,想到这些先整理这些,希望对大家多少有点帮助!也是抛砖引玉,期待版友的大作早日问世!
该帖子作者被版主 独钓寒江雪15积分, 2经验,加分理由:11月原创作品加分
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titi
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有心的楼主啊~
自己实践过程中遇到的问题认真解决了~分享出来是对版友最宝贵的资料啊~~
i_am_ling
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gansinibaobei
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baishizhiqiu
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不错,很实用的!
大家应该分享自己的经验,给新手都一点指教。
谢谢楼主!
baishizhiqiu
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lhc2007
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Onway
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要是有仪器图片就好了,
图片对大家大家感性认识很好,尤其没见过这类仪器的
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