主题：【分享】水产品现场孔雀石绿检测方法

水产品孔雀石绿、结晶紫现场快速检测试剂盒

用途:
用于检测鱼类、虾类等孔雀石绿、结晶紫、隐色孔雀石绿、隐色结晶紫成分。
适用范围：
适用于市场监督部门、水产监督部门、水产养殖部门对水产品的现场及化验室检测监控。
方法简介：
水产品中的孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物隐色孔雀石绿、隐色结晶紫经过前处理后，样液经过孔雀石绿专用SPE小柱富集形成有色环带，可初步判断样品中是否含有孔雀石绿、结晶紫。用洗脱剂将柱上待检物洗脱下来，经柱衍生化后，再用洗脱液洗脱，收集洗脱液，加萃取剂，若萃取剂有明显的绿色或紫色说明样品中含有待检物质。将萃取剂取出滴于白色点滴板上，可在板上形成绿色或紫色环斑，从而可准确定性样品中是否含有孔雀石绿或结晶紫。
试剂盒组成：
提取剂1 (10瓶)      提取剂2 (10瓶)
层析柱（10根）    50ml注射筒（1支）
吸耳球 （1个）    洗涤剂 (2瓶)
洗脱液（3瓶）      衍生化试剂  （10管）
萃取剂(1瓶)        点滴板（1块）
一次性吸管（10支）  离心管1 （10个）
离心管2 （10个）  1ml注射器（10支）
另必需材料
1、绞肉机（现场可用剪刀,研钵替代）
2、离心机  4000转/分以上（现场可用滤纸过滤的方法替代）
3、量筒  100mL
4、蒸馏水
5、固相萃取机（现场可用吸耳球替代）
6、聚丙烯离心管  100mL(若使用离心机)
操作过程：
1、    样品处理：（在实验室可按“a”操作，现场按“b”操作）
a、取水产品可食部分用绞肉机绞碎后,  准确称取10.0g于 100mL离心管中，加入提取剂1、提取剂2各一瓶，振摇5分钟后,4000转/分离心5分钟，取上清液10mL于100mL量筒中，用蒸馏水定容至30mL；
b、用剪刀剪取约10g样品于研钵中, 加入一瓶提取剂2研碎后, 再加入一瓶提取剂1继续研磨约3至5分钟，用滤纸过滤后挤干残渣, 收集滤液10mL于100mL量筒中，用蒸馏水定容至30mL。
2    过层析柱：
将50mL注射器与层析柱连接，将1中收集到的样液倒入注射筒里，用注射塞加压，加快流速，建议30mL样本通过柱子的时间为5~8min。待样液完全流干后加2mL洗涤剂及2mL蒸馏水先后洗涤层析柱。
3    观察结果：
观察层析柱中吸附剂颜色变化，若吸附剂逐渐形成绿色环带，可初步判断样本中含有孔雀石绿；若吸附剂逐渐形成紫色环带，可初步判断样本中含有结晶紫；加0.8mL洗脱液将其洗脱下来用离心管1收集,  看液体颜色来判断。
4    衍生化：
用2mL洗脱液及2mL蒸馏水先后洗涤层析柱后，将一瓶衍生化试剂倒入层析柱中，加入2mL蒸馏水用吸耳球从上口加压挤干; 将3中的洗脱样液加入柱中, 用离心管2收集流出液, 用吸耳球从上口加压挤干; 再用0.8mL洗脱液洗脱, 用此离心管2收集混匀。
5    萃取：取4中的离心管2，加入0.5mL蒸馏水后,再加入 0.5ml萃取剂，扣上管塞混匀静置, 离心管2下层若有明显的绿色或紫色则可判断样品中含有孔雀石绿或结晶紫，若无明显的绿色或紫色需进一步的判断。
6    检测：
用1ml注射器取5中离心管2中的下层的萃取液(注意不要吸到上层的液体), 加到白色点滴板的一个孔上，样液渐渐挥干，若在孔上形成绿色斑环说明样品中含有孔雀石绿，形成紫色斑环样品中含有结晶紫。

检测下限：1.0ug/kg  (1.0ppb)

特点
1、可现场操作, 用于快速筛选法；
2、检测速度快，检测一个样品30分钟左右；
3、不需用任何设备，可完成整个检测过程；
4、不需用其它试剂, 检测成本低；
5、不需要做对照实验，特异性高, 可准确定性；
6、操作简便，不需专业技术人员；
7、可进行多残留分析。

贮存条件与有效期：
试剂在4-30℃阴凉干燥处保存，有效期为2年。