紫外可见分光光度计(UV)

主题:【原创】致板油的一封信:和分光一般定量方法总结

浏览0 回复12 电梯直达
初学者&九点虎
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
致板油的一封信:
  各位板油,大家好!最近由于专著于导数光谱法和仪器软件和硬件方面的东西,忽略了广大板油基础知识不普及,在此向大家表示歉意,以后从基础知识到难度较大各个层次都会涉及到,满足大家不同层次的需求。
  有什么需要我帮助的请直接和我联系,谢谢各位的支持!!!
分光一般定量方法
俺总结的一般定量方法有以下几个(不完整的请大家补充啊,当然有错误有意见大家也可以提出啊,哈哈),绝对法,标准对照法,吸收系数法,标准曲线法,解联立方程法等。
1 绝对法
  以朗伯-比尔定律A=εbc为基础,且某一物质在一定波长下ε是一个常数,比色皿发光程也是已知的。因此,可用紫外-分光光度计在最大吸收波长处,测定样品溶液的吸光度A值,然后 由公式c=A/εb求得该样品溶液的含量或浓度
2 标准对照法
  在相同条件下,在选定的波长处,分别测定标准溶液(浓度为C标)和样品溶液的吸光度值A标和A样
然后按下面公式求得样品溶液的浓度或含量
C样=(A样/A标)*C标
3比吸收系数法

不是很常用,就不说说,下面说说大家最常用的方法-标准曲线法
4标准曲线法
4.1 首先用基准物质配置一定浓度的标准储备溶液,然后再由储备溶液配置一系列标准溶液。
俺个人经验:配置的过程中最好买国家标准物质,如果条件所限,那也没有办法;其次的最好能一次到位,别稀释次数太多,稀释次数多带来的误差和不确定度比较大;就是稀释也别超过1:20的稀释比例。
4.2 在一定波长,最好是最大吸收波长下,测定每个标准溶液的吸光度,以吸光度为纵坐标,标准溶液对于的浓度为横坐标,绘制标准曲线。
俺个人经验:如果有未知最大吸收波长的组分,最好先做个光谱扫描;如果没有条件,可以查相关资料;如果没办法,那请联系俺,如有标准品,可以帮大家做一个。(哈哈,别让我们领导看见,以为我看私活呢,嘿嘿)
还有,如果仪器不能绘制标准曲线,自己用EXCEL做也可以,
如果仪器做了,自己又用EXCEL做了一个,会发现斜率和截距可能不太一样,因为两种方法涉及的算法不太一样。例如UVPROBE就采用双精度浮点数,给各位说句实话,其实我也不知道双精度浮点数具体什么意思,露怯了!!!
4.3最后样品溶液按照标准曲线绘制程序测定的吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的含量或浓度。


资料
该帖子作者被版主 〓疯子哥〓5积分, 2经验,加分理由:总结归纳的不错,继续努力
为您推荐
专属顾问快速对接
立即提交
社区=冬季=
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
〓疯子哥〓
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
初学者&九点虎
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 madprodigy 发表:
学习知识从基础做起

疯子温习下

哈哈,好孩子,毛主席说:好好学习,天天向上!!!
xt025
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
庐山居士
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
引用楼主“如果有未知最大吸收波长的组分,最好先做个光谱扫描;如果没有条件,可以查相关资料;”这段话。
  查资料上的最大吸收波长往往与实际做的光谱扫描不一致,应力求先做光谱扫描,做光谱扫描找最大吸收波长时,应挑选高浓度的标准液,如果用低浓度的标准液扫最大吸收波长,往往峰比较平,峰值检出时,会出来几个相同Abs的峰,这样最大吸收波长不好判断。
初学者&九点虎
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 shixiangqun 发表:
引用楼主“如果有未知最大吸收波长的组分,最好先做个光谱扫描;如果没有条件,可以查相关资料;”这段话。
  查资料上的最大吸收波长往往与实际做的光谱扫描不一致,应力求先做光谱扫描,做光谱扫描找最大吸收波长时,应挑选高浓度的标准液,如果用低浓度的标准液扫最大吸收波长,往往峰比较平,峰值检出时,会出来几个相同Abs的峰,这样最大吸收波长不好判断。


从理论上讲:浓度不一样,只会影响吸光度的大小,而不会影响出峰的位置,所以你用浓溶液或稀溶液进行扫描,都可以找到最大吸收波长.
  但在实际问题中,溶液太稀,吸光度比较小,噪音干扰和其他组分的干扰比较大;浓度太大,最检测器的增益比较大,杂散光影响比较大,而且容易出现平头峰,不利于找出最大吸收波长.
所以,建议扫描标准溶液时,最大吸收波长处的吸光度在0.5-1.0之间比较合适
当然,对于高档点的仪器,范围可以更大.
初学者&九点虎
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 shixiangqun 发表:
引用楼主“如果有未知最大吸收波长的组分,最好先做个光谱扫描;如果没有条件,可以查相关资料;”这段话。
  查资料上的最大吸收波长往往与实际做的光谱扫描不一致,应力求先做光谱扫描,做光谱扫描找最大吸收波长时,应挑选高浓度的标准液,如果用低浓度的标准液扫最大吸收波长,往往峰比较平,峰值检出时,会出来几个相同Abs的峰,这样最大吸收波长不好判断。


当然,如果出现平头峰,也就是您所说的峰比较平,那就采用偶数级的导数光谱来寻找最大吸收了.
初学者&九点虎
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 shixiangqun 发表:
引用楼主“如果有未知最大吸收波长的组分,最好先做个光谱扫描;如果没有条件,可以查相关资料;”这段话。
  查资料上的最大吸收波长往往与实际做的光谱扫描不一致,应力求先做光谱扫描,做光谱扫描找最大吸收波长时,应挑选高浓度的标准液,如果用低浓度的标准液扫最大吸收波长,往往峰比较平,峰值检出时,会出来几个相同Abs的峰,这样最大吸收波长不好判断。


如果自己扫描出来的最大吸收和文献报道有出入,相差如果在正负3纳米的话,我个人认为正常,以自己扫描的为准进行检测;如果相差比较大,那可能会在试验过程中出问题,请检查
庐山居士
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
采用偶数级的导数光谱来寻找最大吸收峰,这个方法我倒要试一试
庐山居士
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
我前两天刚做的一个紫外标准曲线,先以低浓度扫最大吸收波长不理想,换成高浓度扫最大吸收波长较理想,且它们之间的最大吸收波长有差异,请看附件上的图。
某标液系列光谱扫描图
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴