紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】解疑 标准曲线制作

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sunshine1983
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假如我用丙酮溶解药物作标准曲线,怎样选择储液浓度呢?
一般浓度单位都是mg/L吗,还是视情况而定?
浓度间隔范围怎样确定呢?
新手请多指教!
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原文由 sunshine1983 发表:
假如我用丙酮溶解药物作标准曲线,怎样选择储液浓度呢?
一般浓度单位都是mg/L吗,还是视情况而定?
浓度间隔范围怎样确定呢?
新手请多指教!

决定你样品中的含量了
最好让你的样品上机液处于标准曲线的中间.
浓度间隔吗?不要太大,也与线性范围有关系,最好在10倍左右
sunshine1983
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取0.005g药物溶于10ml乙醇作为储液。分别取0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 ml配至5ml进行大波段检测210-260nm,最大吸收波长都在243nm,就以此次测得的值做了一曲线如下:表1.1,得到的曲线相关系数不大,所以又以上述浓度在243nm下检测,得到第二条曲线:表1.2。
我觉得在储备液制备、设的浓度范围和间隔、曲线制作有一些重大问题。帮我分析一下吧,呵呵!
sunshine1983
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取0.005g药物溶于10ml乙醇作为储液。分别取0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 ml配至5ml进行大波段检测210-260nm,最大吸收波长都在243nm,就以此次测得的值做了一曲线如下:表1.1,得到的曲线相关系数不大,所以又以上述浓度在243nm下检测,得到第二条曲线:表1.2。
我觉得在储液制备、设的浓度范围和间隔、曲线制作有一些重大问题。帮我分析一下吧,呵呵!
sunshine1983
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发了附件但没显示,去新手区看了一下,现在会了。呵呵!
不知道这个图有没有参考价值
标准曲线

标准曲线
穿越时空
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庐山居士
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我算了一下你标准溶液的浓度,分别是:0.01、0.015、0.02、0.025、0.03mg/ml,把这些浓度值和你测的Abs值代入紫外分析软件UV2100中,得到两个标准曲线,对应R值都略高于你。(供参考)
依据数据重新绘制的标准曲线(供参考)
该帖子作者被版主 zhouyuhu10积分, 2经验,加分理由:用心帮助板油
初学者&九点虎
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原文由 fscmj 发表:
楼主,两个附件有什么不同呀.

可能一个发了没显示,又发了一遍
庐山居士
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提高标准曲线测量精度:
1、采用适当方法把药物进行干燥,如冷冻干燥、真空干燥或恒温干燥。
2、对天平进行校正,如电子天平在实验室就可以采用内校或外校,提高称量精度。
3、刻度吸度、移液枪、容量瓶也需要校正。
4、标准曲线测试最好在同一时间内完成。
5、紫外的波长准确度和重复性(如测氘灯能量峰)吸光度准确度(如用标液)都需要经常测试。
6、在做紫外定量分析时,测每个标样时设定重复测量(当然这需要你的紫外具备这样的功能)
该帖子作者被版主 zhouyuhu6积分, 2经验,加分理由:回答非常细致,知识性很强,谢谢!!!
sunshine1983
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真是太感谢大家了!
我用excel做的曲线,您用什么软件做的曲线啊?为什么得出来的回归系数比我大的大呢?呵呵!
庐山居士
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我用的是北分瑞利UV2100紫外分析软件,软件中可以手动输入数据,然后得出标准曲线。
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