选择
液相柱应注意的问题
分析物 :
分子质量 – 小分子 (<3000), 窄孔径, 中间分子(3000- 50000), 大孔径, 大分子 (>50000), 超大孔径.
水溶液中的溶解性 – 极易亲水的, 在离子偶模式下选用 AQ-C18, LP-C18 或XPB-C18 柱; 极易憎水的, 选用键合较短链的柱子 (C8, C4, 苯基, CN);两者之间的, 选用 AQ-C18, LP-C18, XPB-C18 或 苯基柱 .
要分离化合物间的差异: 通过极性比较, 可用 AQ C18, LP, 柱; 通过形状或区域异构体比较, 可用 XBP-C18, 苯基柱
流动相 :
溶液溶剂: 97-100% 水溶液, AQ-C18 or LP柱
pH: pH < 2, C18 柱; pH > 9, XBP-C18柱; pH= 2-9, 绝大多的柱子都可用(使用前请检查各柱子的pH适用范围!)
盐浓度: 高盐浓度 >0.1 M (如果可能尽量避免), XBP-C18, SCX, SAX柱.
样品 :
分析物质量浓度: 高惯性负载, 较大的柱径 (>10 制备色谱).
样品量: 小量, 小直径; 大量, 大柱径长柱长.
样品复杂度: 简单分离短柱; 复杂分离长柱
仪器与应用 :
传统HPLC分析: 3mm, 5mm; 4.6 x 100 mm, 4.6 x 150 mm, 4.6 x 250 mm
高通量分析: 3mm, 5mm; 2.1 x 30 mm, 2.1 x 50 mm, 4.6 x 50 mm.
LC-MS应用: 3mm, 5mm; 1.0 x 30 mm, 1.0 x 50 mm, 2.1 x 30 mm, 2.1 x 50 mm, 2.1 x 100mm.