主题：【转帖】苯甲酸等59种防腐剂 高效薄层色谱法

H9
N-Trichlorometh-yl-thio-4-cyclo-hexene-1,2-dicarboximide
N-(三氯甲基硫代)环已-4-烯-1,2-二羟酰亚胺
4-19
0.5

H10
p-Chloro-m-cresol
4-氯-间-甲苯酚
4-55
0.2

H11
Tetrabromo-o-cresol
四-溴-邻-甲苯酚
4-31
0.3

H12
2,4-Dechloro-3,5-dimethylphenol
2,4-二氯-3,5-二甲苯酚
4-8
0.1

H13
3,4′,5-Tribomo-salicy-lanililde
三溴沙伦(3,4′,5-三溴水杨酰替苯胺)
3-8
1

H14
p-Chloro-m-xylenol
4-氯-3,5-二甲苯酚
4-56
0.5

H15
5-Chloro-2me-thyl-4-isothia-zoline-3-one 2-nethyl-4-isothiazoline-3-one magne-sium and calci-un chloride
KATHON CG
4-59
0.005

H16
1,6-di(N-p-chlorophenyl diguanido)hexane,diace-tate,diglu-conater,or dichlorohydrate
洗必泰
4-44
0.3

Ph1
4-Isopropyl-3-methylphenol
4-异丙基-3-甲苯酚
4-32
0.1

Ph2
0-Phenylphenol
邻-苯基苯酚
4-52
0.2(苯酚)

Ph3
8-Hydrox-yquenoline sul-fate
8-羟基喹啉硫酸盐
4-48
0.3

F1
5-Amino-bis-1,3-(2-ethylhexyl)-5-methyl per hy-dropyrinidine
海克替啶
4-26
0.2

F2
5-Bromo-5-ni-tro-1,3-dioxane
5-溴-5-硝基础-1,3-二恶烷
4-64
0.1

F3
2-Brono-2-ni-tro-propane-1,3-diol
溴硝丙醇
4-63
0.1

F4
N-Hydroxyme-thylchloroace-tamide
2-氯-N-(羟甲基)乙酰胺
4-57
0.3(氯乙酰胺计)

F5
1-(3-Chloroal-lyl)-3,5,7-tri-aza-1-azonia adamantane chloride
　
　
(0.2)

F6
p-Chlorophenyl glyceryl ether
　
　
(0.5)

F7
Hexamethylene tetramine
六亚甲基四胺(乌洛托品)
4-66
0.2(甲醛)

F8
1,3-(Dihydrox-y-methyl)-5-dimethyl hy-dantoin
1,3-双(羟甲基)-5,5-二甲基咪唑啉-2,4-二酮
4-28
0.2(甲醛)

F9
1-(Hydrox-ymethyl)-5-dimethyl hy-dantoin
1-羟甲基-5,5-二甲基-乙内酰脲
4-49
0.2(甲醛)

F10
Imidazo-lidinylurea
咪唑烷基脲
4-27
0.6
F11
Tri (β-hydrox-yethyl hexahy-drotriazine)
　
　
(0.3)

Py1
2-Hydroxypyri-dine N-oxide
1-氧代-2-羟基吡啶
4-45
0.2

Py2
Bis(N-oxopy-ridyl-2thio)aluminum cam-phosulfomate)
吡啶硫酮铝樟磺酸盐
4-35
0.2

Py3
2,2′-Dithio-bis-pyridine 1,1′-dioxide(ad-ditive compo-und with ma-gmesium sulfate trihydrate
2,2′-二硫代又(1-氧代吡啶)与三水合硫酸镁加合物
4-13
0.5

Py4
Sodium(2-pyridylthio)N-oxide
吡啶硫酮钠
4-34
0.5

Py5
Zenc bis(2-pyridylthio)N-oxide
吡啶硫酮锌
4-33
0.5

Am1
1,3-Di(4-amidino-2-bro-mophenoy)n-propane
二溴丙脒
4-11
0.1

Am2
1,6-Di(4-amidino-phe-noxy)n-hexane
已脒定
4-25
0.1

Q1
Alkyl(C8-C18) dimethylben-zylammonium chloride
　
　
(0.5)

Q2
Alkyl(C8-C18) dimethyl-benzy-lammo-nium saccharinate
　
　
(0.5)

Q3
Alkyl(C12-C22) trimethylben zylammonium bromide
西曲溴胺
4-51
0.1

Q4
2-[2-(3-Hep-tyl-4-methyl-2-thiazoline-2-yli-dene) methyne]-3-heptyl-4-methylthiazoli-nium ildide
磺化30庚基-2-(3-庚基-4-甲基-4-噻唑啉-2-亚基甲基)-4-甲基噻唑 啉(KANKOH SO 201)
4-43
0.002

Q5
Diisobutylphe-noxyethoxyethyl-dimethyl-ben-zyla
苄索氯铵
4-41
0.1

M1
Benzyl alcohol
本甲醇
4-40
1

M2
Dodecylguanidine acetate
1-十二烷基呱乙酸盐
4-3
0.5

0.1

M3
2-Phenyoxye-thanol
2-苯氧基乙醇
4-37
1

M4
1-Phe-noxypropane-2-ol
1-苯氧基丙烷-乙醇
4-38
1


*序号为化妆品标准（GB 7916-87）中表四的序号。

* * （）内为欧共体1982最大 允许用量，其他为我国标准（GB7916-87），有一个经上数字表示不同化妆品品种的用量不同详见标准（附录）
根据需要，按表2-3-25所示最大允许浓度称取适量标准，溶于95%乙醇中，但有以下例外：
表2-3-25 配制防腐剂标准溶液溶剂
防腐剂
溶剂
Aml，Am2，F5，F6，F7，F8，F9，Py3，Py4  M2，Ph2

Py5

Acl3，H4，H5，Py2
水

95%乙醇 水（1 1）

95%乙醇 1mol/LHCl（1 1）

氯仿


3.2 展开液
3.2.1 展开液1(MP1)(2):将甲苯、戍烷和99.9%的乙酸按40 60 15比例混合。
3.2.2 展开液2(MP2)(3):将甲苯、四氯化碳、乙酸乙酯和99.9%乙酸按40 30 20 5的比例混合。
3.2.3 展开液3(MP3)(4):将95%乙醇、二甲基甲酰胺和99.9%乙酸按70 15 15的比例混合。
3.2.4 展开液4(MP4)(5):将丙醇、水和99.9%乙酸按60 40 0.5比例混合。
3.3 显色剂(10)
3.3.1 显色剂R3(6):由A和B组成,A是1%2-氯-4-硝基苯二叠氮苯-2-磺酸盐(2-chloro-4-nitrobenzenediazonium napthalene-2-sulfonate,简称NNCO,Fluka公司,商品号74150,或等效物)水溶液,用中速滤纸过滤后使用。用前配制。薄层板经A喷布后，风干1min，然后喷布B。B是10%（W/V）碳酸钠水溶液。
3.3.2 显色剂R4（7）：由A、B二种溶液组成、A是0.1%（W/V）六氯铂酸的水溶液，B是1%（W/V）碘化钾水溶液。将A和B等量混合，此混合液可于暗处贮存一个月。在薄层板喷布显色剂R4后需立即观察。
3.3.3 显色剂R7(8)：由A和B组。A是2mol／L的氢氧化钠，B由0.2ml乙酰丙酮、0.3m1 99.9％乙酸、15g醋酸铵和50ml水组成，当天配制。薄层板喷布A后风干一分钟，喷布B，然后在100℃烘箱放置2min，于366nm下观察和记录。
3.3.4 显色剂R9(9),称取1g香草醛（Vanillin）溶于98％硫酸，加98％硫酸使体积为100ml。薄层板喷布R9后，在100℃烘箱放置10min，观查和记录。

4 仪器

4.1 层析缸：带盖玻璃缸，双槽，Camag 25254或等效物。

4.2 高效薄层板

4.2.1 硅胶板： 10×20cm， Merck 5642或等效物。

4.2.2 反相硅胶板RP18：5×20或10×20cm， Merck l3724或等效物。

4.3可调波长的紫外光灯装置：可提供254nm和366nm波长。

5 分析步骤

5.1 样品预处理(11)

5.1.1 含洒精的样品：可以直接用于测定。

5.1.2 气溶胶型样品：将样品喷入烧杯后，直接取样。

5.1.3 乳剂和膏霜类：称取2g样品分散在10ml 95％乙醇-水（50＋50）中，超声匀浆15min在5000r／min下离心10min，取上清液为待测样液。

5.1.4 凝胶类样品：同5.1.3，或取2g样品分散于10ml氯仿95％乙醇（50＋50）中，超声匀浆15min，5000r/min离心10min，取上清液为待测样液。

5.1.5 粉底霜：取2g样品分散于10ml无水乙醇中，其他步骤（匀浆、离心）同5.1.3。或则取lg样品与2g硅藻土545混合形成一松散的粉末，取内径为lcm的玻璃层析柱，底端用约10mg玻璃棉填塞，将样品粉装入柱内。每次约0.5g并用玻璃棒压紧。用25m1 95％乙醇-水（50＋50）洗脱，流速为1m1／min。必要时可在柱上加压。收集流出液于蒸发皿中，在水浴上蒸发至近干，加入5ml 95％乙醇。水（50＋50）溶解。

5.1.6 眼影和睫毛油：取2g样品溶于10ml无水乙醇中，其他步骤如匀浆、离心等同5.1.3。如效果不好，也可用硅藻土（见5.1.4）或95％乙醇-水（50＋50）（见5.1.3）浸提。
5.1.7 粉类样品：同5.1.5或5.1.4。

5.1.8 含腊质的捧状样品取2g样品溶于10ml氯仿，置于50℃水浴中并振摇，以保证溶解完全。

5.1.9 皂类：取2g的已粉碎皂类样品，分散于10ml无水乙醇中，其余匀浆等步骤同5.1.3。

5.2 防腐剂初筛

5.2.1 点样：用微量注射器或定量毛细管吸取5.0μ1待测样液，分次点样于硅胶薄层板（4.2.1）上，每次约1μ1。样点位置距底边lcm。两个样点相隔1.5cm。每个待测样同时制备4块板。

5.2.2 展开：分别向四个层析缸内的液槽注入20ml展开剂MP1、MP2、MP3、MP4（3.2），立即将已点样的薄层板放入液槽内，盖好缸盖(12)。，控制温度在20±1℃和相对湿度70％。当展开剂前沿前进约6cm后，取出薄层板，风干3Omin。

5.2.3 辨认

5.2.3.1 分别检查用展开剂MP1、MP2、MP3和MP4展开的薄板，用笔勾出显现的斑点轮廓，计算Rf 值并记录颜色特征。

5.2.3.2 将用MP1、MP2、MPs和MP4展开的薄层板，分别在254nm(13)和366nm(14)下检查。标出并计算斑点的 Rf ，记录荧光特征。

5.2.3.3 分别用R9、R3、R7和R4处理MP1、MP2、MP3和MP4展开的薄层板，计算色斑的Rf 值，记录颜色特征。

5.2.3.4 根据4块板上各斑点的Rf 值及显色前斑点颜色、254nm和366nm下荧光特征及显色斑点特征，对照表2-3-26所列各防腐剂的Rf 和色斑特征，可以初筛出存在于化妆品中防腐剂的种类(15)(16)。

表2-3-26各防腐剂在四种展开体系和显色剂中的Rf 值和斑点特征

防腐剂

代号①
初筛实验的Rf 值及斑点特征
确认时的班点

颜色②
MP1-R9
MP2-R3
MP3-R7
MP4-R4
Rf
颜色②
实验体系⑤

目测
254
356
Rf
颜色②
Rf
颜色②
Rf
颜色②
Rf
颜色②

AC1
-
V
-
0.60
-
0.57
-
0.98
-
0.93
-
-
-
 
AC2
-
V
-
0.25
-
0.50
OR
0.98
-
0.95
-
0.85
V
5.5.2

AC3
-
V
-
0.27
-
0.57
Y
0.98
-
0.95
-
0.70
V
5.5.2

AC4
-
V
-
0.30
-
0.57
Y
0.98
-
0.95
-
0.60
V
5.5.2

AC5
-
V
-
0.35
-
0.60
Y
0.98
-
0.95
  0.50
V
5.5.2

AC6
-
V
-
0.40
-
0.60
-
0.98
-
0.95
-
0.40
V
5.5.2

AC7
-
V
-
0.40
-
0.60
-
0.98
-
0.95
-
0.40
V
5.5.2

AC8
-
V
-
0.35
-
0.60
Y
0.98
-
0.95
-
0.40
V
5.5.2

AC9
-
(V)④
-
0.55
-
0.60
(OR)
0.90
-
0.90
-
-
  -

AC10
-
B
(F)
0.55
(P)
0.57
OR
0.95
(F)
0.90
-
-
  -

AC11
-
V
-
0.60
V
0.60
(OR)
0.98
-
0.93
-
-
  -

AC12
-
-
-
0.60
P-V
0.60
-
0.98
-
0.95
-
-
  -

AC13
-
V
-
0.60
BU
0.60-
OR
0.98
-
0.95
-
-
  -

      0.75(t)
       
H1
-
(V)
-
0.60
-
0.77
OR
0.98
-
0.95
-
-
  -

H2
-
-
-
0.50
G-B
0.55
-
0.98
-
0.95
-
0.25
G-B
5.5.3

H3
-
V
-
0.30
-
0.53
-
0.98
-
0.95
-
-
  -

H4
-
V
-
0.30
-
0.53
(OR)
0.98
-
0.95
-
-
  -

H5
  (V)
-
0.60
-
0.60
-
0.73
-
0.98
-
0.95
-
-
　
-

H8
-
V
-
0.60
-
0.85
R-B
0.98
-
0.95
-
-
　
-


-
0.80
OR
0.98
-
0.95
-
-
  -

H6
-
(V)
-
0.35
-
0.55
-
0.98
-
0.95
-
-
  -

H7
-
(V)

H9
-
V
-
0.55
(P)
0.60
-
0.98
-
0.95
-
-
　
-

H10
-
V
-
0.30
(P)
0.65
OR
0.98
-
0.95
-
-
　
-

H11
-
(V)
-
0.70
-
0.85
(OR)
0.98
-
0.95
-
-
　
-

H12
-
(V)
-
0.60
-
0.67
OR
0.98
-
0.95
-
-
　
-

H13
-
(V)
-
0.55
-
0.90
OR
0.98
F
0.95
-
-
　
-

H14
-
V
-
0.50
(M)
0.60
OR
0.98
-
0.95
-
-
　
-

H15
-
(V)
-
0.30
-
0.35
-
0.90
-
0.85
-
-
　
-

　 　 　 　 0.05
　
0.10
　
　
-
0.80
-
-
　
-

H16
-
V
-
0
-
0
  0.40-0.70(t)
-
0.80
-
-
  -

Ph1
-
(V)
-
0.60
R
0.70
OR
0.98
-
0.95
-
-
　
-

Ph2
-
V
-
0.60
(Be)
0.75
B-O
0.98
-
0.95
-
-
　
-

Ph3
Be
V
F
0.05
-
0.10-0.30
V
0-0.80
V
0-0.80
Be
-
　
-

　 　 　 　
　
　
(t)③
　
(t)
　
　
　
　
　
　

F1
-
-
-
0
-
0
Y
0.90
F
0.85
M
0.10
F
5.3.1

F2
-
(V)
-
0.60
-
0.65
-
0.98
-
9,93
-
-
　
-

F3
-
-
-
0.10
-
0.30
(M)
0.98
F
0.90
-
-
　
-

F4
-
-
-
0.05
-
0.10
-
0.90
F
0.85
-
-
　
-

F5
-
-
-
0
-
0
-
0.25
F
0.20
B-V
-
　
-

F6
-
(V)
-
0.10
-
0.15
-
0.98
-
0.90
-
-
　
-

F7
-
-
-
0
M
0
Y
0.15
F
0.20
P
-
　
-

F8
-
-
-
0
-
0.05
-
0.90
F
0.85
-
0.30
F
5.3.1

F9
-
-
-
0
-
0.05
-
0.90
F
0.85
-
0.40
F
5.3.1

F10
-
-
-
0
(M)
0
-
0.80
F
0.75
-
-
　
-

F11
-
-
-
0
-
0
Y
0.35
(F)
0.40
-
-
　
-

Py1
(Y)
V
-
0.05
-
0.05
-
0.75
-
0.65
(OR)
-
　
-

Py2
M
V
-
0-0.15

(t)
-
0-0.20

(t)
-
0.80
-
0.85
W
-
  -

Py3
-
V
-
0
-
0
-
0.60
-
0.60
W
-
　
-

Py4
M
V
-
0-0.05

(t)
-
0-0.20

(t)
-
0.80
-
0.85
W
-
  -

Py5
M
V
-
0-0.05

(t)
-
0-0.20

(t)
-
0.80
-
0.85
W
-
  -

Am1
-
V
-
0
-
0
-
0.30-0.60(t)
-
0.80
V-P
-
-
-

Am2
-
V
-
0
-
0
-
0.20-0.50(t)
-
0.80
V-P
-
　
-

Q1
-
(V)
-
0
-
0
-
0.70
-
0.85
B-V
-
　
-

Q2
-
(V)
-
0
-
0
-
0.70
-
0.85
B-V
-
　
-

Q3
-
-
-
0
-
0
-
0.20
-
0.70
B-V
-
　
-

Q4
(Y)
V
F
0
-
0
R
0.85
-
0.85
GR
-
  -

Q5
-
-
-
0
P
0
-
0.30
-
0.80
BU
-
　
-

M1
-
-
-
0.45
CY
0.50
-
0.98
-
0.95
-
-
　
-

M2
-
-
-
0
-
0
-
0.90
-
0.85
BU
-
  -

M3
-
(V)
-
0.40
P
0.50
-
0.98
-
0.95
-
-
　
-

M4
-
(V)
-
0.50
P
0.55
(W)
0.98
-
0.95
-
0.30
P
5.3.3

注:①见表2-3-24。
②F-荧光；V-紫色；GR-绿色；P-粉红；Y-黄色；OR-橙色；M-深红；Be-米色；BU-蓝色；B-V兰紫色；B-O棕橙色；W-白色；P-V粉紫色；R-红色；G-B灰蓝色；V-P紫粉色；R-B红棕色。
③拖尾。
④括号（）表示颜色很浅。
⑤实验体系见正文。
⑥展开剂（MP1～MP2）和显色剂（R3～R9）见正文。

5.3 防腐剂的确认

根据防腐剂初筛实验（5.2）选择以下5.3.1～5.3.4适宜的薄层板-展开剂-显色体系,将待测样液5μl(17)和初向下出的防腐剂的标准溶液1μl按5.2.1点样在同一块薄层板上.薄层板经懈开显色后,待测样液防腐剂的Rf 值及颜色牲与同块板上标准比较,即可确认。
5.3.1 防腐剂海克替啶(F1)、1，3-双（羟甲基）-5，5-二甲基咪唑啉-2，4-二酮（F10）和1-羟甲基，5，5-二甲基-乙内酰脲（F11）确认中使用的薄层板-展开液-显色液体系：

薄层板：同4.2.1。

展开液：将20ml甲苯、40ml氯仿、40ml丙酮和2ml90%甲酸混合。

显色液：将0.2ml乙酰丙酮、0.5ml99.9%乙酸、15g醋酸铵加至50ml水中，混匀。

将展形式风干的板喷经显色剂，在100℃烘箱中烘烤5min，然后在366nm下观察。

5.3.2 防腐剂苯甲酸酯类(Ac2～Ac8)的分离和确认:

薄层板:同4.2.2。

展开液:将80ml甲醇和20ml水混合。

展开后：将已风干的板于254nm下观察。

5.3.3 防腐剂3，4-氯苯甲醇（H2）或/和苯氧异丙醇 M4的确认：

薄层板：同4.2.1。 展开剂：氯仿。 显色液：R9（3.3.7）。 5.3.4其他防腐剂的确认：将点有待测样液和标准的薄层板，在初筛实验使用4种展开剂-显色剂体系中，选择最适宜的一种（或二种）进行重复实验。

6 防腐剂含量的评定

综合比较待测溶液及已知标准液斑点的呈色强度及面积。如待测溶液斑点大于标准斑点，表明了待测样品含该防腐剂的量超过卫生标准允许最大使用量(19)。必要时，可将斑点刮下，溶于相应的溶剂，在适宜波长下，测吸光度（或荧光强度）以进一步定量；或直接将薄层板在薄板扫描光度计上测量。

注解：

（1）防腐剂的化学性质及其具有的官能团与其在薄层板-展开剂体系上的移动的速度(Rf )以及与显色剂的选择有密切的关系。因此将本文所检测的防腐剂依其化学性质进行分类编排如表2-3-24。其中：

Ac类。主要是酸和酯。

H类：含卤素的化合物。

Ph类，酚类。

F类：一般他说，此类防腐剂可与乙酞丙酮产生颜色反应。虽然其中某些需首先用过氧化物氧化或水解。其中5-溴-5-硝基-1，3-二（口恶）烷（F2）例外，需用铬变酸显色。

Py类：吡啶N-氧化物的衍生物。

Am类：咪基衍生物。

Q类：季铵类化合物。

M类：其他

（2）本体系（硅胶薄层板-M1I）适用于酸和酯类（Ac），含卤素化合物（H），酚类化合物（Ph）和一部分与乙酰丙酮起反应的化合物（F）的分离。

（3） 本体系（硅胶薄层板-MP2）适用性与硅胶薄层板-MP1体系类似。

（4） 本体系（硅胶薄层板-MP3）极性强，适用于F类、Py类、Am类和Q类防腐剂的分离。

（5） 本体系（硅胶薄层板-MP4）的适用性与硅胶薄层板-MP3体系类似。

（6） 本显色剂可与大部分Ac类、H类反应，产生黄至红的颜色。

（7） 本显色剂主要与吡啶N-氧化物（Py类）、脒基衍生物（Am类）和季铵化合物（Q类）产生由粉至蓝的颜色。

（8） 本显色剂使F组的防腐剂呈现莹光。

（9） 本显色剂与酸类防腐剂产生颜色反应。

（10） 除下面介绍的四种显色剂外，尚可选用以下显色剂（R5、R6、R8），其组成与显色待征如下： 显色剂R5：由A和B组成。A是0.4％（W／V）的2，6二溴苯醌-4-氯亚胺（2，6-Dibro-moquinone-4-Chloroimide）的甲醇溶液。每天配制。B是10％Na2C03的水溶液。薄层板喷布A后风干lmin，再喷布B。风干半小时后再记录斑点的Rf值和颜色。
本显色剂主要与下类、卤化合物（H）、酚（ph）和一部分酸类化合物产生颜色。
显色剂R6：称取100mgDC红色19号（染料索引号No 45170）溶于150ml二乙醚、70ml 95％乙醇和15ml水。此溶液可保存一周。薄层板喷布显色剂R6后，立即在366nm下观察和记录。
本显色剂可使含卤素化合物，酚类化合物和酸、酯类防腐剂呈现粉红色紫蓝色颜色。
显色剂R8：由A和B构成。A同3.3.3的B，B是0.lml高碘酸水溶液。向薄层板喷布A，风干1min，喷布B，在100℃烘箱加热2min，在366nm下观察和记录。
本显色剂与R7类似，主要可使部分F组的防腐剂产生荧光性化合物。
（11）因为大多数化妆品使用的防腐剂可以溶于95％乙醇。水（1＋1）的溶液中，并且此萃取液可直接用于后继的薄层色谱技术，故95％乙醇-水（1＋1）超声萃取-离心分离是从化妆品中萃取分离防腐剂的基本方法。如萃取液中化妆品基体干扰薄层分离（出现拖尾现象），可试验其他萃取分离方法。如氯仿95％乙醇（1 1），无水乙醇， Celite545吸附分离、氯仿等。
（12）实验研究发现，薄层板不预先用展开剂饱合，可获得更好的分离效果，因此本方法不推荐薄层板预先用展开液饱合。一般他说，如预先使之饱合，Rf值将减小，其减小程度与饱合程度有一定关系。
（13）在254nm下几乎可以使表2-3-26所列防腐剂中全部酯类、酸类（Ac）、含卤素防腐剂（H）、酚类、吡啶N-氧化物衍生物（Py）、咪基衍生物（Am）和大部分季胺化合物（Q）和其他防腐剂（M）呈现斑点。
（14）在366nm下，仅水杨酸（Acl2），三溴沙伦（H14），8-羟基喹琳（Ph3）和Kankoh So 201（Q4）呈显荧光。
（15）在根据Rf值筛选防腐剂时，防腐剂的Rf值如与未知样防腐剂的Rf值相差±0.1之内即被初选中。在记录和比较样点颜色时，描述颜色不要过于精细，最好是把显示的样点颜色分成几大类，以避免因样品基体干扰颜色（如蓝色变为蓝绿色）而被排除，导致漏选。综合在4个展开体系中的Rf和显现的萤光或颜色，可以较快地不致遗漏地批选出可能存在的防腐剂。（16）为了方便辨认，可以编写一个辨认程序，然后将表2-3-26的资料输入计算机。辨认时将四个板上未知样点的Rf值及显现的颜色输入计算机，经过与输入的Rf值及斑点的颜色进行比较，即可挑选出未知样中可能存在的防腐剂。
（17）标准溶液的浓度与化妆品卫生标准规定的防腐剂允许使用的最大浓度相同。按5.1方法制备的样品待测溶液含样品的量大约20％；在5.3防腐剂确认中待测溶液点样体积为5μl，是标准浴液的点样体积1μ1的5倍。因此，待测溶液某防腐剂的斑点等于、大于或小于该标准溶液的斑点，就表明该样品含此防腐剂的量等于、大于或小于卫生标准规定的最大允许使用量。
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