主题:【转帖】混合焦油色素的测定

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1 应用范围
本法适用于化妆品中焦油色素的测定。
2 试剂
2.1 石油醚:馏程30~60℃。
2.2 石油醚:馏程60~120℃。
2.3 碱性氯化钠溶液: 10%氨水 5%氯化钠溶液(l 9)。
2.4 硫酸 乙酸混合溶液:硫酸 乙酸 水(4 9 1)。
2.5 酸性乙醇:4%盐酸 无水乙醇(1 1)。
2.6 吸附剂
2.6.1柱层层析用的硅胶:100目。
2.6.2薄层层析用的硅胶。
2.7 色谱法用的滤纸
2.7.1滤纸。
2.7.2液体石蜡处理滤纸:取液体石蜡5g溶于100ml石油醚中,将滤纸浸润30min,取出风干后备用。
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2.8 薄层板
用硅胶制成250~300μm厚薄层板,于100℃下加热60min活化。
2.9 滤纸层析用展开溶剂
2.9.1丙酮 乙醇 乙酸 水(70 10 5 15)。
2.9.2乙二醇甲醚 水(10 30)。
2.9.3乙二醇 水 氨水(10 30 1)。
2.9.4甲醇 氨水 水(63 40 77)。
2.9.5正丁醇 乙醇 0.5mo1/L氨水(6 2 3)。
2.9.6 25%乙醇 5%氨水(1 l)。
2.9.7用戊醇饱和的氨水。
2.9.8丙酮 水(7+3)。
2.9.9甲醇 水(1 1)。
2.9. 10氨水 水(1 1)。
2.9.11乙酸 水(1 1)。
2.9.12正丁醇 乙醇 0.5mol/L乙酸(6 2 3)。
2.9.13甲醇 乙酸 水(50 5 45)。
2.9.14甲醇 丙酮 水(25 25 50)。
2.10 薄层层析用展开溶剂
2.10.1 苯。
2.10.2 1,1-二氯乙烷。
2.10.3 1,1,2-三氯乙烷。
2.11 色素标准溶液(1)
2.11.1 称取油红OS 0.1g,加入100ml乙醇,加温溶解,冷后过滤。
2.11.2 称取红色213号(若丹明B)、红色215号(若丹明B硬脂酸盐)各0.1g,分别溶于100ml 1%盐酸溶液中。
2.11.3 称取红色230号(1)和(2)(伊红YS和YSK)、红色218号(四氯四溴荧光素)、红色223号(四溴荧光素)和橙色201号(二溴荧光素)各0.1g,分别溶于100ml 1%氢氧化溶液中。
2.11.4 称取阿尔巴红0.02g溶于100ml 1%氢氧化钠溶液中。
2.11.5 称取红色221号(甲苯胺红)、红色226号(赫林顿桃红CN)、红色228号(永久红)、橙色203号(永久橙)、橙色204号(联苯胺橙G)、黄色205号(联苯胺黄)、红色404号(艳坚牢猩红)、橙色401号(汉撒橙)、黄号401号(汉撒黄)、深红、吡唑啉-5-酮红、阴丹士林棕R各0.1g,分别溶于100ml甲苯中过滤。
2.11.6 称取红色202号(立索尔玉红BCA)、红色203号(色淀红C)、红色204号(色淀红CBA)、红色205号(立索尔红)、红色206号(立索尔红CA),红色207号(立索尔红BA),红色208号(立索尔红SR)、红色219号(艳色淀红R)、红色220号(深紫酱),红色405号(永久红F5R),色淀红D各0.1g,分别加入100ml酸性乙醇,加热,冷后过滤。

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3 分析步骤

3.1 样品预处理(2)(10)(见图2-3-38)

3.1.1 待测溶液A(石油醚提取液):取样品5~10g于离心管中(3),在水浴上加热使水几乎蒸干,冷却后加石油醚20ml,用玻璃棒充分搅拌使色素溶出,离心分离5min(3500~4000r/min,以下相同)。若样品为唇膏时,取样品50~100mg于离心管中,加20ml石油醚,用玻璃棒充分压碎样品,搅拌使色素溶出,离心分离5min。小心将上清液过滤(4),再将离心管内的残留物中加入10ml石油醚,与前述同样处理,反复操作直至石油醚不再着色为止(5),合并全部石油醚提取液作待测溶液A。石油醚不溶部分保留转入(3.2.)的操作。

将待测溶液A进行3.1.1.1和3.1.1.2项处理,制备成吸收光谱用和层析用待测溶液。

3.1.1.1 取一部分待测溶液A于分液漏斗中,每次用少量水洗涤数次后,蒸干。残留物溶于氯仿中,稀释至适当浓度,有于吸收光谱测定。
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3.1.1.2 待测溶液A的剩余部分加入约1/4容量的硫酸 乙酸混液(2.4)摇匀,放置待分层后,立即将酸液转移至200ml的烧瓶中。此溶液用待体积的水稀释后,用25%氢氧化钠溶液调至碱性,以约1/3体积的乙醚提取色素,乙醚液每次用约相同体积的水洗涤3次,加入少量无水硫酸钠脱水,低温蒸干,残留物溶于少量的乙醇,作为层析用。

3.1.2 待测溶液B(2%氢氧化钠提取液)

将前项3.1.1操作中保留的不溶于石油醚残留物加温,除去石油醚后,加20m1 2%氢氧化钠溶液,充分搅拌,振摇提取,离心分离。如2%氢氧化钠溶液有可溶性色素存在时,小心地过滤,离心管内残留物中再加入10m l2%氢氧化钠溶液,按上述同样处理,如此反复4~5次之后(6),合并氢氧化钠提取液,残留物转入3.1.3的操作。
将2%氢氧化钠提取液移入分液漏斗中,每次用约1/3体积的乙醚提取色素数次。取每次乙醚提取液的一部份(约1ml)于试管中,加入同体积的1%盐酸摇匀,直至盐酸溶液不显红色为止。
乙醚溶液和氢氧化钠溶液分别按下述操作处理。
乙醚溶液:每次将乙醚溶液用少量0.5%氢氧化钠溶液洗涤1~2次,弃去洗液。再用乙醚溶液1/10体积的1%盐酸混合振摇提取色素。取提取液的一部分,调整至适当液性,作吸收光谱和层析用待测溶液B一1。
氢氧化钠溶液:调氢氧化钠溶液的pH至乙酸酸性,每次用1/2体积的乙醚提取数次后,合并乙醚溶液。此时,如下层的乙酸液仍着色时,则予保存(a液)。
过滤乙醚溶液,每次用约1/3体积的1%氢氧化钠溶液提取色素数次。合并全部1%氢氧化钠溶液,用乙酸调至酸性,加入约1/2体积的戊醇,振摇后静止,待分二层后取戊醇层,加入约1/2体积的石油醚,每次用同体积的碱性氯化钠溶液,振摇提取色素数次。此时,上层的戊醇-石油醚混合溶液仍呈色时,另予保存(6液)。(7)
合并所有碱性氯化钠溶液,过滤后,调至乙酸酸性,每次再用同体积的乙醚提取色素2~3次。合并全部乙醚溶液,每次加入少量1%氢氧化钠溶液,振荡提取2~3次,合并全部1%氢氧化钠溶液。
取此溶液一部分,调整至适当的酸性,作吸收光谱用待测溶液B一2。
其余部分作层析用待测溶液B一2。
过滤保留的a液(乙酸酸性溶液),加入1/2体积的戊醇、振荡、使色素转入戊醇层,分取戊醇溶液,加入约2倍体积的石油醚,再加少量水,混合、振荡,提取色素。此提取液按下述的待测溶液D项(3.2.4)进行试验。
前述的b液(戊醇-石油醚溶液)加入2倍量的石油醚,每次加入少量的1%氢氧化钠、溶液混合振荡,反复此操作2~3次提取色素,合并全部1%氢氧化钠溶液,调至乙酸酸性,每次用1/2体积的乙醚提取色素2~3次,合并乙醚提取溶液,在水浴上除去乙醚。
残留物按待测溶液D项进行试验,如残留物中存在阿尔巴红,将残留物溶于1%氢氧化钠溶液中,过滤,滤液作吸收光谱和层析用待测溶液B一3。
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3.1.3待测溶液C(甲苯提取液)
取3.1.2项离心管内的残留物加20ml水,用玻璃棒充分搅匀后,离心分离弃去上清液(8)。离心管内的残留物加热干燥,加20ml甲苯,用玻璃棒充分搅匀,待色素溶出后,离心分离。小心地过滤上清液,向离心管内的残留物中加甲苯10ml,如前同样操作,反复提取至甲苯提取液几乎无色为止,合并全部甲苯提取液作待测溶液C。
离心管内的残留物转入3.1.4项操作,如果仍有色素混时。按下述操作。
柱层析法(9):将硅胶浊悬在石油醚中,充分搅拌除去空气,经漏斗流入保持垂直的玻璃管(内径1cm,长30cm,一端有狭窄部,狭细部的上部用石油醚浸润并已除去气泡的脱脂棉堵塞)硅胶充填15cm的高度,在它的上面放一片比玻璃管内径略小的圆形滤纸。待残留于层析柱上部过量的石油醚全部渗入柱内后(注意,任何时候液面不得低于柱面),把甲苯提取液(适当量)徐徐自上方注入,使之渗透柱内,然后用甲苯展开,以1ml/min的流速溶出分离的吸收色带。
3.1.4 待测溶液D(酸性乙醇提取液)

向3.1.3项离心管内的残留物中,加入酸性乙醇5~10ml,搅匀,加热,冷却后离心分离.小心过滤上清液,再向离心管内的残留物加酸性乙醇5~10ml,同样处理后,合并全部酸性乙醇提取液,作待测溶液D.
离心管内的残留物转入3.1.5的操作。

3.1.6 待测溶液F(1-氯萘提取液)
向3.1.5项离心管内的残留物加乙醇10ml,搅匀后离心分离,弃去上清液。此操作反复2次后,加热干燥,加1-氯萘5~10ml,用玻璃棒充分搅匀,加热溶出色素,冷却后离心分离。然后小心过滤上清液,再向离心管内的残留物加1-氯萘5~10ml,同样操作,直至1-氯萘几乎不着色为止,合并全部1-氯萘提取液,作待测溶液F。

3.2 测定
3.2.1 待测溶液A
3.2.1.1 吸收光谱:测定待测溶液A的可见光吸收光谱,与油红OS(11)的吸收光谱比较判定。
3.2.1.2 滤纸层析(12):将层析用待测溶液A和色素标准溶液2.11.1分别点在同一层析滤纸上(2.7.2),各点间隔1cm,原点距滤纸边4cm,用上升法展开,展开溶液为2.9.1或2.9.8,展开距离为20~25cm,
3.2.1.3 薄层层析(13):将层析用待测溶液A和色素标准溶液2.11.1,分别点在同一薄层板上不同位置,用薄层展开溶剂2.10.1或2.10.3展开距离为10~13cm。
3.2.2 待测溶液B
3.2.2.1 吸收光谱:调节待测溶液B-1与以下标准色素溶液同一液性,测定可见光吸收光谱,与红色213号(若丹明B)(14)、红色215号(若丹明B硬脂酸盐)(15)的吸收光谱比较判定。测定待测溶液B-2的吸收光谱,与红色230号的(1)和(2)(伊红YS和YSK)(16)、红色218号(四氯四溴荧光素)(17)、红色223号(四溴荧光素、曙红)(18)或橙色201号(二溴荧光素)(19)的吸收光谱比较判定。
另外,将用于测定吸收光谱的待测溶液B-3调整至与色素标准溶液同一液性,测定吸收光谱,与阿尔巴红(20)的吸收光谱比较判定。
3.2.2.2 滤纸层析:在滤纸2.7.1上分别点层析用待测溶液B-1和色素标准溶液2.11.2,用展开溶剂2.9.2~2.9.4展开。展开距离为20~25cm。同样,测定待测溶液B-2,用色素标准溶液2.11.3,用色素标准溶液2.11.3为对照,采用展开溶剂2.9.5~2.9.7;待测溶液B-3,用色素标准溶液2.11.4为对照,用展开溶液剂2.9.5或2.9.7~2.9.14,展开后比较判定。
3.2.3 待测溶液C
3.2.3.1 吸收光谱:将待测溶液C调至适当浓度,测定可见光吸收光谱,与红色221号(甲苯胺红)(21)、红色226号(赫林顿桃红CN)(22)、红色228号(永久红)(23)、橙色203号(永久橙)(24)、橙色204号(联苯胺橙G)(25)、黄色205号(联苯胺黄)(26)、红色404号(艳牢猩红)(27)、橙色401号(汉撒橙)(28)、深红(30)、派拉佐隆红(31)、阴丹士林棕R(32)的吸收光谱比较判定。
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如果上述色素混合存在时,需经3.1.3待测溶液C中的柱层析分离,分别测定各溶出液可见光吸收光谱。
3.2.3.2 薄层层析(33):将待测溶液C配制权威性适当浓度和色素标准溶液2.11.5分别点样在硅胶薄层板上,用薄层层析用展开溶剂2.10.2或2.10.3展开至10~13cm,然后比较判定。
3.2.4 待测定溶液D
3.2.4.1 吸收光谱:取一部分待测溶液D调整至与标准色素溶液相同液性后,测定可见光吸收光谱,与红色202号(立索尔玉红BCA)(34)、红色203号(色淀红C)(35)、红色204号(色淀红CBA)(36)、红色205号(立索尔玉)(37)、红色206号(立索尔红CA)(38)、红色207号(立索尔红BA)(39)、红色208号(立索尔红SR)(40)、红色219号(艳色淀红)(41)、红220号(深紫酱色)(42)、红色405号(永久红F5R)(43)、和色淀红D(44)的吸收光谱比较判定。
3.2.4.2 滤纸层析:待测标准溶液D和色素标准溶液2.11.6分别点于滤纸上,用展开溶剂2.9.2、2.9.3、2.9.10或2.9.11展开后比较判定。

3.2.5 待测溶液E

3.2.5.1 吸收光谱法:调整待测溶液E至适当浓度,测定可见光吸收光谱,与兰色201号(靛蓝)(45)的吸收光谱比较判定。

3.2.6 待测溶液F

3.2.6.1 吸收光谱:取待测溶液F的一部分,调整适当浓度,测定可见光吸收光谱,与蓝色204号(卡尔庞士林蓝)(46)、蓝色404号(酞菁蓝)(47)、的吸收光谱比较判定。

如果是两种色素混合在一超时需用纤维素粉层折柱以α-氯萘作展开溶液,与待测溶液C(甲苯提取液)同样进行层样分离色素,测定它们的吸收光谱,与蓝色204号(卡尔庞士林蓝的吸收光谱比较判定。(48)

注解:

(1)本文着色剂代号的名称,C.I(Colour Index)号、化妆品卫生标准(GB7916-87)中表6的序号及类别见表2-3-28。

(2)样品中色素的分离萃取步骤可用图2-3-38表示。

(3)使用容量为50ml的具塞离心管。

 

表2-3-28 着色剂的本文代号、名称、C.I号、序号及类别

本文代号
名称
C.I号
序号*
类别**

红色202
石红BCA(立索尔玉红BCA)
15850
6一5
2.3

红色203
色淀红C
15585
6一6
2.3

红色204
色淀红CBA
15585
  2.3

红色205
立索尔红
15630
  2.3

红色206
立索尔红Ca
15630
  2.3

红色207
立索尔红Ba
15630
  2.3

红色208
立索尔红Sr
15630
  2.3

红色2l3
若丹明B
45170
6一9
5.3

红色2l5
若丹明B硬酯酸盐
45170
  5.3

红色2l8
四氯四溴荧光素
45410
6一12
5.2

红色219
艳色淀红R
15800
6一15
2.3

红色220
深紫酱色
15880
6一17
2.3

红色221
甲苯胺红
12120
  2.1

红色223
四镇荧光*
45380
  5.2

红色225
苏丹Ⅲ
26105
6一8
2.2

红色226
赫林顿桃红CN
73360
6一14
8.2

红色228
巴马通红(永久红)
12085
6一18
2.1

红色230
伊红YS
45380
6一11
5.5

红色404
艳牢腥红
12315
  2.1

红色405
永久红F5R
15865
  2.3

红色501
药用绯红(N.F)
26105
  2.2

红色502
丽春红3R
16155
  2.4

红色505
油红XO
12140
  2.2

油红OS
  26125
  2.2

阿尔巴红
  13058
  2.1

深红
  12350
  2.1

派拉佑隆红
  21120
  2.1

吡唑啉-5-酮红
    2.5

色淀红D
  15500
  2.1

黄色204
喹啉黄·SS
47000
6-25
6

黄色205
联苯胺黄
21090
  2.1

黄色401
汉撒黄
11680
  2.1

黄色404
黄AB
11380
  2.2

黄色405
黄OB
11390
  2.2

橙色203
永久橙
12075
  2.1

橙色204
联苯胺橙G
21110
  2.5

橙色201
二溴莹光素
45370
  5.2

橙色401
汉撒橙
11725
  2.1

橙色403
橙S.S
12100
  2.2

绿色202
醌茜绿SS
61565
6-34
7.2

蓝色201
靛蓝
73000
  8.1

蓝色204
卡尔庞士林蓝
69825
  7.2

蓝色403
苏丹蓝
-----
  7.2

蓝色404
酚菁蓝
74160
  10

棕色
阴丹士林棕R
69015
  7.2
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* 为化妆品卫生标准(GB7916一87)表6的序号。
* * 见“着色剂(色素)”正文中合成染料的结构分类。
(4)不要让管底的沉淀上浮,小心用小张滤纸过滤。
(5)样品用石油醚处理可提取样品中可溶性色素(油溶性色素)、油脂及其它石油醚可溶性物质,使以后提取色素操作容易,同时也可除去油脂的干扰。不存在石油醚可溶性色素时,此层不显色,但为了脱脂的目的,必需用石油醚反复提取2~3次。

如存在红色2l5号(若丹明B硬脂酸酯),其一部分进入石油醚中,这时如把石油醚提取液用1%盐酸溶液提取,红色215号进入l%盐酸而被除去,红色221号(甲苯胺红)在石油醚中略呈黄褐色,此时石油醚提取2~3次后停止,立即转入下面2%氢氧化钠溶液的操作。

(6)进入2%氢氧化钠溶液中的主要是红色223号(四溴荧光素)和红色213号(若丹明B),除此之外,也有少量的红色202号(立索尔玉红BCA),红色203号(色淀红0,红色219号(艳色淀红m被提出。其中红色223号和红色213号,经三次提取,几乎被完全提出了,而红色202号、红色203号、红色219号,由于溶出慢,每次提取液稍有着色。红色202号和红色203号呈褐色,经色219号呈红褐色。第4、5次提取液有此状态时,停止用2%氢氧化钠溶液的提取,转入下面甲苯提取方法。

(7)进入D液(酸性乙醇溶液)的一部分色素被提取至戊醇-石油醚溶液中。

(8)反复水洗2~3次以除去氢氧化钠。如氢氧化钠略有残留,干燥时色素会分解。

(9)此方法依照文献: Weiss L C J.A.O.A.C,34:453,l951。

(10)本法是焦油色素测定时样品预处理的基本操作。样品中含焦油色素品种较少时,也可以采用比较简单的分离方法,如图2-3-39和图2-3-40表示的处理步骤。

图2-3-38表示的操作与本法基本一致,取样品于离心管中,加溶剂搅拌,振摇,顺次提取分离,各步提取液通过薄层层析与标准色素比较判定。用石油醚提取主要是脱脂。A层可提取氧杂蒽系色素;B层提取油溶性色素;C层可以提取出颜料和色淀化的水溶性色素。

如果样品中色素在三种以下时,可以采用图2-3-40的简易操作步骤进行分离提取。但是,由于残留物的吸附,对红色3号(红霉素)、红色226号(还原桃红色CN)等提取有困难时,可以作吡啶提取最终残留物,用与图2-3-40A层同样展开溶剂分离鉴定。对红色203号(色淀红C)和红色208号(立索尔红SR)的分离鉴定,展开剂采用1,4-二氧杂环已烷 吡啶(1 1)效果较好。
(l1)油红OS(oil Red OS) C.I.26125
红色粉末,不溶于水,稍溶于石油醚、乙醇和丙酮中,呈红色。溶于氯仿中呈暗红色。
溶于硫酸溶液,呈绿蓝色,用水稀释生成蓝紫色沉淀。氯仿溶液的最大吸收波长532±2nm。此色素往往由于有不纯物呈红褐色,有强烈的臭气。
精制:取色素约20g,加15ml氯仿,在水浴上加热溶解,加乙醇1000m1,加热90min后冷却,离心分离。弃去上清液、残留物加乙醇搅匀再次离心分离。残留物中加水,提取过滤,135℃下干燥,m.p.为223℃。
(12) 可分离油红OS,红色501号(药用猩红)和红色225号(苏丹Ⅲ)。


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(13) 硅胶用Silica gel D5(Camag),Silica gel 60(Merck)或和光胶B5(和光纯药)等。按各自规定的处方制薄层。用Silica gel D5时油红OS的Rf如表2-3-29所示。
表 2-3-29 Rf 值

色素名称
展 开 溶 剂


1,1,2-三氯乙烷

油红OS
0.28(0.16)
0.48(0.34)

红色501号
0.19
0.38

红色225号
0.19
0.34


(14)红色213号(若丹明B)(Rhodamine B),C.I. 45170。

褐色粉末,有绿色的金属光泽,在水中溶解呈有蓝色感的红色,发出强荧光。荧光热时消失,冷时再现。溶于硫酸溶液呈黄褐色,用水稀释经红色至有蓝色感的红色。水溶液中性或碱性(pH6.0~13.1)时最大吸收波长553±2nm,强酸性(pH1.4)时最大吸收波长;561±2nm,对存在于此色素中的间二乙胺苯酚的定量法参照文献①。此色素用稀盐酸再结晶,80℃干燥,185℃软化,193~195℃熔融。用氢氧化钠变成碱性,由乙醚或甲醇水三次再结晶, 135℃干燥的m.p.是165℃。

此色素往往含有三乙基若丹明,可用柱层析法分离。向预先用硅烷处理的硅藻土加入正癸醇(含1%氨溶液)混合后装入柱中,注入色素液,用1%氨溶液淋洗。三乙基若丹明B比若丹明先流出。

(15) 红色215号(若丹明B硬脂酸盐) (Rhodamine B stearate)。C.I. 45170

淡红色粉末,溶于乙醇呈红色,发强荧光,溶于乙醚、苯和动物油脂,几乎不溶于水。在冷的2%氢氧化钠溶液中呈有蓝色感的红色,有荧光。溶于硫酸溶液呈黄褐色,用水稀释后由红色混浊变成有蓝色感的红色。

(16)红色230号(1)和(2)(伊红YS和YSK) (Eosine YS和YSK),C.I.45380。

红色粉末,结晶有蓝红色的光泽。溶于水,在水中呈橙红色,发出绿色的荧光,微溶于乙醇。,在水溶液中加无机酸,产生四溴荧光素沉淀。

与氢氧化钾溶液(20~40%)共同加热时呈红紫至蓝色,在硫酸溶液中呈橙黄色,用水稀释生成橙黄色沉淀。

0.02N乙酸铵溶液的最大吸收波长是517±2nm。

本品的副色素之一荧光素钠可用纤维素(索尔卡普洛克SW一40)层析柱分离后,用分光光度法定量。

(17)红色218号(四氯四溴荧光素, Tetra-chloroterabromofluorescein,C.I.454l0。

有蓝色感的淡红色粉末,不溶于稀酸,几乎不溶于水。溶于稀碱和己醇中,碱性溶液呈红色,有荧光。溶于硫酸溶液呈黄褐色。水溶液pH5.1~13时,最大吸收波长538±2nm。二乙酞基体的m.p.为308℃。

(18) 红色223号(四溴荧光素,Tetrabromofluorescein,C.1.45380。

淡红色粉末,溶于乙醇、乙酸乙酯和稀碱。不溶于甘油、甲苯、油脂和稀酸,难溶于水。碱性溶液呈红色,有绿黄色荧光,硫酸溶液呈黄色。水溶液在pH5.3~13.0时最大吸收波长为517±2nm。在487nm处有弱肩。

二乙酞衍生物的m.p.是292~295℃。

本色素通常含有三溴荧光素副色素,此副色素的定量滤纸层析法好于柱层析法,现在也可以使用纤维薄层板。

此色素也称溴酸(Bromo acid)。溴酸是二溴荧光素或四溴荧光素衍生物的别名
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(19)橙色201号(二溴荧光素,Dibromofluorescein),C.I.45370。

橙色粉末,不溶于稀酸,几乎不溶于水。溶于稀碱或乙醇,呈橙色,有绿黄色荧光。在硫酸溶液中呈黄色,水溶液pH7~13时,最大吸收波长504±2nm。其二乙酞衍生物的m.p.210~211℃。

① Harrous,LS:J Assc offic Agr Chemist,34,133(1951)。

此色素往往含有荧光素,4-溴荧光素、2,4和2,5-二溴荧素、2,4,5-三溴荧光素2,4,5,7-四溴荧光素副色素。这些色素水溶液(0.5%氨溶液)的最大吸收波长如下:

 

λmax(nm)
荧光素

4-溴荧光素

2,4-二溴荧光素

2,5-二溴荧光素

2,4,5-三溴荧光素

2,4,5,7-四溴荧光素
492

498

504

507

512

518


这些色素的分离鉴定也可用1%氯化钠溶液(W/V)加氨水lml或用正丁醇 乙醇(3 7)混合溶液进行滤纸层析分析(滤纸Whatman No.1)。而且现在也可以使用纤维薄层板代替滤纸层析。

此色素别名是溴酸。

(20)阿尔巴红(Alba Red),C.I.13058。

暗紫红色粉末,溶于丙酮、乙醇呈红色,不溶于石油醚。在水中分散成红色。在盐酸、硝酸溶液中呈红色,在氢氧化钠溶液(10%)中呈黄色。溶于硫酸呈绿褐色,用水稀释成鲜红色溶液。2%氢氧化钠溶液的最大吸收波长是434±2nm,m.p.153℃。

(21)红色221号(甲苯胺红, Toluidine red,C.I.12120。

橙色粉末,不溶于水、稀酸、稀碱和冷乙醇等。溶于苯、甲苯和二恶烷中呈橙色。溶于硫醇溶液呈红紫色,用水稀释生成橙色沉淀。

氯仿溶液的最大吸收波长为511±2nm。甲苯溶液的最大吸收波长为509±2nm。此色素由氯仿再结晶的m.p. 276.5℃。Schulz(1931)报告m.p.278℃(冰乙酸)。

此色素往往含有1-p-甲苯并-2-苯酚副色素,可利用在氯仿中溶解度的差异分离此副色素,再由分光光度法定量(测定波长486nm)。

(22)红色226号(赫林顿桃红CN,Helindone Pink CN),C.I.73360。

桃红色粉末,稍溶于水、乙醇和丙酮中。溶于二甲苯呈桃红色,略有黄色的荧光。加硫酸变成红色,然后变绿色。用水稀释生成红色沉淀。在浓氢氧化钠溶液中无变化。不溶于油脂和石蜡。甲苯溶液的最大吸收波长, 535±2nm。

(23)红色228号(巴马通红, Permanent Red),C.I.12085。

朱红色粉末,不溶于水、稀酸、稀碱,微溶于乙醇、苯、乙醚、甲苯,溶于乙酸。干燥的色素在碱性溶液中不变化。溶于硫酸呈紫色,用水稀释生成黄红色的沉淀,在硝酸溶液中呈鲜朱红色,在氢氧化钾乙醇溶液中呈紫色。市售品溶于苯和甲苯中,呈橙色。溶于硝酸呈淡红色,有荧光。甲苯溶液的最大吸收波长是486min。

(24)橙色203号(永久橙, Permanent Orange),C.I. 12075。

橙色粉末,不溶于水。溶于甲苯、氯仿(约0.02%,25℃)中呈橙色,在氢氧化钠-乙醇溶液中呈深蓝色。在硫酸溶液中呈蓝紫色,用水稀释生成橙色沉淀。氯仿溶液和甲苯溶液的最大吸收波长为480±2nm。由乙酸结晶的m.p.302℃。对混在此色素中的2,4-二硝基苯胺的确良定量法参照文献①。
(25)橙色204号(联苯胺橙G,Benzidine Orange G),C.I.21110。
橙红色粉末,不溶于水,硫酸溶液中呈暗红橙色,用水稀释生成带红橙色沉淀。浓硝酸溶液中呈暗橙色。
(26)黄色205号(联苯胺黄,Benzidine Yellow G),C.I.21090。
黄色粉末,不溶于水,硫酸溶液中呈黄橙色,用水稀释生成褐黄色沉淀。甲苯溶液的最大吸收波长428±2nm。
(27)红色404号9艳牢猩红,Brilliant Fast Scarlet),C.I.12315。
红色粉末,不溶于不,溶于氯仿呈红色。m.p.304℃(乙酸再结晶)。
(28)橙色401号(汉撒黄,Hansa Orange),C.I.11725。
橙色粉末,不溶于水,溶于氯仿、苯和甲苯,呈橙色。硫酸溶液中呈橙色,用水稀释生成橙色沉淀。
(29)黄色401号(汉撒黄,Hansa Yellow),C.I.11680。
橙黄~黄色粉末,不溶于水。溶于氯仿、苯及甲苯,呈黄色,用水稀释生成黄色沉淀。m.p.256℃(乙酸再结晶)。
(30)深红(Deep Red),C.I.12350。
红褐色粉末,不溶于水、稀酸、稀碱、溶于苯、甲苯及氯仿,呈黄色~红色。M.p.317℃硝基苯再结晶)。
(31)派拉佐隆红(Pyrazolone Red)C.I.21120。
红色粉末,不溶于水。
(32)阴丹士林棕R(Indanthrene Brown R)。C.I.69015
红褐色粉末,不溶于水、石油醚、甘油。在硫酸溶液中呈暗枣红~红色,用水稀释生成红褐色沉淀。难溶于氯仿、二甲苯、甲苯(黄褐色)。
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33)以薄层层析展开分离,用适当的溶剂提取色素后,也可测定吸收光谱,表2-3-30所示为甲苯提取的色素在不同展开剂中的Rf值

表 2-3-30 Rf值

色素名
展开溶剂

1,1-二氯乙烷
1,1,2-三氯乙烷

红色221号(甲苯胺红)
0.23
0.26

红色228号(巴马通红)
0.47
0.45

橙色203号(永久橙)
0.31
0.30

红色404号(艳牢猩红)
0.16
0.18

橙色401号(汉撒橙)
0.25
0.30

黄色401号(汉撒黄)
0.39
0.38

深红
0.12
0.16


(34)红色202号(立索尔玉红BCA,Lithol Rudine BCA),C.I.15850。

红色粉末,不溶于冷水、乙醇、甘油及醇类。溶于含有稀盐酸50%乙醇和含有乙撑二胺四乙酸50%乙醇溶液中,呈红色。在硫酸溶液中呈紫红色,用水稀释生成紫红色沉淀。微溶于冷20%氢氧化钠溶液,呈褐色。

含稀乙醇的0.1mol/L盐酸和0.1mol/L氢氧化钠溶液的最大吸收波长分别为520nm和492nm。此色素吸收光谱在pH1~3时无变化。

此色素往往含有如下的副色素。

①4-p-甲苯并-3-羟基-2-萘酸:此副色素是用于制造立索尔玉红混在对甲苯胺-间磺酸的未磺化体中。立索尔红在酸性条件下不进入乙醚层,但此副色素却进入乙醚,然后用氢氧化钠处理乙醚,提取出此色素可以定量。

此副色素还可用如下方法定量。色素在甲基纤维素和盐酸中溶解后,甩异丙醚振荡萃取,此色素转入异丙醚层,取此提取液定量,在507nm处测定。

②1-p-甲苯并-2-萘酚:此副色素在前述处理时残留在乙醚层中,可与立索尔玉红分离定量。

对此色素中的副色素的定量,参照A.0.A.C.8th Ed. 7l4(1955)。

(35)红色203号(色淀C,Lake Red C),C.I. 15585。

橙包粉末,微溶于冷水、冷2%氢氧化钠溶液、乙醇。水溶液加盐酸或氢氧化钠生成红色沉淀。溶于盐酸酸化的稀乙醇,呈橙色。在硫酸溶液中呈红紫色,用水稀释生成褐红色沉淀。

此色素的稀乙醇溶液,最大吸收波长于pH1.0~8.5时为488±2nm, pH12.6为485nm, pH14为495nm。

此色素是由2-氯-5-甲苯胳-4-磺酸(色淀红C胺)和β-萘酚耦联生成的,在制造此色素时,在原料β-萘酚中混有α-萘酚,α-萘酚和色淀红C胺耦联,生成易溶于碱的色素[4-(4-氯-2-磺基-5-甲苯并)-1-萘酚]。可利用红色203号和此副色素对碱溶解度的差异分离定量,对存在于此色素中色淀红C胺的定量参照文献A.O.A.C,8th Ed. 735, 1955。

(36)红色204号(色淀红CBA, Lake Red CBA) C.I,15585。

橙红色粉末,不溶于冷水,微溶于冷2%氢氧化钠溶液,呈褐色。溶于盐酸酸性稀乙醇和含有乙撑二胺四乙酸的50%乙酸溶液中,呈橙色。硫酸溶液中呈红紫色。

(37)红色205号(立索尔红, Lithol Red),C.I.15630。

橙红色的粉本末,不溶于冷水和冷乙醇,加温微溶,呈黄红色。几乎不溶于冷2%氢氧化钠溶液,溶于盐酸酸性乙醇溶液,呈橙红色,难溶于丙酮。硫酸溶液呈紫红色,用水稀释生成红紫→红褐色沉淀。

稀乙醇溶液pHl.4~8.3的最大吸收波长为494±2nm。pH14时的最大吸收波长483±2nm。

此色素往往含有如下的副色素。

①1-(2-叠氮素)-2-萘酚:此副色素是在β-萘胺磺酸中混杂的β-萘胺和β-萘酚耦联生成的脂溶性色素,不形成金属盐。因此,用有机溶剂(如苯)提取此色素时,可与立索尔红分离定量。

②2-(2-羟基-1-叠氮萘)-6-萘磺酸:(2,6体)

③2-(2-羟基-1-叠氮萘)-6-茶磺酸:(2,8体)

这些副色素是由混在吐氏酸中的β-萘酸-6-磺酸、β-萘胺-8-磺酸和β-萘酚耦联生成,这些色素的分离定量方法是,在乙酸和8mo1/L盐酸中加热后,将此溶液和乙醚振荡混合,红色205号(立索尔玉红)进入乙醚层中,酸层用异戊醇振荡提取,分离2,6体和2,8体,在495nm处测定。

④2-(4-羟基-1-叠氮萘)-1-萘磺酸:此副色素由混在β-萘酚中的α-萘酚和吐氏酸耦联生成,此副色素难溶于酸,易溶于碱,利用此性质可分离定量。

(38)红色206号(立索尔红CA,Lithol Red CA)。C.I. 15630。

红色粉末,不溶于冷水和冷乙醇,但加温可微溶,呈橙色。几乎不溶于冷2%氢氧化钠溶液。溶于盐酸酸性稀乙醚和含有乙撑二胺四乙酸的50%乙醇溶液,呈橙红色,溶于硫酸呈红紫色。
(39)红色207号(立素尔红BA, Lithol Red BA),C.I. 15630。
红色粉末,与红色206号基本相同。

(40)红色208号(立索尔红SR,Lithol Red SR),C.I. 15630。

红色粉末,和红色206号基本相同

(41)红色219号(艳色淀红R,Brilliant Lake Red R),C.I. 15800。

红色粉末,不溶于冷水,但微溶于冷的2%氢氧化钠溶液,呈红褐色。溶于盐酸酸性稀乙醇溶液,呈橙红色,溶于碱性稀乙醇中呈暗红色,溶于含有乙撑二胺四乙酸的50%乙醇中。溶于硫酸呈红色,用水稀释生成红色沉淀。

稀乙醇溶液在pH6.9时最大吸收波长487nm,在pH13时是483nm。

由乙酸再结晶的本色素m.p.是233℃。

此色素由β-羟基苯甲酸和苯胺合成,苯甲酸中混有β-萘酚时,它和苯胺耦联生成脂溶性色素(偶氮苯-B-萘酚)。此脂溶性色素用苯提取时,可与红色219号分离。

(42)红色220号(深紫酱色, Deep Maroom),C.I. 15880。

红褐色粉末,不溶于冷水,难溶于冷2%氢氧化钠溶液。溶于冰乙酸中呈红色,碱性丙酮中呈红色,碱性乙醇中呈红褐色,盐酸酸性乙醇中呈红色,硫酸溶液中呈红紫色。也溶于含有乙撑二胺四乙酸的50%乙醇溶液中。

稀乙醇溶液pH在1.0~3.5时,最大吸收波长为528±2nm, pH在5.8、8.4、13时,最大吸收波长分别为518、516、498nm。

(43)红色405号(永久红F5R, Permanent Red F5R),C.I. 15865。

红色粉末,不溶于水、乙醇及二甲苯。溶于盐酸酸性稀乙醇、含乙撑二胺四乙酸的50%乙醇中。溶于硫酸溶液呈红紫色,用水稀释生成蓝红色沉淀。溶于浓硝酸呈褐红色,浓氢氧化钠溶液呈红色。

(44)色淀红D(Lake RedD)C.I. 15500。

橙红色粉末,微溶于沸水,呈橙色。

水溶液加盐酸生成橙色沉淀,加氢氧化钠溶液变暗橙色。溶于硫酸呈暗蓝红色,用水稀释生成橙色沉淀。此外,还有钡盐、钙盐。

(45)蓝色201号(靛蓝, Indigo),C.I. 73000。

暗蓝色粉末,不溶于水、冷乙醇。微溶于四氯化碳、氯仿、溶于吡啶、冰乙醇、硝基苯、二氯丙醇,溶于二甲基甲酞胺,呈深蓝色。硫酸溶液呈黄绿色,加热变成蓝色(生成单或二磺酸)。溶于浓硝酸呈红黄色。300℃升华。

(46)蓝色204号(卡尔庞士林蓝, Carbanthrene Blue),C.I. 69825。

暗蓝色粉末,溶于温氯仿、温吡啶、α-氯萘。不溶于水、乙醇、丙酮、甲苯。

溶于硫酸溶液呈褐黄色,用水稀释生成蓝色的沉淀。

(47)蓝色404号(酞菁蓝, Phthalocyanine Blue),C.I.74160。
蓝色粉末,溶于α-氯萘中呈蓝色。还溶于磷酸、二乙基硫酸、喹啉,但不溶于水。不溶于普通的溶剂、油脂、蜡。本品溶于三氯乙酸的饱合水溶液,加浓硝酸呈紫色。溶于硫酸溶液呈暗绿黄色,用水稀释生成铜酞菁沉淀。此色素的α-氯萘溶液的最大吸收波长是680nm(609,648nm)。 550~580℃下不分解,升华。
(48)图2-3-41表示以上待测溶液中各色素的吸收光谱,各图的序号与注解序号相对应。
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