主题：【资料】事業廢棄物溶出液中【氨基甲酸酯类】農藥檢測方法－液相層析／荧光检测器法

四、設備：
（一）樣品瓶：棕色廣口硼矽玻璃材質，容積為500及100mL，附螺旋蓋，其內襯為鐵氟龍墊片。
（二）注射器：容積為500μL之注射針筒或自動注射器。
（三）量瓶：棕色硼矽玻璃材質，容積為10、25、50、100 及1,000mL 。
（四）天平：可精稱至0.2mg 。
（五）pH計。
（六）水樣過濾裝置：容積1 或5mL 之玻璃注射筒，使用直徑13mm且孔徑為0.2μm之濾片。
（七）移動相與OPA 反應溶液過濾裝置：使用直徑47mm且孔徑為0.45μm 之濾片。
（八）氦氣或氮氣：純度99.99％ 。
（九）排煙櫃。
（十）毒性特性溶出設備：參閱「事業廢棄物毒性特性溶出程序」（NIEAR201.10）之四設備。
（十一）高效能液相層析儀：包含移動相泵、附管柱後衍生反應器、螢光偵測器及層析管，儀器操作條件詳列如下（本操作條件僅供參考，操作者可依實際需要調整之）：
    1.層析條件：
      層析管柱：4.6mm×150mm, C-18,5μm之Pickering管柱或其他性質相當者。
      溶劑Ａ：試劑水
      溶劑Ｂ：HPLC甲醇
      流速：1.0mL／min
      層析溫度：45℃
      注射體積：200μL
      溶劑梯度程度設定：
      ──────────────────────
                  動      向        時間變化
      甲醇      0％（試劑水100％）  0  → 1  min
      甲醇        0 → 20％        1  → 3  min
      甲醇        20 → 25％        3  → 8  min
      甲醇        25 → 70％        8  → 35 min
      甲醇        70 →  0％        35  → 36 min
      甲醇      0％（試劑水100％）  36  → 45 min
      ──────────────────────
    2.管柱後水解條件：
      溶液：0.5N氫氧化鈉溶液
      流速：0.3mL／min
      溫度：95℃
    3.管柱後衍生反應條件：
      溶液：OPA 反應溶液
      流速：0.3mL／min
    4.螢光偵測器條件：
      偵測槽：3.5μL
      激發波長：230nm
      發射波長：418nm
五、試劑:
（一）試劑水。
（二）甲醇：HPLC級，使用前通入氮氣除氣。
（三）氫氧化鈉溶液，0.05 N：溶解2.0g氫氧化鈉溶液於適量試劑水中，再稀釋至1000mL。使用前通入氮氣以除去氣泡。
（四）2-氫硫乙醇溶液（1＋1）：將10.0 mL 2-氫硫乙醇及10.0mL之均勻混合，密封貯存於排煙櫃。（注意：本溶液具惡臭）。
（五）硼酸鈉溶液，0.05 N：溶解19.1g硼酸鈉（Na B O ．10H O） 於適量試劑水中，再稀釋至1000mL。本溶液若於使用前一天配製，則硼酸鈉可於室溫下完全溶解於試劑水中。
（六）OPA 反應溶液：先溶解100±10mg 鄰苯二甲醛於10mL甲醇中，再以0.05N 硼酸鈉溶液定容為1000mL，均勻混合後過濾之，濾液中通入氣除去氣泡後，續加入100μL  2-氫硫乙醇（1＋1），均勻混合之。
（七）高濃度一氯乙酸／醋酸鉀緩衝溶液，pH 3.0：取156mL 之2.5M一氯乙酸與100mL 之2.5M醋酸鉀均勻混合。
（八）低濃度一氯乙酸／醋酸鉀緩衝溶液，pH 3.0：取10mL之高濃度一氯乙酸／醋酸鉀緩衝溶液，以試劑水稀釋至1000mL。
（九）胺基甲酸鹽儲備標準品：各別溶解約0.0100g 標準品級之納乃得、安丹、加保扶、加保扶代謝物約（3-hydroxycarbofuran） 、加保利、滅必蝨、丁基滅必蝨、得滅克、得滅克代謝物（Aldicarb sulfoxide 、Aldicarb sulfone）、滅賜克及歐殺滅標準品於適量甲醇中，分別定容為10mL。若標準品之純度大於或等於96％，則在配製儲備溶液持可由稱取之標準品重量直接計算儲備溶液之濃液，而不須考慮因純度不足100％ 所造成之誤差。將儲備溶液移至棕色樣品瓶中，置於4℃ 暗處貯存。本溶液之保存期限為6 個月。市售之各種濃度儲備溶液若其濃度經認證；則亦可使用。
（十）中間混合標準溶液：精取各種胺基甲酸鹽殺蟲劑及代謝物之儲備溶液1.0mL ，置於容積100mL 之量瓶中，再以甲醇稀釋至刻度。若使用市售胺基甲酸鹽標準溶液，則可依所需濃度以甲醇稀釋到適當體積。
      注意事項：本方法所使用之每一種試劑的毒性和致癌性均尚無準確的說明，將每一化合物視為對人體健康具潛在之危害，因此，應於排煙櫃內進行實驗。
六、採樣及保存：
（一）採樣時依據「事業廢棄物採樣檢測方法總則  NIEAR118.00B」。
（二）樣品應於14天內完成事業廢棄物毒性特性溶出程序，溶出液須以低濃度一氯乙酸／醋酸鉀緩衝溶液調整pH至小於6.0 並應保存在4℃ 並於14天內完成分析。
（三）胺基甲酸盬對熱很敏感，所以從樣品採集至分析這期間，須將樣品儲存於4℃ ，並避免陽光照射。

七、步驟：
（一）檢量線製備：
    1.以微量注射針取不同體的胺基甲酸鹽中間標準混合溶液（10μg／m
      L） 於10.0mL量瓶中，以緩衝試劑水稀釋至刻度，配製之濃度為5
      μg／L至200μg／L。
    2.依設備四、（十一）所述儀器分析條件，以注射針或自動注射器注
      入前述檢量線標準溶液200μL，所得層析圖及尖峰滯留時間如圖一
      所示。記錄尖峰面積，繪製各種胺基甲酸鹽農藥及代謝物之注入濃
      度對應尖峰面積之檢量線圖。
    3.每一工作日均須查核檢量線之適用性，其方法如下：注射檢量線中
      間濃度之標準溶液，如所得代合物之尖峰面積與檢量線相對應之波
      峰面積差異在20％以上時，則須重新配製標準溶液及製備檢量線。
（二）溶出液樣品分析：
    1.將5mL 試劑水置於水樣過濾裝置（玻璃注射筒，前端附有濾片固定
      器及濾片）內，使試劑水通過濾片將之潤溼。
    2.經測試證實不會漏之後，將10mL溶出置於過濾器，使通過濾片。
    3.再將10mL溶出液置於過濾器內，收集後面5mL 濾液備用。
    4.依設備四、（十一）所述儀器分析條件，以注射針或自動注射器注
      入經過濾之溶出液200μL，記錄各種胺基甲酸鹽農藥及代謝物之滯
      留時間與尖峰面積，以定性樣品是否含有待測物，並由檢量線求得
      樣品中待測物之濃度。
    5.若尖峰之訊號強度超過儀器之工作範圍時，應使用pH3.0 之低濃度
      一氯乙酸／醋酸鉀緩衝溶液將水樣做適當稀釋。
    6.當無法確認待測物時，可使用質譜儀或其他層析管再確認之。
八、結果處理：
（一）由檢量線可求得各種胺基甲酸鹽農藥及代謝物之濃度（μg／L），
      依下式計算溶出液中各種胺基甲酸鹽農藥及代謝物之濃度。
      各種胺基甲酸鹽農藥及代謝物濃度（μg／L）＝
      A（μg／L）×D
      Ａ：由檢量線求得之各種胺基甲酸鹽農藥及代謝物濃度（μg／L）
      Ｂ：溶出液稀釋倍數
九、品質管制：
（一）績效查核：使用高效能液相層析－管柱後反應系統前必須符合表一
      之績效評估測試。在實驗系統上有重大變動時，必須再次進行績效
      評估測試。
表一、高效能液相層析儀－管柱後反應系統方法評估
─────────────────────────
  測試項目      分析化合物      濃度    需求範圍
                            (ng／mL)
─────────────────────────
  靈敏度      加保扶代謝物    2    分析偵測的雜
(Sensitivity) (3-Hydroxycar-          訊比S/N>3
                bofuran)
  層析效能    得滅克代謝物    100    0.91.0
              (Methiocarb)
(Column Per-  溴化二甲基滅必蝨  10
  formance)  (BDMC)
─────────────────────────
a、波峰高斯因子（Peak Gaussian Factor, PGF）＝
  [1.83×Ｗ    ]／Ｗ
            (1/2)    (1/10)
  Ｗ    ：二分之一波峰高度時之波峰寬度
    (1/2)
  Ｗ    ：十二分之一波峰高度時之波峰寬度
    (1/10)
b、解析度（Resolution of Two Peaks, R）＝
  (t －t )／[1/2(Ｗ ＋Ｗ )]
（二）檢量線：檢量線之相關係數應大於或等於 0.995。
（三）空白分析：每十個或每批樣品（當該批樣品少於十個時）至少執行
      一次空白分析，空白分析值應小於方法偵測極限之二倍。
（四）重覆分析：每十個或每批樣品至少執行一次重覆分析，其差異百分
      比應在其管制圖之可接受範圍。
（五）查核樣品分析：每十個或每批樣品至少執行一次查核樣品分析。查
      核標準品應在品管圖管制範圍內。
（六）添加標準品分析：每十個或每批樣品至少執行一次添加標準品分析
      ，將標準品添加於經溶出的溶出液中，做為樣品添加分析。

十、精密度及準確度：
    單一實驗室於事業廢棄物毒性特性溶出液Ａ及溶出液Ｂ中之方法偵測
    極限值如表二，添加標準品分析所得之精密度與準確度如表三及表四
    所示。
表二、單一實驗室溶出液Ａ及溶出液Ｂ中胺基甲酸鹽方
      法偵測極限值
┌──────────┬──────┬─────┐
│                    │  溶出液Ａ  │ 溶出液Ｂ │
│    化合物名稱      │  (μg／L)  │ (μg／L) │
├──────────┼──────┼─────┤
│Aldicarb Sulfoxide  │    0.94    │  1.23  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Aldicarb Sulfone    │    1.47    │  0.79  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Oxamyl              │    1.47    │  0.88  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Methomyl            │    1.51    │  1.21  │
├──────────┼──────┼─────┤
│3-Hydroxycarbofuran │    1.87    │  1.35  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Aldicarb            │    2.10    │  0.73  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Propoxur            │    2.05    │  1.05  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Carbofuran          │    1.58    │  1.40  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Carbaryl            │    0.84    │  1.57  │
├──────────┼──────┼─────┤
│MIPC                │    3.49    │  1.16  │
├──────────┼──────┼─────┤
│BPMC                │    3.68    │  2.72  │
├──────────┼──────┼─────┤
│Methiocarb          │    2.44    │  2.90  │
└──────────┴──────┴─────┘
註：單一實驗室之測試條件，詳如設備（十一）
十一、參考資料：
（一）行政院環境保護署，修訂已公告事業廢棄物溶出液中有機農藥類檢
      測方法－胺基甲酸鹽農藥研究報告，EPA-88E3S4-03-01，1999。
（二）行政院環境保護署公報，事業廢棄物採樣方法，
      NIEA R118.00B, 1998。
（三）行政院環境保護署公報，事業廢棄物檢測方法總則NIEA R101.00C,
      1999。
（四）行政院環境保護署環境檢驗所，環境檢測標準方法驗證程序準則，
      1995。
（五）行政院環境保護署公報，事業廢物毒性特性溶出程序，NIEA R201.
      10T, 1994。
（六）行政院環境保護署公報，水中胺基甲酸鹽殺蟲劑檢測方法－液相層
      析／螢光偵測器法，NIEA R635.50T, 1994。
（七）行政院環境保護署公報，胺基甲酸鹽檢測方法－高效能液相層析法
      ／螢光偵測器檢驗法，NIEA R613.20C, 1997。
（八）行政院環境保護署公報，事業廢棄物溶出液中滅必蝨、保加扶、安
      丹、丁基滅、必蝨檢測方法－氣相色層分析儀／電子捕捉檢知器，
      NIEA R604.10T,  1990, 1994。
（九）行政院環境保護署公報，事業廢棄物溶出液中納乃得檢測方法－高
      性能液相色層分析法，NIEA R605.10T, 1990, 1994。
（十）行政院環境保護署公報，層析檢驗方法總則，NIEAM102.01C, 1990
      。
＠[表]
行政院環境保護署公報13卷 3期88頁