主题:【求助】GPC柱压突然升高 急!!!

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nannan231
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我是新手,刚做没几天。
我用的是凝胶色谱柱:shodex KW-802.5
流动相为0.01 M Phosphate Buffer, pH= 6.8,Ionic strength was adjusted to 0.1 M with Na2SO4

以前做柱压都很正常329psi,走流动相的时候基线比较稳,但是进两个样后,基线开始向下倾斜。做过两三天后柱压骤然升至471,怎么回事,请各位前辈帮帮忙!

不会不能用了吧?
另外,中间有人失手,给我的柱子走了三个小时的70%的甲醇,会不会和这个有关系?


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nnsss
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nannan231
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那应该怎么做才能让柱压降下来呢?
以前做的时候基线不稳是怎么回事?
nannan231
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shlele
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一定要严格按照说明书使用色谱柱(部分柱子不能用甲醇冲洗)
正常试验结束后,将柱温降到室温继续冲洗柱子20分钟
shlele
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专柱专用,经常改变样品和溶剂会加速色谱柱恶化,降低分离度。
试验结束后,将柱温降到室温继续冲洗柱子20分钟.
一定要严格按照说明书使用色谱柱(部分柱子不能用甲醇冲洗)
viscotektegent
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水相体系吧?
只有多冲洗一段时间再说了,应该不会有太大问题。
如果泵压持续上升,那么有可能是系统中哪里堵了。就比较麻烦了,但是也不难:分段找堵塞的地方,如:进样阀、传输管、过滤膜等等。比较繁琐。
或者在流动相中加些稍强些的酸,再冲洗一段时间再说。没准儿会把堵住的地方冲干净。再不行就换成有机相,继续冲洗。因为有可能别人在甲醇体系中的样品等不溶解在水中,所以造成堵塞,并引起泵压升高。
nannan231
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谢谢版主,谢谢大家!
我冲了好长时间的柱子,柱压降到了400.但是走流动相的时候基线向下斜的厉害,这是什么原因呢?
nannan231
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我冲了好长时间的柱子,柱压降到了400.但是走流动相的时候基线向下斜的厉害,这是什么原因呢?
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