主题：【求助】大家帮个忙

通过蒸发光散射检测器（ELSD）与高效液相色谱仪（HPLC）联用，可用反相C18色谱柱，以甲醇＋0．1％三氟乙酸（TFA）水溶液=10＋90（v＋v）为流动相，分离检测草甘膦制剂中的草甘膦含量。草甘膦的相对标准偏差、平均回收率、线性范围分别为1．3％（n=9）、100．3％（n=5）、0．5-2．5mg／ml（r=0.9994）

这个物质，我没有做过，以下有一篇参考文献，你看看


ELSD—HPLC联用测定制剂中草甘膦的含量

草甘膦、氨甲基膦酸的HPLC测定方法
http://www.instrument.com.cn/show/download/shtml/062007.shtml

液相色谱分析草甘膦的方法

1 主题内容与适用范围
　　本标准规定了10％草甘膦水剂的技术要求、试验方法、检验规则及产品标志、包装、运输和贮存要求。
　　本标准适用于由草甘膦原药与水配制而成的10％草甘膦水剂。
　　有效成分：草甘膦
　　化学名称：N-膦羧基甲基甘氨酸
　　结构式：

　　分子式：C3H8NO5P
　　相对分子质量：169.07（按1989年国际相对原子质量）
2 引用标准
　　GB 601 化学试剂 滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备
　　GB／T 1601 农药氢离子浓度的测定方法
　　GB 1604 农药验收规则
　　GB 1605 商品农药采样方法
　　GB 3796 农药包装通则
3 技术要求
3.1 外观
　　淡黄色至棕褐色液体。当出现沉淀时，在30±2℃恒温水浴中，放置2h，每0.5h充分振荡一次，沉淀物消失即为合格。
3.2 草甘膦水剂应符合下列指标要求：
项　　　目 指　　　标　　
　N（膦羟基甲基）甘氨酸含量，％
　pH值 　4.0～8.5　　
　稀释稳定性（20倍）1） 　　　　合　格　　
　低温稳定性1） 　合　格　　
　热贮稳定性1） 　　　合　格　　
　　注：1）至少每季度检测一次。
　　试验方法
　　除另有说明，本试验所使用的试剂均为分析纯试剂，水应符合GB 6682中的三级水规格 。
4.1 草甘膦含量的测定
4.1.1 高效液相色谱法（仲裁法）
4.1.1.1 方法提要
　　试样用流动相溶解，用强阴离子交换柱和紫外检测器对试样进行分离和测定。
4.1.1.2 试剂
　　甲醇（GB 183）：（经重蒸）或优级纯；
　　水：二次蒸馏水；
　　磷酸二氢钾：分析纯；
　　85％磷酸（GB 1282）；
　　草甘膦标样：已知含量，称量前在105℃干燥2h。
4.1.1.3 仪器
　　液相色谱仪：带可调波长紫外检测器；
　　色谱柱：长25cm，内径4.6mm不锈钢柱，同装Partisil SAX 10μm（或相当的强阴离子交换树脂）填充物；
　　记录仪：5mV（或用数字微处理机）；
　　微量注射器：25μL；
　　pH计。
4.1.1.4 色谱操作条件
　　柱温：环境温度；
　　流速：1.0mL／min；
　　检测波长：195nm；
　　检测器灵敏度：0.10AUFS；
　　进样量：20.0μL；
　　保留时间：草甘膦约7.6min；
　　保护柱：Partisil SAX 10μm长5cm。
　　以上色谱条件系典型操作条件，根据仪器特点，分析者可作适当调整，以获得最佳效果 。

图 1　草甘膦液相色谱图
4.1.1.5 操作步骤
4.1.1.5.1 流动相的配制
　　称取0.73～0.74g磷酸二氢钾于1 000mL容量瓶中，加入适量水使其完全溶解，然后加入160mL甲醇，用水稀释至刻度、混匀，用85％磷酸调pH至1.9。流动相使用前过滤、脱气。
4.1.1.5.2 标样溶液的配制
　　称取草甘膦标准品0.1g（精确至0.2mg）于50mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
4.1.1.5.3 试样溶液的配制
　　称取含草甘膦约0.1g（精确至0.2mg）水剂试样于50mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
4.1.1.5.4 测定
　　在4.1.1.4条色谱条件下，待仪器稳定后，先注入数针标样溶液，直至相邻两针记录器所记录的检测器噪声随时间变化图线称为基线。>基线相交点间的高度称为峰高>峰高或峰面积之差小于1.5％后，按下列顺序进样分析：标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液。
4.1.1.5.5 计算
　　试样中草甘膦的质量百分含量X1按式（1）计算：
…………………………………………………（1）
式中： ── 前后两次进样测得的同一标样溶液中草甘膦峰高或峰面积的平均值；
── 前后两次进样测得的同一试样溶液中草甘膦峰高或峰面积的平均值；
m1── 草甘膦标样的称样量，g；
m── 草甘膦水剂的称样量，g；
w── 标样中草甘膦的质量百分含量（例如：99）。
4.1.1.6 允许差
　　二次平行测定结果相对差值不大于2％。
4.1.2 亚硝化紫外分光光度法
4.1.2.1 方法提要
　　试样在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成亚硝基草甘膦，在243nm波长下，测定该化合物的吸光度，从而计算出试样中草甘膦含量。
4.1.2.2 试剂和溶液
　　硫酸（GB 625）：1＋1溶液；
　　溴化钾（GB 649）：250g／L溶液；
　　亚硝酸钠（GB 633）：6.9g／L溶液，现配现用；
　　草甘膦标准品：已知纯度，称量前在105℃干燥2h。
4.1.2.3 仪器
　　紫外分光光度计；
　　石英比色皿：1cm。
4.1.2.4 标准曲线的绘制。
　　a．标样溶液的配制
　　称取0.1g（精确至0.2mg）草甘膦标准品于250mL容量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀。
　　b．亚硝化反应
　　用移液管吸取上述标样溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL分别置于5个100mL棕色容量瓶中，各加入30mL蒸馏水，2mL硫酸溶液，1mL溴化钾溶液，混合后用移液管加入2.0mL亚硝酸钠溶液后，立即将瓶塞塞紧，充分摇匀，在室温下（室温不低于15℃）静置反应30min，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
　　在同样条件下作试剂空白试验。
　　c．吸光度测定
　　待仪器稳定后，在243nm波长下，用1cm石英比色皿，以试剂空白溶液作参比，测定上述各溶液的吸光度。
　　d．标准曲线绘制
　　以草甘膦浓度ρ（μg／mL）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.1.2.5 操作步骤
　　a．溶液的配制
　　称取含草甘膦约0.1g（精确至0.2mg）的水剂试样于250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
　　b．亚硝化反应及吸光度的测定。
　　用移液管吸取上述溶液5.0mL于100mL棕色容量瓶中，按4.1.2.4.b条中操作步骤进行亚硝化反应，并按4.1.2.4.c条测定其吸光度A1。
　　c．试样溶液（未亚硝化）吸光度测定。
　　用移液管吸取4.1.2.5.a条中试样溶液5.0mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为参比，在243nm波长下，用1cm石英比色皿测定其吸光度A2 。
　　试样溶液中亚硝基草甘膦的吸光度A＝A1－A2。从标准曲线上查吸光度A相对应的草甘膦浓度o（μg／mL）。
　　d．结果计算
　　草甘膦水剂试样中草甘膦的质量百分含量X2按式（2）计算：
…………………………………………………（2）
式中：ρ── 从标准曲线上查得的草甘膦浓度，μg／mL；
m── 草甘膦试样的称样量，g；
w── 标样中草甘膦的质量百分含量（例如：99）。
4.1.2.6 允许差
　　二次平行测定结果相对差值不大于1.5％。
4.2 pH值的测定
　　试样不经稀释，按GB／T 1601中的pH计法进行测定。
4.3 稀释稳定性试验
4.3.1 试剂和仪器
　　标准硬水：342mg／L；
　　量筒：100mL；
　　恒温水浴：30±1℃。
4.3.2 试验步骤
　　用移液管吸取5mL试样，置于100mL量筒中，用标准硬水稀释至刻度，混匀。将此稀释液放入30±1℃水浴中，静置1h。如稀释液均一，无析出物为合格。
4.4 热贮稳定性
4.4.1 仪器
　　恒温箱：温度控制精度为54±2℃；
　　安瓿瓶：容量约20～50mL，颈长约5cm。
4.4.2 操作步骤
　　取20g试样于干净的安瓿瓶中，用火封口，封口时避免水蒸发。称重后，于54±2℃恒温箱中，贮存14d，取出后冷却到室温称重。取重量未发生变化的试样测定其含量，计算分解率。
　　热贮后的相对分解率小于5％为合格。
4.5 低温稳定性测定
　　取100mL试样于250mL三角瓶中，加盖后，在0±1℃的恒温箱中放置7d，取出无结晶，无沉淀为合格。若有沉淀析出，于室温放置24h后充分摇匀，沉淀物全部溶解，也为合格。
5 检验规则
5.1 草甘膦水剂应由生产厂的质量检验部门进行检验。生产厂应保证出厂的草甘膦水剂都符合本标准的要求，每批出厂的产品应附有质量证明书。
5.2 用户有权按照本标准的各项规定，检验所收到的草甘膦水剂质量是否符合本标准的要求。
5.3 采样方法应按GB 1605进行。
5.4 当供需双方对产品质量发生质量争议时，可由仲裁单位按本标准规定的试验方法进行仲裁分析。
6 包装、标志、运输和贮存
6.1 草甘膦水剂的标志和包装应符合GB 3796中有关规定，并加商标。
6.2 草甘膦水剂用清洁、带内外盖的玻璃瓶或塑料瓶装，每瓶净重0.5kg或1kg，外用草套或瓦楞纸做衬垫，也可根据用户要求，采用其他形式的包装。
　　每箱每瓶均应注明：生产厂名、产品名称、批号、生产日期、商标、本标准编号及使用方法，并标有“易碎”、“不可倒置”等运输标志。
6.3 贮运时必须，严防潮湿受热日晒，保持良好的通风，不得与食物、种子、饲料混放。
6.4 本产品在正常贮运条件下，2年内各项指标应符合标准规定的要求
本篇文章来源于 液相色谱分析草甘膦的方法|科学仪器在线 原文链接：http://www.hg17.com/knowledgeview1329.html

HG 2459—93
和上面一样，附件里有图。

草甘磷是个比较难检的项目,主要是易溶于水,难溶于常用有机溶剂.萃取一步不容易很好地实现.

草甘膦、氨甲基膦酸的HPLC测定方法
http://www.instrument.com.cn/show/download/shtml/062007.shtml

草甘膦的重现性不好做，需要注意