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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【每周一问】比色皿宽度及浓度大家谈

浏览0 回复20 电梯直达
oliver404
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发表于：2008/08/25 16:29:43 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分光广度法在化学分析中运用是很成熟很稳定的方法，多数仲裁方法都采用。好像按照理论，是朗波定理：在低浓度情况下，吸光度和容易浓度成正比;我想请教大家：
1：在浓度高到什么程度及吸光度高到多少，比方1.5之后，这个关系就不成立啦，不是线性啦呢？也是说浓度大概在多少这个方法比较合适？
2：很多测定中，比方铝基中猛含量，测定比色的时候要求采用3cm的比色皿，意思是不是它在525nm强度太大，害怕用1cm的造成这个关系不成立啦呢？当然，要求采用0.5cm大家都知道是浓度低，强度弱。我就是不明白用3cm和2cm的是什么道理。还有，一般的722是怎么实现改变比色皿宽度的插槽的
不知道我表达明白没有，期盼高手指点
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2008/8/25 17:42:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1：吸光度到1.5的反应在实际检测中很少有的，基本上反应体系到接近1附近，在标准曲线图上已经走平坦线了！！而比尔定律范围对于方法来说，要看不同的显色剂的，灵敏度，摩尔吸光系数等因素，一般这个范围可以通过制取标准曲线，下端看时候走平，或者上端是否走平来判断这个范围的！！
2：你说的3厘米的比色皿，加长是为了提高原有的吸光度，比如1厘米的吸光度是0.033的，如果用3厘米的，同样溶液，吸光度则可以增加到0.1的吸光度，通常对于光度计来说仪器本身的误差0.1-0.8之间的数据飘逸和稳定性都是最好的！！有很多方法，是增加比色皿厚度，来降低检出浓度，但比色皿厚度越厚则对仪器要求越高，光透后接收灵敏度则要求更高！！不管是722还是所有的紫外可见光分光光度计，比色槽都可以换的，但不是换了就能正常工作的，要看仪器本身允许不允许，如果比色槽加的厚，而感光灵敏度不够的，加厚了也是白加！！
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dandinghe62
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2008/8/25 17:51:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 oliver404 发表:
分光广度法在化学分析中运用是很成熟很稳定的方法，多数仲裁方法都采用。好像按照理论，是朗波定理：在低浓度情况下，吸光度和容易浓度成正比;我想请教大家：
1：在浓度高到什么程度及吸光度高到多少，比方1.5之后，这个关系就不成立啦，不是线性啦呢？也是说浓度大概在多少这个方法比较合适？
2：很多测定中，比方铝基中猛含量，测定比色的时候要求采用3cm的比色皿，意思是不是它在525nm强度太大，害怕用1cm的造成这个关系不成立啦呢？当然，要求采用0.5cm大家都知道是浓度低，强度弱。我就是不明白用3cm和2cm的是什么道理。还有，一般的722是怎么实现改变比色皿宽度的插槽的
不知道我表达明白没有，期盼高手指点

回答:1只考虑吸光度值就可以了,要求吸光度值在0.2-0.8范围内精度高,浓度可以不考虑,浓度高了将溶液稀释至吸光度值在0.2-0.8之间即可,只是稀释倍数高了误差大点.
    2不是.用3cm的比色皿测量精度要比1cm的高,与线性关系无关.如果使用1cm的比色皿,打标准曲线时,标准溶液吸取量要比3cm的比色皿标准溶液吸取量大,这主要也是与吸光度值有关.不知道我表达明白没有，希望对你有帮助。
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精灵鼠
xlj78782
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2008/8/26 8:52:40 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
受教了,获益很大.我也一直受这个问题困扰,今天终于明白了.谢谢!
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IDONTKNOW
qqliu20066
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2008/8/26 16:03:52 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其实根据朗伯比耳定律,吸光度与比色池宽度及浓度成正比,浓度过高,比色池选窄一点,浓度低,比色皿选宽一些,OK
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oliver404
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2008/8/27 12:58:17 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常感谢，多谢指点
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云中漫步
chemweb
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2008/8/28 9:40:58 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
《分析化学》教材中有“表6-7 不同T值时浓度测量的相对标准偏差”

以及计算、推导出的结论：

当透光率为15~65%（吸光度0.2~0.8）时，浓度测量的相对标准偏差都不太大。

这就是吸光度分析中比较适宜的吸光度范围。

---------------------------------------

我觉得教材上的内容比较陈旧，也许是按照“721分光光度计”那个年代来研究的......
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soms-jameskin
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2008/8/28 11:37:32 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 chemweb 发表:
《分析化学》教材中有“表6-7 不同T值时浓度测量的相对标准偏差”

以及计算、推导出的结论：

当透光率为15~65%（吸光度0.2~0.8）时，浓度测量的相对标准偏差都不太大。

这就是吸光度分析中比较适宜的吸光度范围。

---------------------------------------

我觉得教材上的内容比较陈旧，也许是按照“721分光光度计”那个年代来研究的......


现在的范围可以增加到0.1-1.0之间，标准偏差比较小，就是现在的721，好的机器也能做到这个范围！！
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月影寒潭
newshadow
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2008/8/28 11:41:41 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般的仪器都是数值居中时准确率高，就算好的721标时范围是0.1-1.0，为提高准确度也不会选择2边的数值。
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chemweb
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2008/8/28 14:19:35 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 newshadow 发表:
一般的仪器都是数值居中时准确率高，就算好的721标时范围是0.1-1.0，为提高准确度也不会选择2边的数值。


可是现在用的仪器A范围：0.0000 - 4.0000 （小数点后面4位）

只有1cm的比色皿

o(∩_∩)o...原来的理论是不是该修改啦？
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美食城
bjsmsc123
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2008/8/29 12:07:28 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1：在浓度高到什么程度及吸光度高到多少，比方1.5之后，这个关系就不成立啦，不是线性啦呢？也是说浓度大概在多少这个方法比较合适？
答：一般的情况下测量的吸光度在0.2～0.8范围内比较准确，超过这个范围误差就大，这是需要换用光路短的比色皿，然后在乘以相应的倍数。
2：很多测定中，比方铝基中猛含量，测定比色的时候要求采用3cm的比色皿，意思是不是它在525nm强度太大，害怕用1cm的造成这个关系不成立啦呢？
答：通常情况下使用1cm的比色皿，当显色物质浓度小的时候吸光度低压0.2时就要换用2cm或3cm的比色皿。
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