6 薄层色谱法实践技巧
活化:
99. 活化的目的是除去水分。
100. 自然晾干后,活化一下(105摄氏度40分钟左右),置于密封的干燥器保存。
101. 再在105~110℃活化,活化时间为0.5~1小时,冷却后即可使用。
102. 厚板在活化时容易裂,考虑到化学药相对容易分离,所以降低活化温度,自然晾干后,40或60摄氏度的烘箱中2~3小时即可,干燥器中保存。
103. 用于分离中药的薄板需要活化,活化后要立即使用,可以称热点样饱和,不然空气中的水分会导致你作无用功,使得吸附色谱转为分配色谱。
104. 薄层烘干的时候最好不要在带鼓风的烘箱中烘,容易起皱,或者破裂。
点样:
105. 药典:点样器 一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。
106. 药典:除另有规定外,在洁净干燥的环境中,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点状或窄细的条带状,点样基线距的底边15~20 mm,高效板一般基线距底边8~10 mm,圆点状直径一般不大于3 mm,高效板一般不大于2 mm;条带状宽度一般为5~10 mm。高效板条带宽度一般为4~8 mm,可用专用半自动或自动点样器械喷雾法点样。点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。一般不少于8 mm,高效板供试品间隔不少于5 mm。点样时必须注意勿损伤薄层板表面。
107. 点样,可以用进样器,也可以用定量毛细管(有点贵啊,5ul的2块多一根),点样时尽量使点小且圆整,尽量不要破坏板子。
108. 毛细管点样,点样量不能控制。你可以到药店买1~2ml的注射器作为点样器,可以满足TLC鉴别的要求,而且很便宜哦!
109. 点样,我上学的时候,老师用比较便宜的进样器(大约10几块钱吧,10μl即可),将针尖打磨圆滑,老师好像是用锉一点一点锉的,这样点样的时候样品溶液不容易沿针尖上行(甲醇溶液都这样),并且针尖不会刺破已经铺好的薄层板。现在,我和师兄都是实行的这个办法,还是比较实用的,点样量可以精确到0.5?l。当然,点样的时候手不能抖动,动作要轻
110. 要磨平微量进样器的针尖,简单的方法就是,在展缸的盖子上轻磨(当然是靠近中间部分),就很快能解决问题 ,且很平滑。
111. 关于点样:我们一直都用
液相平头进样针,10 ul就够了,如果点样量低于1ul的话,就用
气相进样针。都可以很好的控制点样量,且斑点也可以满足要求。速度也快。可以避免毛细管先快后慢的毛病。
112. 用定容毛细点样管:5 ul ,2 ul,1 ul。
113. 对于点样我也有些心得。原来有专门的点样管,是10 ul规格的,是点10 ul的好说,反正点完就是了,但要点5ul或更少,那就全凭眼力了,做得是一点把握没有啊,但还得点,呵呵。自从发现可以用微量进样器后,不仅可以控制的得心应手,不会因为一按不稳把药液给全点上去导致斑点过大,还可以重复利用节省开支,重要的是还环保。呵呵!提倡广大的兄弟姐妹也用微量进样器替代塑料的点样管,经济又好用。