主题：【学习心得之三】AB液质培训 质谱(MS)massspectrometry李立军资料学习心得

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总结WORD版，我从中找出了一些很总结性的东西并结合自己谈了一些体会
AB液质培训 质谱(MS) massspectrometry 李立军

AB液质培训
质谱(MS)  massspectrometry  李立军

1、电离方式的总结：
根据离子化方式的不同，有机常用的离子源（现在我看好多资料在介绍离子源的时候总是把气相质谱的电离方式和液相质谱的电离方式混在一块说，我觉得应该分开说最好，因为毕竟不能混用，让人看着很不舒服！！！气相是气相、液相是液相应该区别对待。）有如下几种，其中EI,ESI最常用。
    EI(Electron Impact Ionization): 电子轰击电离—硬电离。
    CI(Chemical Ionization): 化学电离——核心是质子转移。
    FD(Field Desorption): 场解吸——目前基本被FAB取代。
    FAB(Fast Atom Bombardment): 快原子轰击——或者铯离子 (LSIMS，液体二次离子质谱) 。
    ESI(Electrospray Ionization): 电喷雾电离——属最软的电离方式。
    APCI(Atmospheric Pressure Chemical Ionization): 大气压化学电离——同上，更适宜做小分子。
    APPI(Atmospheric Pressure PhotoSpray Ionization): 大气压光喷雾电离——同上，更适宜做非极性分子。
    MALDI(Matrix Assisted Laser Desorption): 基质辅助激光解吸电离。
   
重点介绍两种电离方式：
EI(Electron Impact Ionization)电子轰击电离——最经典常规的方式，其他均属软电离。EI使用面广，峰重现性好，碎片离子多。缺点：不适合极性大、热不稳定性化合物，且可测定分子量有限，一般≤1,000。

MALDI(Matrix Assisted Laser Desorption):基质辅助激光解吸离子化——是一种用于大分子离子化方法，利用对使用的激光波长范围具有吸收并能提供质子的基质（一般常用小分子液体或结晶化合物），将样品与其混合溶解并形成混合体，在真空下用激光照射该混合体，基体吸收激光能量，并传递给样品，从而使样品解吸离子化。MALDI的特点是准分子离子峰很强。通常将MALDI用于飞行时间质谱和FT-MS，特别适合分析蛋白质,多肽等大分子。 （这种电离方式好像是最新才出的吧，岛津的工程师还来我们实验室讲过，当时觉得不可思议。不知道这种电离方式成熟不成熟？？？）
2、对于真空系统的理解：   
    由机械真空泵(前极低真空泵)，扩散泵或分子泵(高真空泵)组成真空机组，抽取离子源和分析器部分的真空。
    只有在足够高的真空下，离子才能从离子源到达接收器，真空度不够则灵敏度低。


3、按质量分析器，常见下列几种   
双聚焦扇形磁场-电场串联仪器(sector).
    四极质谱仪(Q).
    离子阱质谱仪（TRAP）.
    飞行时间质谱仪(TOF).（这三种质量分析器听的最好，也了解的最多，应该算是最常见的三种）   
付利叶变换-离子回旋共振质谱仪(FT-ICRMS).
    ┏混合型如四极+TOF，QTRAP等
    串列式多级质谱仪┫三重四极
    (MS/MS)          ┗TOF+TOF

重点介绍以下两种质量分析器：
    四极分析器quadrupole
由两组对称的电极组成。电极上加有直流电压和射频电压（±(U+Vcoswt)）。相对的两个电极电压相同，相邻的两个电极上电压大小相等，极性相反。带电粒子射入高频电场中，在场半径限定的空间内振荡。在一定的电压和频率下，只有一种质荷比的离子可以通过四极杆达到检测器，其余离子则因振幅不断增大，撞在电极上而被“过滤”掉。利用电压或频率扫描，可以检测不同质荷比的离子。优点是扫描速度快，比磁式质谱价格便宜，体积小，常作为台式进入常规实验室，缺点是质量范围及分辨率有限。

飞行时间质谱仪（TOF）：利用相同能量的带电粒子，由于质量的差异而具有不同速度的原理，不同质量的离子以不同时间通过相同的漂移距离到达接收器。
公式  M/Z=2E/v2  v=d/t 代入 M/Z=Kt2
    E:离子动能  v:离子速度  d:飞行距离  t:飞行时间  K: 常数=2E/d2
优点：扫描速度快，灵敏度高，不受质量范围限制以及结构简单，造价低廉等。缺点: 定量较差。以前分辨率较低，最近新仪器分辨率大幅提高如MALDI-TOF，GC-T，LC-T可得高分辨结果。

串列式    ┏混合型 Q+TOF，Q+TRAP等
多级质谱仪┫三重四极(QQQ)
    (MS/MS)┗TOF+TOF

4、进行MS/MS的仪器从原理上可分为两类   
第一类仪器利用质谱在空间中的顺序，是由两台质谱仪串联组装而成。即前面列出的串列式多级质谱仪。
    第二类利用了一个质谱仪时间顺序上的离子储存能力，由具有存储离子的分析器组成，如离子回旋共振仪（ICR）和离子阱质谱仪。但不能进行母离子扫描或中性丢失。
（不明白为什么不能进行母离子扫描或中性丢失？？？？？？？？？）

5、确定分子离子，即确定分子量（很有效的鉴别方式）
氮规则：
    含偶数个氮原子的分子，其质量数是偶数，含奇数个氮原子的分子，其质量数是奇数。
    与高质量碎片离子有合理的质量差，凡质量差在3～8和10-14，21，25之间均不可能，则说明是碎片或杂质。
峰强度与结构的关系：
    丰度大反映离子结构稳定；
    在元素周期表中自上而下，自右至左，杂原子外层未成键电子越易被电离，容纳正电荷能力越强，S>N>O，n>π>σ，含支链的地方易断；
    这同有机化学基本一致,总是在分子最薄弱的地方断裂。
    不同类型有机物有不同的裂解方式，
    相同类型有机物有相同的裂解方式，只是质量数的差异，
    需要经验记忆，很有用。

6、质谱解析的一般步骤
(适于低分辨小分子谱图，若已经高分辨得到元素组成更好)
(1)核对获得的谱图，扣除本底等因素引起的失真，考虑操作条件是否适当
(2)综合样品其他知识: 例如熔点，沸点，溶解性等理化性质，样品来源，光谱，波谱数据等。
(3) 尽可能判断出分子离子。
(4) 假设和排列可能的结构归属：
高质量离子所显示的，在裂解中失去的中性碎片，如M-1，M-15，M-18，M-20，M-31......，意味着失 H， CH3，H2O，HF，OCH3......
(5)假设一个分子结构,与已知参考谱图对照，或取类似的化合物，并作出它的质谱进行对比。
 
7、电喷雾与大气压化学电离的比较   
电离机理：
    电喷雾采用离子蒸发，而APCI电离是高压放电，发生了质子转移而生成[M＋H]+或[M-H]-离子。
    样品流速：APCI源可从0.2到2 ml／min；而电喷雾源允许流量相对较小。
    断裂程度：APCI源的探头处于高温，对热不稳定的化合物就足以使其分解。
    灵敏度：通常认为电喷雾有利于分析生物大分子及其它分子量大的化合物，而APCI更适合于分析极性较小的化合物。
    多电荷：APCI源不能生成一系列多电荷离子。