实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8042207今日发帖：518 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
生命科学仪器综合讨论
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】Talon亲和纯化和镍柱有何差别?

浏览0 回复1 电梯直达
It is me!
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2008/11/21 15:55:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
都是用来纯化his的,但是Talon亲和纯化和镍柱有何差别?
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
dong3626
dong3626
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2008/11/23 13:14:35 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般来现在纯化his用到的镍柱有两种：Ni-NTA和Ni-IDA
Ni-IDA高亲和力纯化柱可用于纯化多种重组表达系统的表达产物，如经细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等表达系统表达的His标签标记的融合蛋白，它是通过三个结合位点与一种三齿螯合剂（亚氨基二乙酸）共价偶联，该螯合剂可结合Ni2+。该纯化介质可在天然、变性或杂交条件下纯化his标签重组蛋白。结合到柱子上的蛋白，用低pH缓冲液或咪唑溶液、甚至组氨酸溶液都可洗脱下来。

Ni-NTA：是一种共价偶联至三齿螯合剂(氮三乙酸或NTA)上的琼脂糖纯化介质（交联度为4％），该螯合剂可通过四个结合区与Ni2+结合，从而纯化His标签的融合蛋白，不会发生Ni2+渗漏。

最早使用的IDA和Ni2+有三个结合位点，结合位点在一个平面上，结合力也最弱，所以在纯化中的泄漏也最多，NTA和Ni2+有4个结合位点，TALON和Co2+也有4个结合位点，形成立体的结合，结合力较强，泄漏也较少。根据产品的介绍，TALON对蛋白质组氨酸的排列有要求，为相邻的组氨酸或处于特殊位置的两个组氨酸，而这一点对Ni-NTA则不那么严格，所以TALON对His标签融合蛋白的选择性也就更高，非特异性蛋白结合就更少。

也没有用过，欢迎用过的版友继续讨论！

赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】Talon亲和纯化和镍柱有何差别?
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁