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液相色谱（LC）

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主题：【求助】这样是正相还是反相？

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jingjingkitten

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发表于：2009/02/24 20:41:28 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用alltima NH2柱做实验，发现一个问题，流动相是乙腈：水（80：20）
待分析的成分有文献报道用氨基柱做的（跟我上面提到的柱子不是同一厂家同一型号），文献中的流动相比例是乙腈：水（90：10），该成分出峰时间约为4min，且乙腈的比例越小，该成分保留时间越短。而我实际做实验的情况是：当流动相是乙腈：水（80：20））该成分的保留时间约20min，且乙腈的比例越小，该成分的保留时间越短。这是怎么回事呢？虽然使用的色谱柱厂家型号不同可能会出现保留时间的差异，但是怎么会发生变化正好相反的情况呢？难道我的这种情况是正相分析？氨基柱正相分析的流动相不是正己烷等吗？糊涂了，希望高人指点！！！！

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2009/2/24 21:25:58 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

其实没怎么看懂LZ的内容，但是如果只是看正相还是反相，则要比较流动相和柱子的极性。乙腈和水的流动相，氨基柱是反相色谱。

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happy王子矜

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2009/2/25 9:04:11 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 jingjingkitten 发表:
用alltima NH2柱做实验，发现一个问题，流动相是乙腈：水（80：20）
待分析的成分有文献报道用氨基柱做的（跟我上面提到的柱子不是同一厂家同一型号），文献中的流动相比例是乙腈：水（90：10），该成分出峰时间约为4min，且乙腈的比例越小，该成分保留时间越短。而我实际做实验的情况是：当流动相是乙腈：水（80：20））该成分的保留时间约20min，且乙腈的比例越小，该成分的保留时间越短。这是怎么回事呢？虽然使用的色谱柱厂家型号不同可能会出现保留时间的差异，但是怎么会发生变化正好相反的情况呢？难道我的这种情况是正相分析？氨基柱正相分析的流动相不是正己烷等吗？糊涂了，希望高人指点！！！！

不知道你奇怪什么，你的柱子和文献的柱子不都是乙腈比例越小，保留时间越短么？哪里出现相反的情况了？

如果你是按照平时的C18柱子的情况判断然后奇怪，那还理解，一般在C18柱子上，乙腈比例越小，保留时间越大；但是在NH2柱上，虽然还是反相的条件，但是可能你样品溶解后的极性在NH2，ACN和水之间，柱子的保留起了很大的作用，这刚好说明了为什么不用C18而用NH2柱。

关键问题还是：不知道楼主奇怪的是什么

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东方逸

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2009/2/25 9:20:36 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wangzijin 发表:

不知道你奇怪什么，你的柱子和文献的柱子不都是乙腈比例越小，保留时间越短么？哪里出现相反的情况了？

如果你是按照平时的C18柱子的情况判断然后奇怪，那还理解，一般在C18柱子上，乙腈比例越小，保留时间越大；但是在NH2柱上，虽然还是反相的条件，但是可能你样品溶解后的极性在NH2，ACN和水之间，柱子的保留起了很大的作用，这刚好说明了为什么不用C18而用NH2柱。

关键问题还是：不知道楼主奇怪的是什么

我想楼主觉得奇怪的是为什么用同样性质的柱子，调大了水的比例（从90：10调到80：20），出峰时间反而延长（从4min到20min）。
我觉得是跟柱子的不同型号有关。
还有楼主在关键字句的地方用的是白色字体，看不清楚。

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2009/2/25 9:30:47 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 uhlan 发表:

我想楼主觉得奇怪的是为什么用同样性质的柱子，调大了水的比例（从90：10调到80：20），出峰时间反而延长（从4min到20min）。
我觉得是跟柱子的不同型号有关。
还有楼主在关键字句的地方用的是白色字体，看不清楚。

同一个柱子的时间不能比较的，只能自己和自己比较。

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老多_小多

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2009/2/25 11:29:13 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

说实话我也没看懂他的意思

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儒雅凤

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2009/2/25 11:34:17 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

看不懂，不明白楼主要问的是什么

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Easy-Boy

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2009/2/26 8:52:52 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

看物质的的特性，乙腈比例小，出峰时间应该靠后。文献估计是说反了，反向色谱柱当增加流动相的极性（即水的比例增加），物质峰的保留时间增加。

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123angel

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2009/2/26 15:29:51 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不同的柱子是不能作比较的

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jingjingkitten

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2009/2/26 18:56:35 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

其实写完之后我也觉得很乱，感谢您还能看懂，我的困惑正如您所说，为什么都叫氨基柱怎么会表现正好相反？因为考虑到做完实验要冲洗柱子的问题，所以我就不知道应该怎么冲洗，怎么能让我的这根氨基柱能用的久一点?
原文是:用alltima NH2柱做实验，发现一个问题，流动相是乙腈：水（80：20）
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