紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】紫外扫描既不出峰还有许多毛刺

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tutm
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原文由 zwyu 发表:
正解。我也正想说他的仪器还不错,呵呵

原文由 auto1235 发表:
这台仪器性能还不错,能测到4A以上才有毛刺。看来是蛮新的机器。

如果不想改变样品,需要更加高档的紫外来测量。选用杂散光小于0.001%T(5A)的仪器测量。

两位先生的建议虽好,但是对楼主来说可能不切合实际。还是先将溶液稀释一下试试,你的样品并没有什么很特殊的地方,这个仪器应该是可以测的。如果确实不行再考虑更高档的仪器吧。
祥子
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原文由 zwyu 发表:
不是这样地。这会儿的绝不是小毛刺这么简单了,可以形象地理解为是大噪声。

原文由 nemoium 发表:
我觉得,这个毛刺,对应的应该是光度噪声指标吧,光度噪声要很小才好。杂散光影响测量的上限,引起曲线向下弯曲,但应该不会带来毛刺。


杂散光会引起误差,不过,想想这句话“杂散光对参考光束和样品光束的影响是相同的”

还有,杂散光是不该有光的地方有光。

假如一个很浓的样品,杂散光绕过样品(不被吸收)到达检测器,这个杂散光会不会引起读数的波动呢?

如果这个杂散光能引起噪声,那对于分辨率很高的仪器,就是说对从单色器出来的出射光的谱带很窄的光,也会有噪声。

由杂散光可能会引起假峰,但不会引起毛刺峰。

不过这个噪声的幅度确实是大了,看图好像吸光度峰峰值有0.2Abs,光度噪声也不大像,可能真是杂散光引起的。
zwyu
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当然了,最简单的办法莫过于再稀释一百倍了。tutm老师真的很一丝不苟,呵呵。我想说的只是一种思路,看一台仪器到底能测到几个吸光度的土办法,tutm老师也可以参考以下,也许买仪器的时候用得到

原文由 tutm 发表:
两位先生的建议虽好,但是对楼主来说可能不切合实际。还是先将溶液稀释一下试试,你的样品并没有什么很特殊的地方,这个仪器应该是可以测的。如果确实不行再考虑更高档的仪器吧。
auto1235
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12楼说的没错,毛刺是噪声,不过这张图让人感兴趣的是在4A以上才出现毛刺,说明杂散光还很小,仪器还很新。属于低端紫外里的好仪器。不知是不是国产的。
zwyu
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正因为吸光度太高(样品浓度太高),导致到达检测器的有效光能量很小。那么,此时微弱的杂散光,就会带来检测器响应值的相当大的波动,就在图中表现为毛刺(噪声)。nemoium老师,我这回可是认真思考过的,不是凭感觉瞎说,哈

原文由 nemoium 发表:
杂散光会引起误差,不过,想想这句话“杂散光对参考光束和样品光束的影响是相同的”

还有,杂散光是不该有光的地方有光。

假如一个很浓的样品,杂散光绕过样品(不被吸收)到达检测器,这个杂散光会不会引起读数的波动呢?

如果这个杂散光能引起噪声,那对于分辨率很高的仪器,就是说对从单色器出来的出射光的谱带很窄的光,也会有噪声。

由杂散光可能会引起假峰,但不会引起毛刺峰。
祥子
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原文由 zwyu 发表:
正因为吸光度太高(样品浓度太高),导致到达检测器的有效光能量很小。那么,此时微弱的杂散光,就会带来检测器响应值的相当大的波动,就在图中表现为毛刺(噪声)。nemoium老师,我这回可是认真思考过的,不是凭感觉瞎说,哈


是的,光度噪声确实也不该这么大,看了下有0.2Abs,杂散光引起的读数变化这么大,那检测器接收到的杂散光一直在变化,杂散光的能量在变化,挺鬼魅的。



auto1235
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1A=10%T; 2A=1%T; 4A=0.01%T
就是说校零时有10000个光子,测样时只剩下1个光子通过样品,如果杂散光为0.01%T, 那么可能也会随机出现一个干扰光子。可惜一个光子在检测器内产生光电转换的电子信号未必会大于电压波动,电磁噪声,你说怎么办呀...

杂散光含有那些光呢?可不仅仅是绕过光路的那些光呀。
祥子
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原文由 auto1235 发表:
1A=10%T; 2A=1%T; 4A=0.01%T
就是说校零时有10000个光子,测样时只剩下1个光子通过样品,如果杂散光为0.01%T, 那么可能也会随机出现一个干扰光子。可惜一个光子在检测器内产生光电转换的电子信号未必会大于电压波动,电磁噪声,你说怎么办呀...

杂散光含有那些光呢?可不仅仅是绕过光路的那些光呀。


呵呵,你这个比喻非常的形象。10000光子,非常的精辟啊。

看楼主的图,毛刺有0.2Abs吧,如果这样,就是在低浓度时,谱图该也有毛刺吧?虽然在低浓度时,正常光的强度是大了,但这时0.2Abs的杂散光光也是存在的了。为什么看不到了呢?

杂散光确实也包含被吸收了的。

电压波动,电磁干扰,也是一样的,如果这么大的波动,那在低浓度时不会看不到的了。

0.2Abs,透过率的变化大概是20%变到32%。单看20变到32,在仪器不稳定时也有这么变的,也不算大,晕了。

auto1235
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原文由 nemoium 发表:
原文由 auto1235 发表:
1A=10%T; 2A=1%T; 4A=0.01%T
就是说校零时有10000个光子,测样时只剩下1个光子通过样品,如果杂散光为0.01%T, 那么可能也会随机出现一个干扰光子。可惜一个光子在检测器内产生光电转换的电子信号未必会大于电压波动,电磁噪声,你说怎么办呀...

杂散光含有那些光呢?可不仅仅是绕过光路的那些光呀。


呵呵,你这个比喻非常的形象。10000光子,非常的精辟啊。

看楼主的图,毛刺有0.2Abs吧,如果这样,就是在低浓度时,谱图该也有毛刺吧?虽然在低浓度时,正常光的强度是大了,但这时0.2Abs的杂散光光也是存在的了。为什么看不到了呢?

杂散光确实也包含被吸收了的。

电压波动,电磁干扰,也是一样的,如果这么大的波动,那在低浓度时不会看不到的了。



这个问题分析下去要考虑的因数就很多了,不过就低浓度的样品,比方说80%T, 那么有8000个光子通过,那么杂散光因素就可以忽略不计了。

至于电路上的噪声,相对来说也算不上什么,尤其是双光路可以消除掉很大部分光源和电路噪声。

其实各种国标的制定者早就想到这个问题,因而规定常规的化学溶液测量吸光度要配置在1A以下。
祥子
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原文由 auto1235 发表:

不过就低浓度的样品,比方说80%T, 那么有8000个光子通过,那么杂散光因素就可以忽略不计了。



双光束也是因为光源对参比和样品的的影响一样吧。杂散光对参比和样品的影响也一样啊。

您说的8000个光子,俺再想想。

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