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主题：【活动--液相柱子选型】液相色谱仪器采购之柱子的选择

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老多_小多
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发表于：2009/06/12 15:46:07 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱类型：通用分析柱、凝胶柱、蛋白质分析柱、半制备/制备柱、离子交换柱及保护柱。
填料类型：硅胶柱、C8柱、C18柱、NH2柱、 CN柱等

我们如何来采购自己想要的色谱柱子呢？
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老多_小多
emoc98311
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2009/6/12 15:48:25 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、正相色谱

正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团 (NH2,APS)和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷（Hexane）,氯仿（Chloroform）,二氯甲烷（Methylene  Chloride）等。

2、反相色谱

反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反相填料有C18（ODS）、C8（MOS）、C4（B）、C6H5（Phenyl）等。
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老多_小多
emoc98311
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2009/6/12 15:49:29 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么是封端技术？

端基封口技术是对残余的Si-OH 用小分子的氯-甲基、氯-乙基键合。
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老多_小多
emoc98311
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2009/6/12 15:54:26 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎样选择填料粒度？

目前，商品化的色谱填料粒度从1um到超过30um均有销售，而目前分析分离主要用3和5um填料进行。填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小，柱压越大，柱压的增加限制了粒度小于3um的填料应用。在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度，但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%；然而，3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。与此同时，柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱，即相同的塔板数或分离能力，但是柱长更短，以缩短分析时间。另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。
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多元泵
wangdd367311
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2009/6/12 16:06:11 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习学习，我们很长时间没有购进新的柱子了，下次买的时候一定注意看看，好好选选，希望能够选到真正适用的柱柱，
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kjh_012
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2009/6/12 16:53:45 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
根据我的学习和一小部分经验,体会到选择色谱柱大致是这样的:
通用分析柱 根据分析目的 主要考虑填料
简单的说
烷基键合相 C18 C8 反相柱 一般分析极性中等 非离子型化合物 采用离子对色谱也可分析某些离子化合物 C18出峰较C8晚
氨基柱  薄壳硅胶粒表面硅羟基键合氨基 正相或反相柱  一般用于分析糖类化合物 多羟基化合物
氰基柱  键合含有氰基的基团 正相或反相 一般用于分析极性较大的化合物
苯基柱 键合苯基 一般分析稠环化合物较C18 选择性好一些
硅胶柱 正相柱 用于分析极性特别大 在C18柱上不保留的或极性特别小 在 c18柱上吸附太强的样品
考虑柱子还要考虑它的pH值耐受范围 新推出的一些色谱柱确实由于它们的良好性能让我们在使用中省去很多麻烦.比如说对C18柱进行的改性 杂化新的基团 进行硅羟基封端 减少对碱性基团的相互作用 从而使得用一种C18柱能够分析较多类型的样品 配置较为简单的缓冲溶液达到分离目的 特别是配合液质联用仪使用的确带来不少便利 通过了解新柱的推介知识 能使我们提高对色谱分离过程中的作用机制 因此 我想在此呼吁 各位色友们 多提供新色谱柱知识 谢谢了
p.s.
色谱柱种类庞杂得很 从作用机制上讲,上面说的好象属于液固色谱、液液色谱或键合色谱;还有用于体积排阻色谱的凝胶色谱柱(分析高分子 蛋白质等) 属于亲和色谱法的一些特殊的色谱柱 比如用于分析手性化合物的
我们能接触和了解的就这么多 可能用到了才会仔细了解吧
该帖子作者被版主 emoc98311加 3积分， 2经验，加分理由：不错
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海纳百川 无欲则刚
shuaxin
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2009/6/12 20:41:50 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵，楼主的知识那叫一个渊博！
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田7
tankyf
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2009/6/13 11:05:20 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看看标准方法上用什么柱子，照着去买^_^
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喜羊羊
gaojie3448
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2009/6/13 14:02:07 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很值得学习，不错，如果再能增加一点超高效柱的就好了
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dongli0607
dongli0607
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2009/6/13 22:00:13 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了，不过还是不算全了，楼主能不能更详细一点呢？填料需要考虑颗粒级配不？呵呵
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吖唲呦
ruanhonglei
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2009/6/14 15:54:29 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多谢楼主教诲
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