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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】乙腈的紫外吸收

浏览0 回复11 电梯直达
sdcuiyujie
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发表于：2009/06/28 19:17:05 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做HPLC用的是水和乙腈，比例是95：5，设定波长是196nm。出现了好多问题，首先作了一下乙腈的吸收，发现吸收很大；另外一个是每次做的谱图都不一样，差别大；基线噪音大；有的峰特别宽。到底是怎么回事？
用的是紫外检测器。
请大家帮帮我啊。



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辣椒王
sirius2008
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2009/6/29 9:14:39 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sdcuiyujie 发表:
我做HPLC用的是水和乙腈，比例是95：5，设定波长是196nm。出现了好多问题，首先作了一下乙腈的吸收，发现吸收很大；另外一个是每次做的谱图都不一样，差别大；基线噪音大；有的峰特别宽。到底是怎么回事？
用的是紫外检测器。
请大家帮帮我啊。






请教一下你测试乙腈紫外吸收的目的是什么？
紫外波长范围一般是说在190-400或者200-400，196nm本来就是属于高能紫外区了，在这个范围紫外吸收强干扰大是不可避免的。你想用这个波长来定量5%乙腈基本上是不可能的事情。
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小余儿
ywl168
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2009/6/29 12:27:36 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在这个波长下乙腈肯定是有吸收峰的，如果水不好也会产生吸收峰，流动相的质量很关键的，还有混合时的脱气也很关键，如果达不到要求建议改用其他检测器，如蒸发光，可能流动相的影响会小些。
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sdcuiyujie
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2009/6/29 15:12:44 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
因为我做高效液相色谱用的流动相是水和乙腈，如果乙腈有紫外吸收，是不是就干扰了样品的测定啊
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2009/6/29 15:14:18 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们学校的液相只有紫外检测器
比较郁闷
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xysu
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2009/6/30 14:44:34 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sdcuiyujie 发表:
我们学校的液相只有紫外检测器
比较郁闷


乙腈在这个波长下会有一点吸收的，乙腈还有水里面的微量杂质在这么低的波长下也会出峰，总之，这么低的波长，基线要走平是很难很难的。
我倒试过一次在200nm下检测，在乙腈水条件下基线根本没法看，后把水改成磷酸盐buffer，搞定。不过我那个化合物在200下吸收很强，浓度也配得高，这样基线噪音大一点也无所谓啦。我们也不定量。
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sdcuiyujie
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2009/6/30 20:08:13 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢，我想试试您的建议。
谢谢大家
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kanjianwei
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2009/7/2 9:57:50 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
检测波长太低了。溶剂干扰太大。建议更换波长或者流动相。。。
另外不知道你用什么溶剂溶解样品，，最好选流动相。。
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sdcuiyujie
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2009/7/3 9:46:47 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相是水和乙腈
我用的溶剂是水
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sdcuiyujie
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2009/7/3 9:48:30 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢大家了
我决定不用紫外检测器了
想试试蒸发光散射检测器
有成果了，告诉大家
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永恒的心
kyj7701284
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2010/3/1 1:16:26 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是你用的乙腈不好，建议更换试一下
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