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主题：【求助】最大吸收波长的问题

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doriphy
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发表于：2009/07/04 15:26:22 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近发现，酸度不一样，扫描出来的最大吸收波长也不一样，我用的4.8-5.8的HAc-NaAc缓冲溶液，pH4.8-5.2的最大吸收波长基本在560-570，随着pH增大，有580、590、595nm,这正常么？如果不是在同一个波长下测A，我没法考察酸度对体系的影响
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2009/7/4 15:45:09 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那可不能是酸的干扰
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tutm
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2009/7/4 19:25:25 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最大吸收波长移动的情况其实是有一定普遍性的，原因很多。但这种情况一般不会对测试影响很大。

1. 对你这种pH敏感的样品缓冲体系要有足够的浓度。如果pH随样品浓度变化较大，应适当增加缓冲剂浓度。

2. 确定一个波长进行测试，即使这个波长在某些时候（浓度）不是最大吸收波长也没关系。测试波长绝不能跟着吸收峰少量变化而改变。

3. 仔细做好标准工作曲线，这是获得准确测试结果的关键所在。在你说的最大吸收波长随样品浓度变化时，不能忽略标准曲线的截距，这时候截距可能比较明显。
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pfz1985
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2009/7/5 10:16:30 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我感觉你的ph溶液选择不合适！
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pfz1985
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2009/7/5 10:17:01 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我感觉你的ph溶液选择不合适！
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