主题：【分享】高效液相色谱仪常见故障处理

( 宁波欧普仪器设备有限公司 刘望才博士 )
  LC-10AT高效液相色谱仪是日本岛津公司1996年的产品  检车器为可变波长紫外检车器 色谱柱为岛津公司的ODS-C18,大连依利特的ODS-C18. 八年的日常工作中遇到了几种故障, 如故障1经咨询该公司的工程师后  ,得以解决 ,故障2,5 是频繁碰到的问题等  特做总结如下
故障1 流动相内有气泡 关闭泵 打开泄压阀  打开PURGE 键  清洗脱气 ,气泡不断的从过滤器冒出 ,  进入流动相 , 无论打开PURGE 键几次 都无法清除不断产生的气泡.
  原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内  ,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖 ,形成菌团  阻塞了过滤器,  缓冲液难以流畅的通过过滤器 , 空气在泵的压力下经过过滤器进入流动相.
处理过滤器浸泡在5%的硝酸溶液内 , 超声清洗几分钟即可 ; 亦可将过滤器 浸泡在5%的硝酸溶液中12-36小时 , 轻轻震荡几次 , 再将过滤器用纯水清洗几次, 打开泄压阀 ,打开PURGE键 清洗脱气 如仍有气泡不断从过滤器冒出,  继续将过滤器浸泡在5%硝酸溶液中 , 如没有气泡不断从过滤器冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团 以被硝酸破坏 , 流动相可以流畅的通过过滤器  打开泄压阀  打开泵 流速调治1.0-3.0ML|MIN, 纯水冲洗过滤器1小时左右 . 即可将过滤器清洗干净  .关闭泄压阀  纯甲醇冲洗半小时即可
  故障2 柱压高原因(1)缓冲液盐份如(乙酸铵等)沉积柱内;(2)样品污染沉积.
处理对于第一种情况先用40-50度的纯水 , 低速正向冲洗柱子  待柱压逐渐下降 后  相应的提高流速冲洗柱压大幅度下降后  用常温纯水冲洗 , 之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟 , 对于第2种情况  ,由样品的沉积引起污染的C18柱 , 和纯水反向冲洗柱子 ,然后换成甲醇冲洗 , 接着用甲醇+异丙醇[4+6]冲洗柱子[冲洗时间的长短由样品的污染情况而定] , 在用换成甲醇冲洗 , 然后用纯水冲洗  ,最后甲醇冲洗 正向冲洗柱子30分钟以上

故障3既无压力指示 又无液体流过[1]
原因1  泵密封垫圈磨损  2 大量气体进入泵体.
处理对于第一种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处不帮助抽出空气.
故障4 压力波动大,流量不稳定.
  原因;系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间家有异物,使得两者不能密封.
处理:工作中注意流动相的量.保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气.如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗.
故障5 出峰不准,峰分叉.
原因(1)色谱柱被污染,(2)柱头填料塌陷.
处理对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后再用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上.如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况.对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷.去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与助内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平.柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上.
故障6 峰面积重复性不佳.
原因(1)进样阀漏夜;(2)加样针不到位.
处理;对于第一种情况更换进样垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速,平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确.日常生活中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲溶液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱住的使用寿命,同时避免注射过量浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱住作好标记,用于不同分析目的的色谱住不要混用等

( 宁波欧普仪器设备有限公司 刘望才博士  )