主题:【讨论】奇怪的事情

浏览0 回复20 电梯直达
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zhufangwei
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原文由 fiona_xiong 发表:
原文由 zhufangwei 发表:
需要提醒你的是,可能你的药物出来了,可是与你标样在走样的时候出峰时间不一样,酸碱性的变化很容易导致碱性药物发生漂移的,所以你还是考虑一下,在你的流动相中加入一定比例挥发性酸。



出峰时间可能会出现偏差这一点我也考虑过,但是离子对总不至于也对不上吧,我做的是MRM模式,两对离子对都没看到来着,另外,我也尝试不做SPE了,直接用乙腈沉淀的,还是没看到这两个组分,觉得好诡异哦


既然用的是MRM模式,怎么会离子对对不上呢,难道你是计算过不同离子之间的丰度比了么,只要是有峰都是你MRM设置里的离子对,但不一定是你要的药物,所以还要看保留时间,特别是在低浓度的情况下。
雾非雾
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个人感觉还是提取的问题,用的提取溶剂对那种目标物的溶解度都很好?
fiona_xiong
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原文由 mcds 发表:
个人感觉还是提取的问题,用的提取溶剂对那种目标物的溶解度都很好?

我的标准储备液溶剂和提取溶剂是一样的,而且我也尝试过先用空白提取,然后再将混标加入提取液中,都没有问题的。既然目标物不再提取液中,那就是可能在提取残渣中了,但是又觉得没道理。
fiona_xiong
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原文由 zhufangwei 发表:
原文由 fiona_xiong 发表:
原文由 zhufangwei 发表:
需要提醒你的是,可能你的药物出来了,可是与你标样在走样的时候出峰时间不一样,酸碱性的变化很容易导致碱性药物发生漂移的,所以你还是考虑一下,在你的流动相中加入一定比例挥发性酸。



出峰时间可能会出现偏差这一点我也考虑过,但是离子对总不至于也对不上吧,我做的是MRM模式,两对离子对都没看到来着,另外,我也尝试不做SPE了,直接用乙腈沉淀的,还是没看到这两个组分,觉得好诡异哦


既然用的是MRM模式,怎么会离子对对不上呢,难道你是计算过不同离子之间的丰度比了么,只要是有峰都是你MRM设置里的离子对,但不一定是你要的药物,所以还要看保留时间,特别是在低浓度的情况下。


现在的问题是不仅离子对没出现,同一保留时间的位置也没峰出
redyou
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风之彩
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请问做的是哪种血浆?大鼠,狗还是人血浆?
既然问题出在蛋白沉淀这一步,就从这里着手。
你可以先用浓度高些地标液试,用乙腈沉淀,先不吹干,进样看怎么样。还可以换成别的沉淀剂。也可以试试提取,看看怎么样,我知道这两种成分提取是可以提出来的。
fiona_xiong
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原文由 redyou 发表:
样品处理完后再加标试过没有?

试过,没问题的
fiona_xiong
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原文由 juju11 发表:
请问做的是哪种血浆?大鼠,狗还是人血浆?
既然问题出在蛋白沉淀这一步,就从这里着手。
你可以先用浓度高些地标液试,用乙腈沉淀,先不吹干,进样看怎么样。还可以换成别的沉淀剂。也可以试试提取,看看怎么样,我知道这两种成分提取是可以提出来的。

是人血来着,现在在想换沉淀溶剂,希望能有点进展,这个问题已经整了好久了,真郁闷
wenjunn
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生物碱的质谱响应应该没有问题,碱化血浆后液液萃取应该可以提取出来的,但是你说的两个生物碱没有了,可是做前处理后的血浆标添确实是存在的,那应该不像基质效应引起的离子抑制。你可以尝试更换前处理方法,更改为液液萃取,另外单一标样添加后进行前处理试试看行不行,有些时候多组分在提取时候也会互相影响的。
小猪飞飞
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1 乙腈沉淀血清蛋白效果不错,可以不用SPE柱。
2 做高浓度试试
3 提取后的样品在加标看看
4 单标试试
5 把沉渣用较高体积的乙腈提取看看,是不是被包裹在蛋白当中
6 氮吹仪温度可以降低些,也可以试试冷冻离心干燥的浓缩
该帖子作者被版主 capinter1积分, 2经验,加分理由:问题列举的很周全
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