主题：【求助】PE 5300读数问题

因为曲线截距的原因，所以扣截距后浓度变负的了。样品浓度本身也低的。

原文由 lansin 发表:
　　我用5300测试时,有时候读出来的浓度是负值(这时的calibration blank的强度值也是负数),如果把校正曲线改成“强制过零点”，就是正值了。请问这是怎么回事啊？什么时候该用强制过零点啊？先谢过了。

　　这很正常，因为在检测过程中存在背景噪音的关系，即使标准曲线强制过了零点，测定时也可能还会出现负值。

原文由 shaweinan 发表:

原文由 lansin 发表:
　　我用5300测试时,有时候读出来的浓度是负值(这时的calibration blank的强度值也是负数),如果把校正曲线改成“强制过零点”，就是正值了。请问这是怎么回事啊？什么时候该用强制过零点啊？先谢过了。

　　这很正常，因为在检测过程中存在背景噪音的关系，即使标准曲线强制过了零点，测定时也可能还会出现负值。

赞同楼上的意见

主要是背景原因导致负值！与强制过零点无关

原文由 lansin 发表:
我用5300测试时,有时候读出来的浓度是负值(这时的calibration blank的强度值也是负数),如果把校正曲线改成"强制过零点",就是正值了.请问这是怎么回事啊?什么时候该用强制过零点啊?先谢过了.

樓上幾個先進的說法已經將問題解釋得非常清楚，不過我在這裡用數學的觀點來解釋。
首先探討PE軟體的計算方法。
我們在分析時順序為Cal. Blank-STDs.-Reagent Blanks-Samples。這應該沒有什麼問題。
儀器得到的都是Intensity值，所以分析的時候我們會得到Cal. Blank的Intensity值，我們叫作ICB；接下來分析STDs，我們會得到ISTD，檢量線製作就是以ISTD - ICB，以濃度作X軸I值為Y軸進行回歸製作檢量線。我想大家都可以理解這樣的製作，也應該跟大家的想法一樣。
接下來作Reagent Blank，我們會得到IRB，不過此時軟體就會計算濃度了，濃度的計算就是IRB - ICB得到的值帶入檢量線中，求得Reagent Blank的濃度，我們叫作CRB。所以大家在做Reagent Blank的時候會得到一個濃度值。分析樣品的時候我們會得到IS，樣品的濃度怎麼算呢?是IS-ICB帶入檢量線算出濃度，然後得到濃度還要減掉CRB(Reagent Blank的濃度)，才會得到樣品的濃度。
所以在原始報告上面會看到樣品的Corr. Int.只有扣掉Cal. Blank的強度，濃度則是有扣掉Reagent Blank的濃度。這是最大的差異。

另外會產生問題的還有檢量線方程式跟Reagent Blank的部分。Reagent Blank的部分比較簡單，有兩種可能性：一、RB的背景很高，甚至比樣品高，這樣子你的值有可能會是負的，這有可能是RB拿錯或汙染；二、RB背景很低，甚至比CB低，這樣子你的樣品會被加成上去，造成你的樣品值超出標準。
檢量線部分都用線性方程式:Y=AX+B，當你B值(截距)很高的時候，你的樣品分析後帶入檢量線會被先扣掉B值，所以有可能成負的，所以你調方程式調整過原點後就解決了，因為方程式變成Y=AX而以，所以不會被扣掉截距。另外也有可能截距是負值，那你的樣品可能就會由沒有值變成有值。

负值很正常，要是负峰就不正常了

非常感谢各位的解答！感谢kuenlin的详尽分析。
果然是reagent blank太高了，后来换了进口的酸来做，就好了。
另外有个问题：有人跟我说，不应该在测试样品的时候，扣掉reagent blank值。我觉得很奇怪。不该扣吗？