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薄层色谱（TLC）
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主题：【转帖】薄层色谱小知识

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发表于：2009/10/01 19:58:40 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、怎样提高点样效率？ 点样是造成TLC定量误差的主要来源。

定量毛细管更适合较小体积的点样；微量注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管理体制的占样误差，建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时，应将毛细管用超声波或不同极性溶课剂清洗干净。在制备样品时，溶样溶剂黏度不能过高，以便于点样；溶剂沸点过低则进样体积易变，过高则会改变展开剂组成；对样品溶解度过高会使样点发生空心现象，常用的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮。经典TLC样点原点一般为直径3mm点间距离1-2cm底边距离1.5cm;HPLC样点原点一般为直径1mm点间距5mm底边距1cm.

2、展开剂的选择

TLC与HPLC相比，一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性，流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1－0.7之间并达到较好的分离，与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大，溶质Rf值越大，但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相似相溶原理，要使用多元溶剂体系。一般展开剂体系选择如下：根据分离样品性质、薄层色谱板性质选择一个二元溶剂体系，通过调节溶剂比例以寻求适合Rf 值，适合的Rf值找到后，再寻求极性参数相同的二元溶剂体系两个，以这三个组成为三点组成一个三角形，则可看到：三角形顶点是二元体系，边是三元体系，三角形内是四元体系，并且极性一致，可根据几何原理得出任一点组成，这种方法较为直观，也较简单。

理想的显色希望灵敏度高，斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好，斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比，在样品组成并不完全已知的情况下，通用显色方法显得尤为重要，通用显色方法主要有：

1、紫外照射法：方便、不破坏样品；

2、碘蒸气法：通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用；

3、荧光试剂：制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别，有荧光物质更明显；

展开剂选择的大概原则

选择展开剂一般要用混合溶剂：一般要有一种对所要展开样品溶解度较大的溶剂，视样品的极性，再选用相应的体系

极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统

极性较大的用甲醇：氯仿系统

极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统

拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
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2009/10/2 0:52:13 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵
用制好的板比自己做的好用
不过要银子
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englishchenqy
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2009/10/7 15:06:11 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
通常出报告的实验使用买来的板子，自己做实验，使用自己做的。
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xinlulicheng624
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2009/10/31 11:23:50 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
展开剂的选择挺麻烦的，要不停的摸索
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liudi20052006
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2009/12/12 11:50:07 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
点样好麻烦啊，总点不好
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marchingon
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2010/9/28 4:15:47 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
总感觉药典上那些薄层鉴定的条件不是人找出来的；
4、5元体系，而且有的用静置后的分层，哎，真厉害。
按照那个条件跑出的板确实挺好
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头像更新中，请稍候…
kaikaifeng
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2010/9/28 18:30:21 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在用薄层定量的很少了~
误差太大了~
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zaofairy
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2010/11/3 11:23:33 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知道TLC板厚度对展开的影响有多大？
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