主题：【极限体验活动&原创大赛】极限色谱使用比较-伯胺化合物

有幸参加极限色谱柱的试用活动，分享一下使用结果，希望对大家在色谱柱使用上有点帮助。言归正传。
本次检测目的是监测有机合成反应进程，待测产品本为一个侧链接乌洛托品的化合物（B），原料为含氯代乙酮侧链的物质（A），B在酸性条件下极易水解，在100mmol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇（1：1）（用三乙胺调PH＝7.0）条件下，一个小时内几乎完全水解成伯胺化合物（C）,C由B上的乌洛托品开环所得。本化合物主体为较大的非极性基团，所以色谱柱选择上首选C18柱，分析条件选择有分析结果如下：
仪器：岛津LC-10AT泵、SPD-10A紫外检测器、检测波长：224nm 色谱柱：C18（250*4.6 5um），一根为极限色谱柱，一根为其它品牌色谱柱。
(1)甲醇-水（1：1） 由于易水解，没有调节PH，峰形很差，像一个山包，重复性也差，有时什么峰也不出来，以为是样品分解了，结果临用新配的样品结果也是如此，所以放弃些流动相。把甲醇换成相似洗脱能力的乙腈，结果也是一样。
(2)甲醇-水（1：1）（含2%三乙胺，用磷酸调节PH＝7.0） 实验结果与（1）没有明显差别，常常出现的是B与C共存的现象，5分钟内用流动相溶解样品后进样，结果也是一样。
(3)100mmol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇（1：1）（用三乙胺调PH＝7.0）这个是没有办法的情况下，大大加大了缓冲盐的深度，结果还是存在样品水解的情况。
直到现在还没有找到一个重复性好，能很好反应实验进程的流动相，最后经过与合成人员的探讨，得知B完全水解仅会产生C，几乎不存在其它副反应，且高压可能会加速B水解，得知B完全水解仅会产生C，几乎不存在其它副反应，最后决定直接使B转化为C后再检测也不失为一个好办法，C性质稳定，容易检测。以下是在流动相（3）下得出的谱图。
极限色谱柱：


其它品牌：



总结：对比中，在纯甲醇 1.0ml/min下，极限色谱柱压为5.8MPa，其它品牌色谱柱压为6.7MPa,加有保护柱，可能会略高于其它用户。4.0min为物质C，要完全水解下，未见B色谱峰，24.2min\27.3min为A，理论塔板数、分离度明显极限色谱柱较高，分析时间较短，但在峰形上，特别是A物质来看，极限色谱柱没有体现出优势，不过从A物质的峰形没有托尾上看，极限色谱柱在封端技术上有其独到之处。

本实验试用的三种流动相非是最佳方案，后述会继续了解极限色谱柱在酸性条件下的表达，其使用寿命也是一个重要的考察项目。前几年也恰好参与过极限色谱柱的试用活动，检测的物质为18种氨基酸注射液，方法为柱前衍生，使用效果还不错，有做这一方面的版油可以一试。