原文由 tanlina(tanlina) 发表:原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)
我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。
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七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)
我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。
原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:原文由 tanlina(tanlina) 发表:原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)
我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。
这种解释好像也有一定的道理,但如果是这样的话,键合相这么容易就溶解了,那么用一两年的柱子也就根本不存在了,因为反相条件一般都是含水的,但事实是这样的柱子很多,所以也感觉不太对。后面所说的验证方法我觉得不妥,如果这么冲一下前后柱效就相差很大,我们的柱子能卖给谁啊,就算白给您也不会要的是吧呵呵。。。
原文由 xy4585618(xy4585618) 发表:原文由 tanlina(tanlina) 发表:原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)
我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。
不赞成次说法!现在一般的色谱柱都可以用高比例的水冲
如果固定相流失,怎么会出现峰呢?假如真是,那么柱子走不了几针样品就可能报废!建议测一下柱效,对比一下!
柱效相差比较大,不一定就是固定相流失,也有可能是柱头污染,反冲既可以解决