主题:【极限体验活动&原创大赛】四个厂家五种型号色谱柱的对比实验

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simontang
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对我很有帮助
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zxhcnf
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七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)



我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。



这种解释好像也有一定的道理,但如果是这样的话,键合相这么容易就溶解了,那么用一两年的柱子也就根本不存在了,因为反相条件一般都是含水的,但事实是这样的柱子很多,所以也感觉不太对。后面所说的验证方法我觉得不妥,如果这么冲一下前后柱效就相差很大,我们的柱子能卖给谁啊,就算白给您也不会要的是吧呵呵。。。
〓猪哥哥〓
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可能跟填料的合成方法、键合原料的残留和填充技术有关吧。
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samanthalas
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可能跟填料的合成方法、键合原料的残留和填充技术有关吧。

这个问题大家讨论的非常深入,非常热烈啊!键合原料的残留,很有道理啊!
冷冷的冰雨
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七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)



我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。


不赞成次说法!现在一般的色谱柱都可以用高比例的水冲
如果固定相流失,怎么会出现峰呢?假如真是,那么柱子走不了几针样品就可能报废!建议测一下柱效,对比一下!
柱效相差比较大,不一定就是固定相流失,也有可能是柱头污染,反冲既可以解决
冷冷的冰雨
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可能跟填料的合成方法、键合原料的残留和填充技术有关吧。

这个问题大家讨论的非常深入,非常热烈啊!键合原料的残留,很有道理啊!


厂商的人来了,专业人士来了!解决一下3个问题!

小s版主:晕!我是厂商人士,专业可不敢了,zxhcnf是厂商专家!
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zxhcnf
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可能跟填料的合成方法、键合原料的残留和填充技术有关吧。


有可能,猪哥哥说的有道理
象这种鬼峰不太好解释,但一般的只要不是持续的被洗脱出来干扰测定,不影响使用,我觉得就没什么大问题
qdy
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七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)



我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。



这种解释好像也有一定的道理,但如果是这样的话,键合相这么容易就溶解了,那么用一两年的柱子也就根本不存在了,因为反相条件一般都是含水的,但事实是这样的柱子很多,所以也感觉不太对。后面所说的验证方法我觉得不妥,如果这么冲一下前后柱效就相差很大,我们的柱子能卖给谁啊,就算白给您也不会要的是吧呵呵。。。



据我所知,微球键合的技术,这个是大品牌色谱柱的卖点。键合相不容易溶解,只是在特定的条件下,比如在高水相(一般有机相不超过10%)条件下,长时间冲洗时,碳链是容易被溶解掉的,而当有机相含量是0即纯水时,被洗脱下来的几率就更大。化学反应,是需要条件的。
“如果这么冲一下前后柱效就相差很大,我们的柱子能卖给谁啊”我是做知名品牌色谱柱销售的,在销售的过程中我发现很多客户对自己手中的色谱柱不熟悉,也就谈不上去爱护色谱柱,维护色谱柱。您说的“这么冲一下”的人大有人在,而这么冲过之后,一次可能侥幸没问题,但几次之后,色谱柱的寿命和柱效是大大降低的,因为这样报废的色谱柱也不在少数!只是很多化验员不知道,也怕担责不去提使用方法的事情罢了。一句话:很多色谱柱怕进“纯水”。因此针对高水相或纯水做流动相的实验,很多厂家开发了专用于纯水的色谱柱,比如**品牌的SB-AQ柱,bonus-rp柱。
色谱柱、色谱仪都不怕用,就怕不用,关键在于方法。

tanlina
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原文由 xy4585618(xy4585618) 发表:
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七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰,这些峰可能来自哪里?
2、采用流动相走基线的时候,极限XB色谱柱出峰最多,峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚?
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少?AQ色谱柱如果不用纯水系统,可否当XB来使用?(如果色谱图没有太大差异)



我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题,就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的(除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱),水相太高,容易把硅胶小球上的键合相溶解,溶解下来的成分被检测器检出;当换成楼主测样的流动相时,流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强,把溶解下来的成分进一步洗脱出,造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同,被水溶解的程度也不同,表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题,好像也挺简单,就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效,待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效,如果前后相差较大,则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的,苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说,还望指教啊。


不赞成次说法!现在一般的色谱柱都可以用高比例的水冲
如果固定相流失,怎么会出现峰呢?假如真是,那么柱子走不了几针样品就可能报废!建议测一下柱效,对比一下!
柱效相差比较大,不一定就是固定相流失,也有可能是柱头污染,反冲既可以解决



“高比例的水”这个比例很微妙,呵呵
“固定相”是硅胶小球上的C链,有机物啊,所以会出峰。
楼主用的是新柱子,不太可能是柱头污染造成的。
有些厂家会建议色谱柱反冲,或者是拆柱塞板把脏东西弄下去,或者是把柱头再填一下,其实这些差不多都是“死马当做活马医”,修了之后能挺一会儿,但基本上意义不大。除非是实验要求不高,不管怎么弄测出来的峰都满足要求,呵呵,我见过一个实验员特别神,她反着用色谱柱做药品检验,试想,这样的药出厂,你敢吃吗?所以他们厂出厂的药打死我也不买,虽然有药检所把关。。。

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