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主题：【讨论】用什么方法判断色谱柱头的填料被样品污染了？

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发表于：2010/04/04 17:11:06 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用什么方法判断色谱柱头的填料被样品污染了？

该帖子作者被版主 zxhcnf加 10积分， 2经验，加分理由：欢迎来极限色谱柱版讨论

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2010/4/5 11:55:23 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以从多方面去判断，比如同样的色谱条件，同样的样品，色谱峰行差了很大，或者出现了一些鬼峰，这个时候可以怀疑；再者就是压力变高很多，柱头污染，一般都会导致系统压力变高等

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2010/4/12 23:37:03 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 毛毛儿(yangxy12345) 发表:
可以从多方面去判断，比如同样的色谱条件，同样的样品，色谱峰行差了很大，或者出现了一些鬼峰，这个时候可以怀疑；再者就是压力变高很多，柱头污染，一般都会导致系统压力变高等

这些都是凭经验，有没有用数据说话的方法。

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2010/4/12 23:40:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谱柱污染
保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。
样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。
避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。
使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。

该帖子作者被版主 samanthalas加 5积分， 2经验，加分理由：感谢您的分享

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