主题:【我侃药典】关于薄层扫描定量双波长法两个波长点的选择问题的讨论

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睿武孝文
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以下的话均为本人实验过程中的切身体会,或许有不少错误,敬请各位专家不吝赐教!
所谓的双波长:一个样品波长
λs,一个参比波长λR
在选择这两个波长点时,一般是先做光谱扫描,对斑点和空白区域进行光谱扫描。这样会出现两个光谱图。
我的认识是最好是λR处斑点和空白的吸光度值重合,即吸光度值是一样的;而在λs处,斑点最好适合地大于空白的吸光度值。这样在做色谱扫描时,先以λR扫描时,色谱基线会是一条比较平稳的直线;以λs扫描时,到斑点处会显示良好的吸收峰。
这是我对双波长的理解。
但请大家看中国药典2005年版一部363页,关于元胡止痛片中延胡索乙素的薄扫含量测定,其两个波长分别是346nm和200nm,我对200nm存在较大的疑惑,200nm是一个临界点,能用吗?反正我们在做实验时,这两个波长是不合适的。
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小卢
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我原来也用过,当时的情况是,一个波长1用来扣除,做背景,一个波长2用来检测。
当时不是很理解,现在我想想,目的应该是:在波长2下检测时,会出现部分杂质,而这部分杂质在波长1处能检测到,因此在波长2检测下扣除在波长1处的检查,也就是把波长1作为空白来用啦。
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