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原文由 tigertooth(tigertooth) 发表:原文由 xinxueqian(xinxueqian) 发表:
用蒸发光散射检测器不能说明你的样品纯度，应该用紫外
多糖紫外一般没吸收，不过加一个紫外倒是一个好主意，因为蛋白肯定有吸收。
你用的TSK柱适合多糖和水溶性高分子，蛋白有可能会有吸附，至少我用这款柱子做BSA时，用Ph6.8的PBS，蛋白质单体和多聚无法分开，而且拖尾严重。所以我推测，你离子交换柱分出的3个峰，也许有一个是蛋白质的，但它上TSK柱就被柱吸附了，别忘了你是用纯水做流动相，洗脱能力可定不够。
我建议你用紫外加示差试试。
原文由 hnkjzyj(hnkjzyj) 发表:原文由 tigertooth(tigertooth) 发表:原文由 xinxueqian(xinxueqian) 发表:
用蒸发光散射检测器不能说明你的样品纯度，应该用紫外
多糖紫外一般没吸收，不过加一个紫外倒是一个好主意，因为蛋白肯定有吸收。
你用的TSK柱适合多糖和水溶性高分子，蛋白有可能会有吸附，至少我用这款柱子做BSA时，用Ph6.8的PBS，蛋白质单体和多聚无法分开，而且拖尾严重。所以我推测，你离子交换柱分出的3个峰，也许有一个是蛋白质的，但它上TSK柱就被柱吸附了，别忘了你是用纯水做流动相，洗脱能力可定不够。
我建议你用紫外加示差试试。
谢谢斑竹....
首先，实验室有PDA、ELSD，没有示差...所以，洗脱条件这一块一直没有好的办法，不能用缓冲液洗脱，限于自身条件.....
其次，我用离子交换柱分出的3个峰，蛋白含量都没超过10%，应该都属于多糖...
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