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液相色谱（LC）

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主题：【求助】求助：HPLC，保留时间不稳定？

浏览0 回复28 电梯直达

lwjxzj

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发表于：2010/04/26 17:10:07 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位朋友好
目前在做油酸的高效液相方法建立，可是选定的色谱条件下保留时间极其不稳定，同样的样品，两针之间差别都较大（前后进4针，用时大约2 h，保留时间由6.539变到5.868 min），请教有做过的吗，请高人来给分析下，先行谢过。
色谱条件：乙腈：水=8：2;流速：2ml/min;柱温：20度；波长：205 nm;色谱柱：C18.
谢谢。

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2010/4/26 17:49:17 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你的流动相比较简单，应该没有什么问题。保留时间和流速，柱温，流动相，柱子有关，先检查你的流速是否准确大概可以看压力变化可以判断。柱温20度我觉得是个问题，室温可能对柱温有影响。柱子是否正常，好好冲洗冲洗。

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xue2009

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2010/4/26 19:29:18 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

流速大啦，建议减小流速

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xuyuan924

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2010/4/26 20:09:16 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

泵的压力不稳柱子管道检查一片侃侃

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lwjxzj

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2010/4/26 20:09:36 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 micalezhang(micalezhang) 发表:
你的流动相比较简单，应该没有什么问题。保留时间和流速，柱温，流动相，柱子有关，先检查你的流速是否准确大概可以看压力变化可以判断。柱温20度我觉得是个问题，室温可能对柱温有影响。柱子是否正常，好好冲洗冲洗。

在测定过程中压力还是比较稳定的，柱子也经过了长时间的冲洗，我们的实验是一次进样测定三种物质，其它两种都很稳定，就是油酸的保留时间差别大。20度的温度是柱温箱控制的，应该也是比较准吧。
nancy7752，仪器是Agilent 1100，流动相是配置好走的等度而非在线混合，流速的重复性我要在测定一下。
谢谢

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