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主题：【求助】示差检测器检测糖出现溶剂峰

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大川之子,纵横四海
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发表于：2010/05/04 19:57:52 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相:乙腈:水=40:60,色谱柱:NH2柱,250MM,柱温40,示差温度40,流动相溶标准品及样品,
问题:
1,进流动相时,一正一负相连接出现有正负峰,没有完全分离
2分别溶剂时,乙腈为正峰,水为负峰,两者保留时间很接近
3标准品的浓度大小不一样,但峰面积变化不大,都很近接,不能分别.

帮你转到液相色谱板块~~——BY：dyann
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2010/5/4 21:28:25 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看看色谱图？浓度差多少，峰面积变化不大？
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大川之子,纵横四海
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2010/5/5 9:28:02 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度相差数倍,两倍,五倍,十倍也是差不多的峰高,面积变化也不大
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tigertooth
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2010/5/5 16:43:18 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
示差的信号来自折射率的差别，也就是样品折射率与溶剂折射率的差，当同一物质时，一般是浓度越大，峰面积（高）越大，但对于不同物质就不能简单的看浓度了。
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yankunsu
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2010/5/5 17:14:03 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果样品的折射率差别不大，可以考虑换检测器
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大川之子,纵横四海
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2010/6/3 11:33:35 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该物质没有紫外吸收,只能用示差检测器进行,四楼所说换检测器是不是指换其他不同类型的检测器还是换另一个示差检测器?
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johne0212
JOHNE0212
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2010/6/3 11:51:57 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 大川之子,纵横四海(chuangu120) 发表:
该物质没有紫外吸收,只能用示差检测器进行,四楼所说换检测器是不是指换其他不同类型的检测器还是换另一个示差检测器?


不用换检测器，你的流动相中水的比例太大，因为现在做糖NH3柱是用正相原理分离的，水相越多，物质洗脱出来越快，分离度越不好，下面我给你一张图，流动相的比例是（Acetonitril：water=75：25， v/v）



如果你要检测物质含量特低到ug/ml级的话,你可以考虑换到HPLC-ELSD或者HPLC-CAD,如果没有那么低,用HPLC-RID足够了.
该帖子作者被版主 xky0230699加 3积分， 2经验，加分理由：积极应助
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大川之子,纵横四海
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2010/6/4 15:32:35 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 johne0212(JOHNE0212) 发表:
原文由 大川之子,纵横四海(chuangu120) 发表:
该物质没有紫外吸收,只能用示差检测器进行,四楼所说换检测器是不是指换其他不同类型的检测器还是换另一个示差检测器?


不用换检测器，你的流动相中水的比例太大，因为现在做糖NH3柱是用正相原理分离的，水相越多，物质洗脱出来越快，分离度越不好，下面我给你一张图，流动相的比例是（Acetonitril：water=75：25， v/v）



如果你要检测物质含量特低到ug/ml级的话,你可以考虑换到HPLC-ELSD或者HPLC-CAD,如果没有那么低,用HPLC-RID足够了.

HPLC-RID 检测灵敏度一般为多少?
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johne0212
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2010/6/4 16:04:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 大川之子,纵横四海(chuangu120) 发表:
原文由 johne0212(JOHNE0212) 发表:
原文由 大川之子,纵横四海(chuangu120) 发表:
该物质没有紫外吸收,只能用示差检测器进行,四楼所说换检测器是不是指换其他不同类型的检测器还是换另一个示差检测器?


不用换检测器，你的流动相中水的比例太大，因为现在做糖NH3柱是用正相原理分离的，水相越多，物质洗脱出来越快，分离度越不好，下面我给你一张图，流动相的比例是（Acetonitril：water=75：25， v/v）



如果你要检测物质含量特低到ug/ml级的话,你可以考虑换到HPLC-ELSD或者HPLC-CAD,如果没有那么低,用HPLC-RID足够了.

HPLC-RID 检测灵敏度一般为多少?


对于糖来说,上柱量做到10ug是没有问题的.
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