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液相色谱（LC）
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主题：【求助】冲洗色谱柱

浏览0 回复13 电梯直达
liuyuan198815
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发表于：2010/05/05 18:13:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在冲洗色谱柱过程中为什么要逐渐改变溶剂组成？
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2010/5/5 18:18:36 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好像没有这种说法吧
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〓猪哥哥〓
03yx2
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2010/5/5 20:26:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你说的是梯度冲洗色谱柱吧，那是为了保证冲洗彻底，一个等度冲洗有些成分是冲洗不出来的，同时梯度洗还可以省人力，仪器自动清洗完毕后关机即可！
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huaibeijiayuan
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2010/5/5 20:29:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
根据样品的保留因子不同，采用不同的溶剂，以便于更快将强保留物质尽快冲洗出来，节约时间，就像气相色谱的程序升温，以便于高沸点物质尽快赶出来。
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有水有渝
xky0230699
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2010/5/5 22:27:42 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个过程比较费时费试剂，有条件的话，一定时间就给色谱梯度清洗一下，可能有利于延长色谱柱的使用寿命。一般反相色谱柱的冲洗法是10%甲醇与甲醇（或乙腈）以1.0的流速各清洗60分钟。
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2010/5/6 9:11:12 Last edit by xky0230699
柏坡
hgycook
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2010/5/5 22:57:59 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度洗还是有好处的，20A的梯度设置有点不方便，所以我很少走梯度洗色谱柱。其他工作站好一点，建一个梯度洗柱子的方法很必要，省时省力。不要小看色谱柱冲洗，真正冲洗干净不是想当然的做法。
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有水有渝
xky0230699
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2010/5/6 9:10:21 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 柏坡(hgycook) 发表:
梯度洗还是有好处的，20A的梯度设置有点不方便，所以我很少走梯度洗色谱柱。其他工作站好一点，建一个梯度洗柱子的方法很必要，省时省力。不要小看色谱柱冲洗，真正冲洗干净不是想当然的做法。

我觉得梯度设置还不算不方便，设置好后保存方法，以后就不用再设置了。
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1818
xyhdcm2002
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2010/5/6 10:58:40 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是为了把色谱柱知冲洗干净！！最后保存在甲醇或乙腈中啊！！
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liuyuan198815
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2010/5/6 21:09:31 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个过程比较费时费试剂，有条件的话，一定时间就给色谱梯度清洗一下，可能有利于延长色谱柱的使用寿命。一般反相色谱柱的冲洗法是10%甲醇与甲醇（或乙腈）以1.0的流速各清洗60分钟。


为什么这样可以延长色谱柱的使用寿命呢？
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有水有渝
xky0230699
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2010/5/7 13:20:27 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以更完全的把色谱柱的污染物清洗干净，就像气相色谱柱的老化一个道理。
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chengzi1014
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2010/5/7 17:08:01 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 liuyuan198815(liuyuan198815) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
这个过程比较费时费试剂，有条件的话，一定时间就给色谱梯度清洗一下，可能有利于延长色谱柱的使用寿命。一般反相色谱柱的冲洗法是10%甲醇与甲醇（或乙腈）以1.0的流速各清洗60分钟。


为什么这样可以延长色谱柱的使用寿命呢？


运用梯度洗脱能保证尽可能的把各种性质的杂质冲洗下来，如果只用某一梯度如5%甲醇水或者某几个等梯度，诚然可以把无机盐等极性较大的杂质冲洗下来，但一些极性稍小点的杂质，可能还是会保留在上面，用梯度洗可以较好的把杂质冲下来，自己通常是5%-100%有机相，60min，100%有机相20min。
一点自己看法，请各位指教。
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