主题:【求助】怎样根据流速选择合适的色谱柱?

浏览0 回复9 电梯直达
sacid
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各位板油,我手头的液相是半制备型的,双泵(各泵最大流速为50ml/min),目前配的柱子是20mm*250mm,15微米碳18,我想换一个大一点的柱子。请问各位达人,如何选择柱子?有什么经验公式么?谢谢大家了!
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21kgtan
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选择柱子大小最主要考虑的是你要制备样品的规模吧,一般制备柱都可以超载上样。填料的话就要看制备什么样品了。
我们实验室用的是Varian填装柱,43mm*250mm和770*250mm的,自己填装,制备多肽为主,上样量最大可以到2克一针。
sacid
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谢谢楼上的板油!
我们的填料应该是用硅胶基碳18填料,这种柱子自己不好填装吧?或者有什么高招?愿闻其详。
有水有渝
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sacid
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水兄,可否详细说说?我觉得选择填料应该考虑样品的性质,主要指化学性质;选择柱子大小跟什么性质有关系呢?
fobhcff
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有水有渝
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一般与柱内径都有一个相配的流速,像4.6mm id的一般都是1.0ml/min ,柱的大小与你的上样量有关,要考虑柱容量的问题,上样量大,最要选择内径大点的,内径大了,流速也要适当的提高。
21kgtan
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我们的填料也是C18的,10微升。43mm*250mm流速一般是25-50ml/min;770*250mm的流速一般50-100ml/min,压力在1000-1500psi左右。填装的话用varian的装柱机,30min可以装好,我们通常都一个月重装一次
21kgtan
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chinapeptide
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原文由 21kgtan(21kgtan) 发表:
选择柱子大小最主要考虑的是你要制备样品的规模吧,一般制备柱都可以超载上样。填料的话就要看制备什么样品了。
我们实验室用的是Varian填装柱,43mm*250mm和770*250mm的,自己填装,制备多肽为主,上样量最大可以到2克一针。
怎么才上2克啊,应该可以上5克左右吧
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