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主题：【求助】样品溶液的颜色太深，不能直接进行HPLC分析，为什么？

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yilishanshan
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发表于：2010/05/19 21:11:35 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问下大家，是不是样品溶液的颜色太深，不能直接进行HPLC分析，为什么？
我用超声法处理了沙氏培养液培养的虫草菌粉，样品溶液呈和培养基差不多的颜色，棕红色，不知是否需要脱色处理，才能HPLC分析，若直接HPLC分析，会有什么后果？
还有，我采用短的柱子，出峰时间是13min，用长的柱子，出峰时间竟然要25min，有什么办法缩短出峰时间，我想提高流速应该影响不大，是不是应考虑换流动相呢？
希望大家帮我解答下！谢谢
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2010/5/19 22:35:25 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有必要脱色，但要保证进入的样品不会有成分析出，不会污染色谱系统，同时所有成分都能被洗脱出来。
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yijianfeixian
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2010/5/19 23:30:41 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
只要是澄清透明的，不会堵塞柱子就可以了，何必追求脱色
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儒雅凤
liwei7893
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2010/5/20 10:42:22 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品是否需要脱色处理，主要看其色素是否影响主成分的测定；其次是色素是否沉积在色谱柱上，不易洗脱。如果不存在上述因素，可以不考虑脱色处理。
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21kgtan
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2010/5/20 11:04:36 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我采用短的柱子，出峰时间是13min，用长的柱子，出峰时间竟然要25min，有什么办法缩短出峰时间，我想提高流速应该影响不大，是不是应考虑换流动相呢？


就像跑步，同样速度，你跑的距离短，需要的时间肯定少啊
你可以提高方法的起始浓度，相当于把起跑线往前推，那你用的时间不就少了。但要注意不要超过样品洗脱浓度，否则会不挂柱
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2010/5/20 16:48:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该影响不大吧！我们做中成药的时候色都是很深的，也没有什么影响啊！！
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chinapeptide
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2010/5/20 21:13:06 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
颜色深太正常了，我做荧光素的肽颜色种类不要太多，只要溶解性好不析出就没有问题了。
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阿宝
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2010/5/20 21:22:38 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没听说过颜色深不能做液相分析的。只要是没有固体颗粒就应该问题不大
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edward0854
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2010/5/21 0:57:53 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
長柱子走得久一點不是很正常嗎?

虫草菌絲體應該是跟藥典做吧. 沒有必要換方法啊
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xydell
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2010/5/21 9:06:29 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果目标化合物都得到很好的分离，那用短柱子不是很好吗？为什么又要换成长柱子？
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小不董
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2010/5/22 15:33:12 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是否有颜色不是判断能否进HPLC的标准，而是样品中是否完全溶解，是否会堵塞柱子。你可以用0.45um的过滤膜过滤后进样。如果你要分析的成分本身就有颜色，你脱色后，那还分析什么呢?
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