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主题：【求助】请教：液相，检测波长问题？

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wlxinxia
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发表于：2010/07/08 09:33:44 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做HPLC检测催化的药物样品，c18柱子，254nm检测波长，流动相是甲醇（或乙腈）和酸性醋酸盐缓冲液，样品是溶解在磷酸盐缓冲液的药物。在3min一直有明显的吸收峰，面积甚至比药品更大。空白的磷酸缓冲液也有这个峰，纯水就没有。我试了磷酸二氢钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾分别检测，结果磷酸氢二钠和磷酸氢二钾都有这个峰。换了一根柱子还是有这个吸收峰，不知道是什么原因。应该不是药品污染，我换了新的，还是这样。。。
请问哪位高手能给点建议。。。谢谢！！
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guifei524398
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2010/7/8 10:20:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
磷酸氢二钠、磷酸氢二钾有峰，而磷酸二氢钠和磷酸二氢钾则没有峰，同时，纯水中也没有。我是这样想的（虽然我不是很了解），是不是药物溶解的时候，某个成分和溶剂发生了反应，生成其他物质了呢？
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dabian
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2010/7/8 14:48:13 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是本身这两个物质在254就有吸收啊
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wty2010
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2010/7/8 14:57:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
压力怎么样?会不会偏高很多,还有基线和压力线是否很稳定(主要是基线),如果都有问题考虑系统有可能被缓冲盐堵了
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Candy
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2010/7/8 15:05:49 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个应该是溶剂峰，磷酸氢二钠和磷酸氢二钾都有这个峰，可能的原因是其pH与流动相的pH有一定偏差，所以导致溶剂峰的出现。建议用流动相溶解样品。
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yanghaichao0
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2010/7/8 15:37:05 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
主要是因为流动相和样品稀释液不匹配造成的，也不能认为就是什么组分，应该是由于不匹配造成的基线变化。一般认为在5min以前都是溶剂峰。
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有水有渝
xky0230699
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2010/7/8 22:07:06 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
磷酸氢二钠和磷酸氢二钾在254nm基本没有什么吸收，你缓冲盐的浓度很高吗？
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