紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】求助:极低浓度的蛋白溶液问题?

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lwjxzj
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各位前辈,大虾,小弟先***!

我第一次做这种实验,目的是想把一种极低浓度的蛋白溶液中的蛋白浓度测出来。查了资料,认为folin-酚法比较适合。文献报道说该法的检查限最低能到5 μg/ml。

按照中国药典第三部lowry法测蛋白含量,我拿牛血清白蛋白标准品配了一个50 μg/ml的浓度和5 μg/ml的浓度。50 μg/ml的浓度的样品,能显出蓝色,但不深。5 μg/ml的浓度基本都不显示,跟空白一样。可见光检测,5 μg/ml的浓度与空白的吸收值基本一致。且为负值。

问题:1、请问该法,在5 μg/ml的浓度时,是否还能显出蓝色,至少肉眼能分辨出来。
2、50 μg/ml的浓度时,显出的颜色淡还是深,可见光吸收大概是多少?
3、我的操作可能出现哪些问题,影响实验结果。

谢谢,前辈、大虾、学长们啦!小弟贵球!!!!!
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