主题:【已应助】【求助】为什么要进好多针之后才能出峰呀?

浏览0 回复19 电梯直达
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coffee8
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原文由 wuyuandaai(wuyuandaai) 发表:
他用的那个柱子是专门做三聚氰胺的呢!我也绝的是液相的原因!要是我的话,进了几针没有峰,我肯定不在考虑这个方法了,而是另想方法了,真是耐心啊!

因为以前遇到过这样的事情
所以做得过程中坚信慢慢会好的
同事一直这样告诉我,其实我早就急得不行了
zhufangwei
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你的条件是已经确定下来了,还是正在摸索条件,同一条件下多走重复结果一致才能说明问题。


方法已经确定下来了
只是中间换过C18的柱子,刚换上柱子准备做三聚氰胺的话就会出现这样的情况
有版友说可能是锥孔脏了?
不知道该怎么清洗呀


普通C18做不了三聚氰胺,要使用HILIC型的亲水柱。
波波
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应该是柱子吸附的问题,打到饱和后就正常洗脱出来,一般新的柱子可能会出现这种情况,又或者柱子用时间太长,柱子上有活性位点可以吸附,饱和后就正常,所以都要先进好几针后回复正常
这是个人观点,也可能不对
netsking
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他用的那个柱子是专门做三聚氰胺的呢!我也绝的是液相的原因!要是我的话,进了几针没有峰,我肯定不在考虑这个方法了,而是另想方法了,真是耐心啊!

因为以前遇到过这样的事情
所以做得过程中坚信慢慢会好的
同事一直这样告诉我,其实我早就急得不行了


不知道你用的是什么LC条件, 平衡多长时间?
一般来说HILIC柱子与一般C18不一样, 需要更长的时间来平衡.
另外流动相中是否加了20mM的甲酸铵Buffer?
coffee8
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他用的那个柱子是专门做三聚氰胺的呢!我也绝的是液相的原因!要是我的话,进了几针没有峰,我肯定不在考虑这个方法了,而是另想方法了,真是耐心啊!

因为以前遇到过这样的事情
所以做得过程中坚信慢慢会好的
同事一直这样告诉我,其实我早就急得不行了


不知道你用的是什么LC条件, 平衡多长时间?
一般来说HILIC柱子与一般C18不一样, 需要更长的时间来平衡.
另外流动相中是否加了20mM的甲酸铵Buffer?


流动相是乙酸胺
coffee8
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现在的问题是一直都不出峰了
难道还是时间不够 还要继续做下去吗??
急死了!!!
kang14
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那种柱子很难平衡
我做也是这样,要多平横一段时间,此外,质谱也需要平衡的,个人认为质谱的有些参数和实验条件只有在进样时才会平衡好,遇到特别的物质就表现的很明显!
liuliuhui
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流动相的比例合适吗?是不是还没出来就进下一针了,导致都在后面出来了
阿喜
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呵呵,没有出峰,哪10几针都跑哪去了,用甲醇冲柱没,如果没有,怀疑峰滞后了,最后才出来的
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