主题：【有奖征集】激素测试方法！！！

原文由 职业游民(012304) 发表:
圣元声称不是他们干的，国家说要调查，到底是谁在搅浑？是谁在掩饰？
还是真的是山寨版本版的圣元?

其实所谓的声称是在打擦边球。
说没添加，他控制他的原料，包括生产环节的激素问题了么？如何控制的？
说符合标准，但是标准中没有激素的测试项目，就像当初的三聚氰胺一样。

原文由 zjy365286(zjy365286) 发表:
标准的起点还是蛮高的！ 医院普遍使用放免法，与LC-MS GC-MS的符合性不知可有研究？

可以根据这个写一篇原创，有往冲击年终笔记本电脑大奖！

原文由 hilowbeamann(hilowbeamann) 发表:
有的人发育慢怎么办？

比如17,18的大姑娘了胸部还是那么平？

是不是要吃含激素高的奶粉？

汗，那是奶粉还是药粉啊？应该算药了～～

最近的奶粉事件闹的沸沸扬扬，各种检测机构也开始争先恐后的做检测，我在一些资料上查到做检测的项目和和用到的标准品，供大家参考：
货号 中文品名 英文品名 规格 CAS
孕激素标准品
D6875-500MG 21-羟孕酮，≥97% (HPLC)  21-Hydroxyprogesterone 500mg 64-85-7
46337-250MG 17α-羟孕酮 17α-Hydroxyprogesterone 250mg 68-96-2
N2260-100MG 甲基炔酮，≥99% D(−)-Norgestrel，≥99% 100mg 797-63-7 
46411-100MG 甲羟孕酮 Medroxyprogesterone 100mg 520-85-4
46420-100MG 乙酸甲地孕酮 Megestrol acetate 100mg 595-33-5
C5145-1G 乙酸氯地孕酮，≥98% (Sigma) Chlormadinone acetate 1g 302-22-7 46665-250MG 孕酮 Progesterone 250mg 57-83-0
46412-250MG 甲羟孕酮 17-乙酸酯 Medroxyprogesterone 17-acetate 250mg 71-58-9 
雌激素标准品
46565-100MG 雌三醇 Estriol 100mg 50-27-1
46542-100MG α-雌二醇 α-Estradiol 100mg 50-28-2
46263-250MG 炔雌醇 17α-Ethynylestradiol 250mg 57-63-6 46573-250MG
雌酮 Estrone 250mg 53-16-7
46207-250MG 己烯雌酚 DIETHYLSTILBESTEROL, 250 MG 250mg 6898-97-1
46320-100MG-R 己烷雌酚 HEXESTROL 100mg 84-16-2
46190-100MG 己二烯雌酚 DIENESTROL 100mg 84-17-3
489204-100MG 雌酮-d4 Estrone-2,4,16,16-d4 100mg 
让我们一起努力，把奶粉中的罪魁祸首抓出来，欢迎各界朋友和我交流心得体会，我的QQ：270883731

检测奶粉中的激素是一方面，另外还要能区别奶粉中的激素是内源性激素还是认为添加激素。如果检测出人工合成的激素就好说，说明是认为添加或奶畜泌乳期用药残留，如果检测出内源性激素，就不好判断是认为添加还是奶畜产的奶激素含量水平本身就高，因为到目前为止，没有一个官方部门能明确表示牛奶中内源性激素水平到底在多高范围内是合理的。
    估计这次奶粉事件最后还是找一个弱势群体或个人当替罪羊，结案了之。

奶粉中雌酮、雌二醇、醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮 SPE-LC/MS/MS检测方法

1．实验部分：

1.1材料、试剂

Cleanert PEP吡咯烷酮化聚苯乙烯/二乙烯基苯固相萃取柱(100mg/6mL, P/N: PE1006，博纳艾杰尔科技)；Cleanert Silica CM改性硅胶固相萃取柱 ( 1000mg/6mL , P/N : CM0006，博纳艾杰尔科技)

液相色谱柱 (Halo C18 , 2.1×100mm, 2.7μm, P/N: 92812-602，博纳艾杰尔科技）

标准品：雌酮（CAS.No. 53-16-7）、雌二醇（CAS.No. 50-28-2）、醋酸甲地孕酮（CAS.No. 595-33-5）、醋酸氯地孕酮 (CAS.No. 302-22-7 )，购自中国药品生物制品检定所。

1.2样品前处理方法

1.2.1 Cleanert PEP样品提取净化法

提取：取2g奶粉，加标，然后加12mL 80% 乙腈，涡旋混匀两分钟后，离心（90000r/min， 6min）取3mL上清液，加入9mL超纯水稀释，涡旋混匀后，待过Cleanert PEP柱净化。

净化步骤：

1)      活化：以5mL乙腈，5mL水活化Cleanrt PEP；

2)      上样：把上述稀释后的样品溶液过柱，流速控制以1mL/min为宜；

3)      淋洗：待样品溶液完全通过小柱后，用5mL 5%乙腈淋洗小柱，然后真空抽干3min；

4)      洗脱：以3-5mL乙腈洗脱目标，收集流出液；

5)      浓缩：收集液以氮气浓度吹干（40℃水浴），后以50% 甲醇水定容至1mL，混匀后过0.22μm微孔滤膜过，进LC-MS/MS分析。

1.2.2 Cleanert Silica样品提取净化法

提取：取2g奶粉，加标，然后加12mL 乙腈，涡旋混匀两分钟后，离心（90000r/min， 6min）取3mL上清液，待过Cleanert Silica柱净化。

净化步骤：

1)      活化：以5mL乙腈活化Cleanrt Silica小柱；

2)      上样：把上述提取液过柱，收集流出液；

3)      淋洗：以5mL乙腈洗涤小柱，收集流出液；

4)      浓缩：合并以上流出液液，以氮气浓度吹干（40℃水浴），后以50% 甲醇水定容至1mL混匀后过0.22μm微孔滤膜，进LC-MS/MS分析。

1.3  LC-MS/MS检测条件

1.3.1孕激素（醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮）测定

液相色谱条件：色谱柱 (Halo C18， 2.1×100mm, 2.7μm)；流动相：A：0.1%甲酸水，B: 甲醇，梯度条件（略）；流速：0.3mL/min，柱温：40℃,进样量：10μL

参考质谱条件：电离源：电喷雾正离子模式；其他（略）

1.3.2雌激素（雌二醇、雌酮）测定

液相色谱条件：色谱柱（Halo C18 2.1×100mm,2.7μm）；流动相：A：水，B: 乙腈，梯度条件（略）；流速：0.3mL/min，柱温：40℃, 进样量：10μL

参考质谱条件：电离源：电喷雾负离子模式；其他（略）

2．结果与讨论：

结果见图1、图2。用Cleanert PEP (反相)或Cleanert Silica CM(正相) 两种净化手段均可到达满意的回收率和净化效果，添加浓度在25ppb时回收率可达到80% 。

用Halo色谱柱可以实现样品的快速分离，大大提高工作效率。

雌二醇和雌酮两种激素，质谱相应偏低，质谱条件需要进一步优化。

本实验结果采用单点定量判定，结果可能有失偏颇，详细数据需做基质添加标准曲线确证，方法的精密度，稳定性等亦需要进一步确证。

图1 两种孕激素总离子流图和选择离子流图（标品）

图2 两种雌激素总离子流图和选择离子流图（奶粉样品）

文章下载：奶粉中雌酮，雌二醇，醋酸甲地孕酮，醋酸氯地孕酮 SPE-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp]LCMSMS检测方法.pdf[/url]

原文由 redyou(redyou) 发表:
农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱－串联质谱法
农业部1031号公告-2-2008 动物源性食品中糖皮质激素类药物多残留检测液相色谱－串联质谱法
农业部1031号公告-4-2008 鸡肉和鸡肝中己烯雌酚残留检测气相色谱-质谱法

本次怀疑的雌二醇目前有
农业部958号公告-10-2007 水产品中雌二醇残留量的测定 气相色谱—质谱法
NY/T 918-2004 饲料中雌二醇的测定 高效液相色谱法
GB/T 20749-2006 牛尿中β-雌二醇残留量的测定 气相色谱-负化学电离质谱法
SN 0664-1997 出口肉及肉制品中雌二醇残留量检验方法 放射免疫法

目前正在等待农业部出的奶粉检测方法。

农业部开始制标准了？

现在制订的很多方法中看不中用，多是救火。

原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:

原文由 redyou(redyou) 发表:
农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱－串联质谱法
农业部1031号公告-2-2008 动物源性食品中糖皮质激素类药物多残留检测液相色谱－串联质谱法
农业部1031号公告-4-2008 鸡肉和鸡肝中己烯雌酚残留检测气相色谱-质谱法

本次怀疑的雌二醇目前有
农业部958号公告-10-2007 水产品中雌二醇残留量的测定 气相色谱—质谱法
NY/T 918-2004 饲料中雌二醇的测定 高效液相色谱法
GB/T 20749-2006 牛尿中β-雌二醇残留量的测定 气相色谱-负化学电离质谱法
SN 0664-1997 出口肉及肉制品中雌二醇残留量检验方法 放射免疫法

目前正在等待农业部出的奶粉检测方法。

农业部开始制标准了？

标准已经做出来了，只是等待批准了。

请看这个标准汇总。

食品及相关产品中的激素检测标准汇总