最近在做原料药的有关物质方法验证,小弟是头一次搞这个东西,有很多问题都不大明白,特向各位老师请教。有些问题请不要见笑。。。。
有关物质采用的HPLC方法
岛津的
液相10AT
流动相:0.05mol/L的磷酸二氢钠(PH=3):甲醇:乙腈=90:6:4
柱子:C18
流速:0.8ml/min
检测波长:210nm
进样量:20ul
问题
1、在进行检测时,空白在2.8-3.1分钟之间有一个很小的峰(峰高大概是0.07mv,想忽略不计可是他毕竟占一定的峰面积啊)。不知道是什么原因,
2、此空白峰出峰时间和我们样品的一个杂质(丙氨酸)出峰时间正好重叠,而且峰形不好,达不到注册要求的(对称性和分离度),但主峰符合要求。
我用的就是流动相溶的,进的空白溶剂就是流动相。
此肯定需要控制的,含量还不小,国家药典有用薄层色谱方法控制,但是小弟不大熟练那个分析方法,而且即使将此杂质分开来测,那么在检测杂质总量的时候它是无法定量的,所以它影响杂质的总量。小弟有点笨,希望老师给与指导,谢谢。
我们的空白溶剂是流动相,直接进的流动相。
1、药典上有薄层色谱的方法进行控制,但是有关物质需要知道总量,因为丙氨酸的含量无法定量,所以总量是很影响的。指导法则杂质的总量不能超过2%,而药典的对丙氨酸的控制为1%以下。
2、流动相的水和有机溶剂的比例,我调试过了,丙氨酸的峰始终在2.8-3.1之间,很让我崩溃。
希望老师指导。
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