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主题：【求助】氨基酸专用住测定混合氨基酸出峰顺序都是一样的吗？

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yinlijuan

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发表于：2010/09/16 22:41:38 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用C18或是专用柱子各种氨基酸出来的顺序都一样吗？刚学习使用液相色谱请教一下，谢谢！

该帖子作者被版主 小鸟飞翔加 2积分， 2经验，加分理由：话题奖励!

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2010/9/17 0:53:42 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

据我所知不是的

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微雨燕双飞

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2010/9/20 13:46:30 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各厂家的氨基酸专用柱实际上是“氨基酸衍生化方法+反相柱+分析条件(尤其是梯度条件)”的综合体。分析理念一般是柱前衍生，反相柱分析。
1 同样的衍生条件，同种类型的柱子，但出峰顺序未必完全一致。
比如都是异硫氰酸苯酯衍生，实际的分析物为氨基酸-异硫氰酸苯酯衍生物，同为C18柱，但选择性可能有差别，导致出峰顺序变化；即使是相同的柱子，各家使用不同的流动相，你比如A用甲醇、B用乙腈，出峰可能也会变化。
2 衍生化试剂
目前用于氨基酸柱前衍生的试剂多达十几种，即使你用同一根柱子，但由于衍生物不一样，出峰顺序也不同。

鉴于目前国内分析人员水平的参差不齐，如果自己很精通，买根柱效较高的C18，然后选择一种合适的衍生剂，可以开发出一种方法，以后的分析会很省钱；如果，自己连色谱分析的门还没摸进去，就老老实实地买厂家的专用柱，按人家的说明一步步分析。

该帖子作者被版主 ynsfeed加 2积分， 2经验，加分理由：感谢迪马版主的支持。

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2010/9/20 13:47:59 Last edit by godblesschina

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2010/9/20 14:25:24 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 微雨燕双飞(godblesschina) 发表:
各厂家的氨基酸专用柱实际上是“氨基酸衍生化方法+反相柱+分析条件(尤其是梯度条件)”的综合体。分析理念一般是柱前衍生，反相柱分析。
1 同样的衍生条件，同种类型的柱子，但出峰顺序未必完全一致。
比如都是异硫氰酸苯酯衍生，实际的分析物为氨基酸-异硫氰酸苯酯衍生物，同为C18柱，但选择性可能有差别，导致出峰顺序变化；即使是相同的柱子，各家使用不同的流动相，你比如A用甲醇、B用乙腈，出峰可能也会变化。
2 衍生化试剂
目前用于氨基酸柱前衍生的试剂多达十几种，即使你用同一根柱子，但由于衍生物不一样，出峰顺序也不同。

鉴于目前国内分析人员水平的参差不齐，如果自己很精通，买根柱效较高的C18，然后选择一种合适的衍生剂，可以开发出一种方法，以后的分析会很省钱；如果，自己连色谱分析的门还没摸进去，就老老实实地买厂家的专用柱，按人家的说明一步步分析。

用厂家提供的分析包，同样的柱子、同样的色谱条件，出峰顺序是一样的。

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小鸟飞翔

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2010/9/21 16:02:15 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 emus(emus) 发表:
据我所知不是的

详细一点

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小鸟飞翔

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2010/9/21 16:04:02 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 微雨燕双飞(godblesschina) 发表:
各厂家的氨基酸专用柱实际上是“氨基酸衍生化方法+反相柱+分析条件(尤其是梯度条件)”的综合体。分析理念一般是柱前衍生，反相柱分析。
1 同样的衍生条件，同种类型的柱子，但出峰顺序未必完全一致。
比如都是异硫氰酸苯酯衍生，实际的分析物为氨基酸-异硫氰酸苯酯衍生物，同为C18柱，但选择性可能有差别，导致出峰顺序变化；即使是相同的柱子，各家使用不同的流动相，你比如A用甲醇、B用乙腈，出峰可能也会变化。
2 衍生化试剂
目前用于氨基酸柱前衍生的试剂多达十几种，即使你用同一根柱子，但由于衍生物不一样，出峰顺序也不同。

鉴于目前国内分析人员水平的参差不齐，如果自己很精通，买根柱效较高的C18，然后选择一种合适的衍生剂，可以开发出一种方法，以后的分析会很省钱；如果，自己连色谱分析的门还没摸进去，就老老实实地买厂家的专用柱，按人家的说明一步步分析。

说的很精辟！

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