主题:比色法的问题,请教!!!!!!!!!!!

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hjt009
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我在做一比色法时用了以下两种方式,你觉得那种正确?

样品称取,溶解定容,取一定溶液进行显色后,测得的吸光度高于标准系列最高管,所以采取以下两种方式:


1.将显色后的样品直接稀释10倍比色;

2.重新取样,稀释10倍后再进行显色,比色;

我做出来的是,2方式的计算结果明显高于1方式,请问有何不妥???
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yanlei1959
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分光光度法规定只能用方法2,即先稀释样品(取原来的1/10倍),再加显色剂(与方法等量),比色;如果用你的方法1,即稀释样品(为原来的1/10倍),同时稀释显色剂(也为原来的1/10倍),那么显色剂也只有方法2的1/10倍,所以方法1的结果肯定要低于方法2喽 .
ppccxx
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可以做一下二者的空白,分别扣掉空白的话可能就差不多了
yxcxzqx
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原文由 hjt009 发表:
我在做一比色法时用了以下两种方式,你觉得那种正确?

样品称取,溶解定容,取一定溶液进行显色后,测得的吸光度高于标准系列最高管,所以采取以下两种方式:


1.将显色后的样品直接稀释10倍比色;

2.重新取样,稀释10倍后再进行显色,比色;

我做出来的是,2方式的计算结果明显高于1方式,请问有何不妥???


  方法2正确。

  若使用方法1,显色条件将不再与标准系列相同,因而不能与标准系列相比较而得出测定值。举例来说:

  假定事先通过试验确定,显色剂的用量为3mL,并且用量在1~5mL时吸光度呈平台。按方法1稀释后,实际的显色剂用量将只有0.3mL,超出了1~5mL的范围。
  同样,酸度和其它药剂用量也会发生类似变化,样品的显色条件不再与标准系列相同,因而不再具备可比性。

  要知道:显色过程是一个化学反应过程,稀释后,化学反应由一个平衡态迁移到另一个平衡态。所以,吸光度为0.5的体系稀释10倍后,吸光度通常并不是想象的0.05。
xiaotrn
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fb66
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2楼说的有道理。但是如果欲采用方法1,正确做法是:用全程空白稀释样品,不妨试一试?
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