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本实验室主要工作就是:微生物发酵与代谢调控 、蛋白的分离纯化 、生物材料的研发与生产( 化妆品 、面膜、人工血管 、人工骨................)
发酵用实验仪器设备一览主要仪器
12.8L、30L、 50L、 500L等规格国际知名品牌(瑞士比欧、德国贝朗)全自动控制发酵罐,并带有尾气分析仪,用于微生物高密度发酵从实验室小试研究到工业化生产。【第三届原创参赛】秀秀我们的实验室 SHOW一下(11月)
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http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101108/2913004/曾经出现问题与解决方案
第一例、 在暑期的实验中,我们发现发酵失败的次数较多
现象:在上罐3到6个小时内,到某一时间,溶氧突然升高,为其中二氧化碳的含量降低。
失败原因:① 接种染菌 ;② 上罐时染菌; ③ 上罐前已经染菌。( √ )
改进前的试验流程:
第一天上午配料等→→ 第一天下午实消等 →× → 第二天早上上罐发酵
改进后的试验流程:
第一天上午配料等 → → 第一天下午空消等 →→ 第二天早上实消,上罐
流程改进后的结果: 目前很少有放罐记录。分析原因:因为改进前的试验流程:第一天下午实消等 这一步结束以后,有一个晚上的时间,罐子的使用太久,会气密性不好,导致晚上温度一降下来,外界的菌体可能通过细微的孔径进入到发酵罐子中!!从而导致染菌!!第二例:最近连续三次放罐(发酵失败,放出菌体)
现象:在上罐2到3个小时内,到某一时间,溶氧突然升高,发酵液中溶解氧浓度(DO值)从30%一下子上升到80%~~90% 甚至是达到了99%!!
失败原因:①开始留的原始的种子(-20°C保存的)染菌;( √ )
② 划一级平板或二级平板时接种染菌;③一级摇瓶或二级摇瓶接种时染菌;
④ 上罐前已经染菌;⑤上罐时染菌。
验证方案:
时间
培养OD |
2h |
4h |
6h(诱导) |
9h(诱导结束) |
12h |
|
正常 |
3.31 |
5.04 |
5.67 |
6.54 |
6.76 |
|
验证 |
1.27 |
2.95 |
3.61 |
3.81 |
4.02 |
|
并且,验证实验的摇瓶发酵起始OD为3.84,而正常情况下OD应该为5.00~~5.40左右。再者,验证实验的生长缓慢,菌体老是生长不起来。
然后,重新划平板。这次发酵成功!!
菌种的培养:
-70°C保藏→→-20°C保藏→→4°C保藏→→一级平板→→二级平板→→一级摇瓶→→二级摇瓶→→上罐发酵!
后记:如有此类情况,可以直接从新划平板,接新的菌种进行发酵!