主题:【第三届原创参赛】发酵罐出现问题与解决方案 记

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【第三届原创参赛】秀秀我们的实验室 SHOW一下(11月)共有 570 人关注过本贴

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101108/2913004/

曾经出现问题与解决方案
第一例、 在暑期的实验中,我们发现发酵失败的次数较多

现象:在上罐36个小时内,到某一时间,溶氧突然升高,为其中二氧化碳的含量降低。

失败原因:  接种染菌

②    上罐时染菌;

  上罐前已经染菌。(

改进前的试验流程:

第一天上午配料等→→ 第一天下午实消等 ×   第二天早上上罐发酵


改进后的试验流程:



第一天上午配料等     第一天下午空消等 →→  第二天早上实消,上罐



流程改进后的结果: 目前很少有放罐记录。



分析原因:因为改进前的试验流程:第一天下午实消等 这一步结束以后,有一个晚上的时间,罐子的使用太久,会气密性不好,导致晚上温度一降下来,外界的菌体可能通过细微的孔径进入到发酵罐子中!!从而导致染菌!!



第二例:最近连续三次放罐(发酵失败,放出菌体)



现象:在上罐23个小时内,到某一时间,溶氧突然升高,发酵液中溶解氧浓度(DO值)从30%一下子上升到80%~~90% 甚至是达到了99%!!



失败原因:①开始留的原始的种子(-20°C保存的)染菌;( )

划一级平板或二级平板时接种染菌

③一级摇瓶或二级摇瓶接种时染菌;

上罐前已经染菌;


⑤上罐时染菌。

验证方案:




时间

培养OD 


2h


4h


6h(诱导)


9h(诱导结束)


12h




正常


3.31


5.04


5.67


6.54


6.76




验证


1.27


2.95


3.61


3.81


4.02






并且,验证实验的摇瓶发酵起始OD3.84,而正常情况下OD应该为5.00~~5.40左右。再者,验证实验的生长缓慢,菌体老是生长不起来。



然后,重新划平板。这次发酵成功!!



菌种的培养:

-70°C保藏→→-20°C保藏→→4°C保藏→→一级平板→→二级平板→→一级摇瓶→→二级摇瓶→→上罐发酵!



后记:如有此类情况,可以直接从新划平板,接新的菌种进行发酵!
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titi
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原创大赛要求作品必须达到500字以上~~~
楼主完善补充后在分享哦~~~
本作品暂时不收录到参赛列表中,楼主完善后再进行收录!!
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2010/11/26 10:01:20 Last edit by carollee
xing-xing
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titi
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楼主啊~不是补充一些摘抄的该属性内容就可以的啊!
大赛规定引用部分超过文章篇幅1/3就视为非原创啦~~
xing-xing
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原文由 titi(carollee) 发表:
楼主啊~不是补充一些摘抄的该属性内容就可以的啊!
大赛规定引用部分超过文章篇幅1/3就视为非原创啦~~


还要再努力啊
青林
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nje2nx
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xing-xing
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原文由 青林(wyqql2060) 发表:
有加个附件,应该可以通过评分了


同意,加精了。
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