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液相色谱（LC）
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主题：【第三届原创参赛】液相色谱使用心得------液相色谱流程详解（12月）

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huaibeijiayuan
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发表于：2010/12/14 15:24:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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维权声明：本文为huaibeijiayuan原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。


11月份在气相色谱论坛版块发表了一篇关于气相色谱开机流程的原创，写得可能比较琐碎，本来还想写一篇关于液相色谱开机流程的原创，因工作任务紧一直耽搁下来。最近接到版友wenwen1017咨询安捷伦液相色谱安装流程的求助，促使我将原来的未完成的工作继续。
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101104/2903710/
这是我们公司的一个培训图片。内容不是很详细，但对于一般操作已经满足了，当时是根据安捷伦的液相色谱进行编制的，也可能不适合所有的其他品牌的液相色谱。



首先液相色谱与气相色谱一样基本也分五大块，输液系统-------进样系统--------分离系统-------检测系统------记录系统，了解这个就比较容易清楚了。下面以安捷伦的1200低压四元液相色谱对五个系统进行详细讲解：
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2010/12/14 15:27:56 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一、流动相的储液系统

流动相的储液系统主要有四个溶剂瓶组成，溶剂瓶一般由一个棕色三个白色组成，其中棕色的用来专门盛装水溶剂，其他三个盛装有机溶剂。还有有个棕色试剂瓶，装的是10%异丙醇水溶液，主要是用来清洗柱塞杆的。



说到流动相不能不说流动相的配制，记得以前曾讨论过流动相各组分是分别量取还是先量取一个后定容到需要值的问题，个人认为是分别量取后混合比较好，这样操作比较方便，重要的是在操作规程中要明确规定，这样大家都比较统一了。

流动相过滤是必须的了，在液相色谱中过滤装置有很多，大部分是为了过滤流动相准备的。流动相配好后，必须用溶剂过滤器进行过滤，最好使用有机滤膜进行过滤，水系的滤膜只能过水相，如果不小心过滤有机溶剂会把滤膜溶解，导致过滤器堵塞。溶剂过滤器定期也要进行清洗，可以用稀硝酸浸泡清洗。
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2010/12/14 15:29:23 Last edit by huaibeijiayuan
huaibeijiayuan
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2010/12/14 15:31:41 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
二、输液系统

输液系统主要包括脱气机和泵。脱气机的安装比较简单了，一般安装左进右出或者下进上出的原则进行安装，如下图因为脱气机的管路是横排排列的，就是按照左进右出进行连接。



脱气机出来就进入泵系统。我们目前使用的是一台四元低压梯度系统，因此脱气机出来的流动相首先进入的就是混合器，混合器的连接方式是从右边按照逆时针的顺序由下而上，因此下边两个分别是左D右A，上边两个分别是左C右B，一般来说建议A和D使用水系，B和C选择有机系，中间出口是混合后液体的流出口。流动相从混合器出来后首先进入入口主动阀，之后进入泵体，再由出口单向阀出来，进入阻尼器，从阻尼器出来后再次进入泵体，再进入冲洗阀，冲洗阀出来分两路，一路进入色谱柱，一路进入废液。


三、进样系统

这个要根据仪器的配置来区分，我们是手动进样器，这是拍的后面连接的一个图片，1和4是连接定量环的，2是连接泵的冲洗阀，3是连接色谱柱，5和6为废液出口。这个比较固定就不详细介绍了。
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2010/12/14 15:40:53 Last edit by huaibeijiayuan
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2010/12/14 15:32:01 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
四、分离系统

分离系统也就是色谱柱了，我们这个是安装了柱温箱，从图片上看，柱温箱有的小，色谱柱安装保护柱后长度就接近柱温箱的长度了，因此这个是特别要注意的，接头很容易会扭断。如果没有柱温箱，色谱柱就直接挂在手动进样器支架上了。

五、检测系统

检测系统主要有流通池和氘灯组成。流通池主要有一组光玻片组成，这个一般不建议随便拆卸。氘灯是消耗品，使用次数多，消耗能量就大，我们一般一年换两个，更换起来也比较方便，只要能装进去基本就行了。


六、记录系统

这个是有电脑和工作站组成，我们是安装的英文工作站，工作站里所有的功能至今也没全摸透，只能说用到的清楚一点，用不到的就不太懂了。

液相色谱使用这么多来，感触最深的就是：要想使用好液相色谱，必须要做到心细，任何的细节都不能忽视。流动相的配制、过滤、泵的清洗和维护、流通池的清洗和维护都必须做到细心，平时多观察正常时的状态，才能及时发现异常情况。液相色谱出现最多的要么是堵，或者是漏，只要慢慢排查，一般都会顺利解决问题。还有一个就是缓冲盐，如果流动相中有缓冲盐，在停止分析时，系统一定要清洗干净，防止缓冲盐析出而堵塞系统。
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2010/12/14 15:43:37 Last edit by huaibeijiayuan
wyf1237
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2010/12/14 19:42:07 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好！实用！
楼主再贴上一些操作工作站的图片就更好了！
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qdvqdv
qdvqdv
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2010/12/14 21:15:26 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好好学习一下！！
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wenwen1017
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2010/12/14 21:55:10 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常感谢楼主，我会好好学习的，谢谢！
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问无止境！
lovehonghong
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2010/12/14 21:57:48 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好像文章只是对仪器每个部分做了简单介绍，涉及到实战演习的有点少，期待实战内容
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给力芬
huojuncai
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2010/12/15 10:45:53 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
四、分离系统

分离系统也就是色谱柱了，我们这个是安装了柱温箱，从图片上看，柱温箱有的小，色谱柱安装保护柱后长度就接近柱温箱的长度了，因此这个是特别要注意的，接头很容易会扭断。如果没有柱温箱，色谱柱就直接挂在手动进样器支架上了。

五、检测系统

检测系统主要有流通池和氘灯组成。流通池主要有一组光玻片组成，这个一般不建议随便拆卸。氘灯是消耗品，使用次数多，消耗能量就大，我们一般一年换两个，更换起来也比较方便，只要能装进去基本就行了。


六、记录系统

这个是有电脑和工作站组成，我们是安装的英文工作站，工作站里所有的功能至今也没全摸透，只能说用到的清楚一点，用不到的就不太懂了。

液相色谱使用这么多来，感触最深的就是：要想使用好液相色谱，必须要做到心细，任何的细节都不能忽视。流动相的配制、过滤、泵的清洗和维护、流通池的清洗和维护都必须做到细心，平时多观察正常时的状态，才能及时发现异常情况。液相色谱出现最多的要么是堵，或者是漏，只要慢慢排查，一般都会顺利解决问题。还有一个就是缓冲盐，如果流动相中有缓冲盐，在停止分析时，系统一定要清洗干净，防止缓冲盐析出而堵塞系统。


不错，最下边传感器漏液管子怎么不接长一点呢，还是不怕漏液，直接排桌面，
建议来张全身照，
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给力芬
huojuncai
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2010/12/15 10:48:20 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
忘了，下边漏液传感还有出口呢
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wenwen1017
wenwen1017
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2010/12/15 11:00:32 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看了这个帖子，帮助很大。http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101214/2999764/
还有一点，希望看看这个图，我们公司的安捷伦1100，我大概安装的，你看一下还缺些什么，我标出的地方都在吗连到那里，2，3手动进样器上的线具体连到那里啊，帮我看看。我好笨啊！middle
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