主题:请教反相HPLC冲洗柱子的方法

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gentlehorse
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如果用的缓冲盐的话,是否应先用水和有机溶剂(如甲醇)的混合液冲洗,再用纯的有机溶剂冲洗呢?还是用90:10的Ch3OH/H2O好些呢呢?
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who1235
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如果色谱柱说明书上可以耐100%水,直接用水先冲洗是最方便和省事的;如果不放心,就只能考虑5%或10%的甲醇水溶液了。
herozxq
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roseyoung
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还是看看柱子的说明书把,不是所有的反相柱都能经受100%纯水冲洗的,很多柱子都只能用5%以上有机溶剂的流动相,如果是这样,建议用1:9=甲醇:水,低流速冲洗比较好。
changjianjun
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gentlehorse
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lumin81740
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我也想问问要冲洗多长时间呢?我近来弄糊涂了,用了90%甲醇-10%水,结果压力升得很高,还能冲好吗?
lumin81740
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我同样想问问这种问题,10%甲醇或5%甲醇需要冲洗柱子多长时间呀,最近我给搞糊涂了,用了10水冲洗,结果压力上升,还能否冲洗好呢?
misswangsan
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dbin2005
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roseyoung
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原文由 misswangsan 发表:
先用1:9的甲醇水溶液冲洗,再用纯甲醇冲洗!

完全同意,一开始压力会升得很高,所以,要注意不要超过柱子所能承受的压力。然后,压力会慢慢下降到稳定值,我一般都会再走会就换纯甲醇。
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