主题：【分享】U V-2550仪器操作规程

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发表于：2011/01/07 21:45:50 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

U V-2550仪器操作规程

1. 开机预热

1.1先打开电脑主机和显示器，再打开仪器的电源，打开软件UVProbe2.21,单击[img=99,41]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.jpg[/img]，出现如下对话框：

[img=447,318]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image004.jpg[/img]

仪器进入初始化状态。

1.2初始化大约需要5min，进行一系列的机械和光路的检查和初置，当所有初始化项目都变绿后，即初始化完成，单击OK。就可以开始测定。

1.3初始化完成后，一般需要预热15min左右，即可进行操作。

2．基线校正

2.1选择[img=94,27]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image006.jpg[/img]中的[img=29,23]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image008.jpg[/img]（photometric光度），打开光度模块。

2.2单击光度计键条中的[img=90,31]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image010.jpg[/img]（baseline基线），启动基线校正操作。基线校正设定当前选择的波长范围内的背景为零，在此范围内的所有后续的读数都受其影响。基线校正确保在采集数据时有较好的参照点。

2.3当基线参数对话框弹出时，

[img=285,161]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image012.jpg[/img]

在开始波长和结束波长中分别输入700和300。也可在实验所需的波长范围内进行基线校正。点击OK，开始从700nm进行扫描，注意在基线校正过程中光度计状态窗口的读数变化。变化多少可以接受？

2.4点击输出窗口Instrument History（仪器履历）标签。查看列出的基线校正信息。当完成基线校正后，可进行以下操作。

3．光度测定

3.1首先选择测定方式，在主菜的[img=92,20]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image014.jpg[/img]所示的各键中，选择[img=26,25]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image016.jpg[/img]（photometric 光度）。

3.2 参数的设置（以硝酸盐为例说明）

点击菜单栏中的[img=27,25]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image018.jpg[/img]键，出现图1.1：

[img=442,353]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image020.jpg[/img]

图1.1

在wavelength(波长类型)中可供选择point（点）和range（范围）,point表示测定高度？；如果选择的是range，则需输入起始和结束波长。例如选择Point,在Wavelength(nm)中输入538，则Column Name也出现相应的变化，最后点add加入，点下一步，出现图1.2，

[img=479,401]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image022.jpg[/img]

图1.2

在Type中选择Multi Point,在Formula中选择Fixed Wavelength,WL1选择上一步添加过的波长，例如WL1538.0为上面添加过的。Untis

为单位设定，可添加自己需要的单位。哪个参数的单位? Parameters中选择Abs=f(Conc),order of选择1st，表示标准曲线方程为一次方程。zero interception不选择，只有当用single point（单点）的时候选择,单击

下一步；出现图1.3：

[img=479,401]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image024.jpg[/img]

图1.3

一般选择默认状态，其中Sample选择表示重复测定的次数；Prompt before repetition表示在重复测定之前进行提示，再单击下一步；出现图1.4：

[img=479,401]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image026.jpg[/img]

图1.4

和上面类似，用默认设置即可。再单击下一步，出现图1.5：[img=425,356]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image028.jpg[/img]

图1.5

在Filename中，默认的文件路径和文件名，也可以自己更改。单击[img=27,26]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image030.jpg[/img]图标，出现图1.6，

[img=389,225]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image032.jpg[/img]

可自定义文件名和路径，单击打开，对话框自动关闭。在图1.5中自定义Title,Analyst,Comments,单击close关闭对话框。

3.3标准表设定

在Stand table 栏中单击右键，出现一个菜单，选择Properties,出现如下对话框，

[img=353,223]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image034.jpg[/img]

设定Sample ID Name和Step Value,选择了Auto Fill后，就可进行自动填充，单击表格栏，自动插入一行表格，并给sample Id 自动命名。Weight Factor用默认的1；选中Columns后，出现如下对话框，

[img=341,215]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image036.jpg[/img]

在Column中选中一个，单击Show（显示）或Hide（隐藏）,即在Standard Table中显示或隐藏，或直接双击Show或Hide即可;Rows同理有显示和隐藏功能。设置完毕后关闭对话框。并将样品浓度和其他所需信息输入到标准表中。

其他各栏单击右键同样出现菜单，点Properties同样可进行设置。

3.4自动调零

单击[img=93,28]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image038.jpg[/img]，进行自动调零。自动调零是将某一波长下（如538nm）的吸光度校为零。当自动调零结束后，开始下面测定。

3.4参比测定

做参比时，点cell blank,测定空白，出现一对话框，如下：

[img=320,244]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image040.jpg[/img]

扣除空白对标准溶液的影响。

3.5标准曲线绘制

在样品室逐个放入标准，点击[img=94,32]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image042.jpg[/img]键即可。软件自动测定各标准溶液的吸光度，并自动绘制标准曲线。

所配标准溶液的吸光度在0.15～1.0范围内，吸收测定的精密度约为0.5%（注：摩尔吸收系数为10⁵l/mol.cm、光程为1cm的石英皿，浓度为1*10^-6～1.5*10^-6mol/l范围时，即可得到0.15～1.0范围的吸光度）。标准测定完毕，工作曲线自动显示。接下去测定未知样品的浓度了。

3.6样品的测定

在Sample table(样品表)中设定样品的信息，点击右键可进行自动填充等设置，点击[img=94,32]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image042.jpg[/img]键即可。

3.7储存

单击工具栏中的[img=30,26]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image044.jpg[/img]（保存）或单击File下拉菜单中的Save，保存到C盘/Program Files/Shimadzu/UVProbe/Date。若要保存到指定的文件夹下，单击File下拉菜单中的Save as，出现如下对话框，

[img=370,262]file:///C:/DOCUME~1/user/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image046.jpg[/img]

指定所需要的路径和文件名，单击保存，即可保存在指定的文件夹下面。光度测定文件包含标准和样品表信息，并将文件类型存为*.Pho，然后输入文件名和点击储存。

（注意：最基本数据容器是文件，所有的数据都存储到文件内；文件可细分为储元，储元可再细分为数据集。每个文件至少有一个储元。每个储元至少有一个数据集。）

4、仪器维护

4.1分光光度计实验室的室温保持在15～35℃，相对湿度宜控制在45%～80%（假如室温大于30℃，相对湿度不得大于70%）。防尘、防震、防电磁干扰，仪器周围不应有强磁场。不要暴露在阳光直射的地方，不要放在有腐蚀性气体或在UV波长范围内有吸收的有机和无机气体的环境内。防止腐蚀性气体侵蚀，当测量具有挥发性样品溶液时，吸收池应加盖。

4.2如果开机后钨灯和氘灯不亮，应首先检查保险丝。若断了应更换新的3.15A的保险丝。注意更换保险丝时，关闭电源开关并切断电源。

4.3样品室的出射和入射石英窗不应有污染，不要用手触摸样品室中透光窗面，若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。假如在石英窗上发现有染色剂，应清洗干净以防影响测定。要小心保护比色皿的透光面，只能用镜头纸或脱脂棉轻轻擦拭；。避免硬的物品把透光面划伤。定期清洁样品室，擦洗样品室底部以清洗溅出的液体样品，防止其蒸发和腐蚀样品室，或由于腐蚀而得到错误结果。

5、期间核查

5.1期间核查的频率

正常情况下为两次检定之间，即每半年进行一次，遇到有仪器设备维修、对仪器设备有怀疑或有特殊需要的情况下，应临时进行期间核查。

5.2波长准确度的校正

方法一：利用氘灯的两个特征波长峰486.0nm和656.1nm来检查波长的精确度。如果特征波长峰没有落在指定的范围，请与服务商联系。

方法二：将镨铷滤光片置于样品室内，对准光斑（做样品测试状），盖上样品室盖，进行光谱扫描。扫描完毕后，观察波长是否为807.0±3.0nm即在804～810之间。如果在，说明波长准确；如果不在，请与服务商联系。

用镨铷滤光片，虽方便，但准确度不高。

5.3吸光度校正

常用重铬酸钾的0.005mol/l 的H₂SO₄溶液（入_max=210nm）作为标准校正溶液，此溶液公认的吸光度值分别以重量吸收系数（l/g.cm）、比吸收系数(A_{l cm}^{l %})和摩尔吸收系数(l/mol.cm)表示如下：