主题:用正电源毛细管电泳测定有机酸(苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等酸)可行吗

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lumin81740
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各位朋友好,我想用毛细管电泳测定苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等有机酸,所用电源为正电压(0-30KV),总是不出峰。查文献,测定以上各酸都是负电源,缓冲溶液中一般加了阳离子表面活性剂。另有一些文献如测定水杨酸、丁香酸、苯甲酸、咖啡酸、儿茶酸、绿原酸等有机酸的电源为正电源,缓冲溶液中一般加了阴离子表面活性剂。我们实验室只有正电源,能不能测定苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等酸呢?不都是酸吗,用正电源,阴离子表面活性剂能否分离苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等酸呢?
推荐答案:heguang回复于2011/05/06
这些酸都是没有紫外吸收的,紫外检测的话一定要加紫外背景物质在里面。通常使用的体系是铬酸钠+CTAB。当然也有一些试剂盒做检测。
你如果用的是商品话的仪器,正负极肯定是可以颠倒过来的;如果是自己搭的仪器,也可以手工把正负极倒过来,有机酸的检测,最好用负电压模式,很成熟。
补充答案:

金水楼台先得月回复于2011/05/06

高效毛细管电泳/直接紫外检测法的应用研究 
利用高效毛细管区带电泳法对柠橄酸、苹果酸、酒石酸、草酸进行分离,研究了最佳的分离条件,用直接紫外检测法建立了柠像酸、苹果酸、酒石酸、草酸的高效毛细管电泳分离分析新方法,以吸收峰的峰面积定量,绘制标准工作曲线.线性范围分别为:草酸和酒石酸10-2001,g/.l,柠徽酸和苹果酸30--2501,g/ml.该法简单、快速,可应用7"菠菜、柑桔、西红柿中有机酸含盘的测定。
文章链接:中国化工仪器网 http://www.chem17.com/Tech_news/Detail/14156.html


不知道对你有帮助没有?

april110016回复于2011/05/10



液相能测出来,不一定电泳就会出峰,要知道电泳要比液相低至少一个数量级的灵敏度。很可能是你这几个物质本身吸收不好的缘故

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你用的pH是多少,如果电渗流足够大,酸应该也是出峰的,所有拟可以试试高pH。另外,你的仪器可以反端进样不,那样不就是负电源了吗,只不过柱子有效长度比较短。

你知不知道别人为何加表面活性剂?
金水楼台先得月
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高效毛细管电泳/直接紫外检测法的应用研究 
利用高效毛细管区带电泳法对柠橄酸、苹果酸、酒石酸、草酸进行分离,研究了最佳的分离条件,用直接紫外检测法建立了柠像酸、苹果酸、酒石酸、草酸的高效毛细管电泳分离分析新方法,以吸收峰的峰面积定量,绘制标准工作曲线.线性范围分别为:草酸和酒石酸10-2001,g/.l,柠徽酸和苹果酸30--2501,g/ml.该法简单、快速,可应用7"菠菜、柑桔、西红柿中有机酸含盘的测定。
文章链接:中国化工仪器网 http://www.chem17.com/Tech_news/Detail/14156.html


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heguang
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这些酸都是没有紫外吸收的,紫外检测的话一定要加紫外背景物质在里面。通常使用的体系是铬酸钠+CTAB。当然也有一些试剂盒做检测。
你如果用的是商品话的仪器,正负极肯定是可以颠倒过来的;如果是自己搭的仪器,也可以手工把正负极倒过来,有机酸的检测,最好用负电压模式,很成熟。
heguang
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要想得到较高的分辨率和稳定的结果,也可以选择使用试剂盒。
lumin81740
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怎么没有这篇文章的具体内容呢?

原文由 金水楼台先得月(albert800922) 发表:
高效毛细管电泳/直接紫外检测法的应用研究 
利用高效毛细管区带电泳法对柠橄酸、苹果酸、酒石酸、草酸进行分离,研究了最佳的分离条件,用直接紫外检测法建立了柠像酸、苹果酸、酒石酸、草酸的高效毛细管电泳分离分析新方法,以吸收峰的峰面积定量,绘制标准工作曲线.线性范围分别为:草酸和酒石酸10-2001,g/.l,柠徽酸和苹果酸30--2501,g/ml.该法简单、快速,可应用7"菠菜、柑桔、西红柿中有机酸含盘的测定。
文章链接:中国化工仪器网 http://www.chem17.com/Tech_news/Detail/14156.html

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lumin81740
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为什么没有紫外吸收?应该有的呀,能用液相色谱紫外检测直接测定呀,只是在pH值为2.3左右。难道有机酸阴离子没有紫外吸收吗?
原文由 heguang(heguang) 发表:
这些酸都是没有紫外吸收的,紫外检测的话一定要加紫外背景物质在里面。通常使用的体系是铬酸钠+CTAB。当然也有一些试剂盒做检测。
你如果用的是商品话的仪器,正负极肯定是可以颠倒过来的;如果是自己搭的仪器,也可以手工把正负极倒过来,有机酸的检测,最好用负电压模式,很成熟。
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pH值试了很多,有酸性的,有碱性的,还有中性的。可惜不能反端进样?

原文由 userwzy(userwzy) 发表:
你用的pH是多少,如果电渗流足够大,酸应该也是出峰的,所有拟可以试试高pH。另外,你的仪器可以反端进样不,那样不就是负电源了吗,只不过柱子有效长度比较短。

你知不知道别人为何加表面活性剂?
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不知道,您能不能解释一下
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
你用的pH是多少,如果电渗流足够大,酸应该也是出峰的,所有拟可以试试高pH。另外,你的仪器可以反端进样不,那样不就是负电源了吗,只不过柱子有效长度比较短。

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原文由 lumin81740(lumin81740) 发表:
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原文由 userwzy(userwzy) 发表:
你用的pH是多少,如果电渗流足够大,酸应该也是出峰的,所有拟可以试试高pH。另外,你的仪器可以反端进样不,那样不就是负电源了吗,只不过柱子有效长度比较短。

你知不知道别人为何加表面活性剂?


我的意思是你看看文献上,他们为何加表面活性剂,然后才有可能参考别人的条件,设计自己的实验.你说的文献我也没有看过,不敢贸然猜测.

电泳分离,也就是EOF大小,离子迁移速度决定的,你可以自己设计一下,当然不一定能分开。

如酸,带负电荷,向正极迁移,如果EOF为O,或者较小(EOF小于离子迁移速度),则需用负电源。添加表面活性剂时,根据离子与表面活性剂作用不同,离子迁移速度也有所改变,从而实现分离。
april110016
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原文由 lumin81740(lumin81740) 发表:
为什么没有紫外吸收?应该有的呀,能用液相色谱紫外检测直接测定呀,只是在pH值为2.3左右。难道有机酸阴离子没有紫外吸收吗?
原文由 heguang(heguang) 发表:
这些酸都是没有紫外吸收的,紫外检测的话一定要加紫外背景物质在里面。通常使用的体系是铬酸钠+CTAB。当然也有一些试剂盒做检测。
你如果用的是商品话的仪器,正负极肯定是可以颠倒过来的;如果是自己搭的仪器,也可以手工把正负极倒过来,有机酸的检测,最好用负电压模式,很成熟。


液相能测出来,不一定电泳就会出峰,要知道电泳要比液相低至少一个数量级的灵敏度。很可能是你这几个物质本身吸收不好的缘故
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