原文由 jinglh(jinglh) 发表:
大家好,我们实验室新买了一台安捷伦1260,刚验收完,一用就发现了一些问题……
1、压力不稳定,峰不是规则的锯齿状,工程师说出口阀有问题,要更换新的,期待能解决问题!
2、到目前为止,改变了N个梯度洗脱条件,发现只要梯度洗脱就有一个不明的峰出现,无论是空白还是样品,而走100%B却没有……一工程师说有的物质可能就是这样,只有在梯度时才能洗脱下来;(觉得很不可思议!)而令一个工程师说,柱子和仪器不匹配,让换一根大内径的(那个柱子是2.1*50,1.8um),结果换了4.6*50,2.7um的依然没有改进……况且柱子都是安捷伦给标配的,他们会给配不合适的柱子么?很是困惑……
希望并感谢大家都来交流一下,我非常困惑和郁闷啊……
压力不稳具体是多少?波动范围?压力在一定范围内波动是正常的。通常安捷伦用bar作压力单位。波动1bar是完全正常.最大允许波动3bar.
基线锯齿状,得看你放在什么量程了。放大了看当然会锯齿。只要基线在0.2mV(mAU)就可以了。不过一般安捷伦的机子基线肯定波动比这个小。
梯度洗脱有不明峰的可能性是流动相中有一相里有杂质,这个杂质正好在经历一段时间后洗脱下来。刚开始在柱子上逐渐富集。通常称之为 鬼峰。
还有就是:梯脱洗脱如果梯度变化剧烈,也会有峰出来。当然,要注意鉴别这个所谓的峰是物质的峰还是流动相改变后产生的波动。初步鉴别也容易:如果峰是基本对称的,可能是物质产生的。如果“峰”是从一边上去后到一个平台,或从一边下去后到一个平台,那就不是样品产生的,而是流动相改变产生的。