主题：【讨论】显微摄影技术的体验

在形态学研究中，最终取得的照片质量，将是决定实验结果的最终依据。学术期刊编辑和审稿专家对论文的评价，也十分注重照片质量。获得一张好的照片，既取决于组织制备技术，也与显微摄影以及暗室技术有关。本文仅就显微摄影技术，以Olympus New Vanox型万能显微镜配套装置为例简要介绍如下。
１显微摄像前的准备工作
　　组织切片的选择：根据论文需要选择组织切片。一类为保存实验原始资料而挑选的切片，由于组织切片年久后易于褪色，所以拍成胶片代替切片，目的是便于长期保存；另一类为入选论文的核心切片，也是显微摄影的重点。在选择组织切片时，应选择切片厚度均一,展片平整,背景反差明显,透明度良好,染色质量较好的切片，不要忘记以记号笔在入选切片周围打上记号，以便于及时而准确地重复找到欲摄部位。在拍摄范围内，不应有任何污尘、组织碎片、气泡及人工假象存在，拍摄时无妨将物镜与目镜不同组合，多拍摄一些帧幅，以便选优，不与前一类切片平均使用胶卷。
　选购胶卷：目前新式显微摄影装置多采用氦灯，其光路系统已由旧式钨丝照明转变成近似日光。所以选购胶卷时应为日光型者，即感光速度（ISO/ASA）为100的胶卷。其次，在挑选胶卷商品厂家时，最好对同一实验组织切片，选用同一厂家胶卷，这有利于摸索暗室洗像技术。再者，对黑白负片、彩色负片及彩色反转片（幻灯片），购买与拍摄要有计划；若以黑白片与彩色片相比，应先拍彩色片，以防组织切片放置过长褪色。如果单纯为发表论文拍摄，则只需拍摄黑白片，如果既要彩色负片又要彩色反转片，应先拍反转片。彩色反转胶卷冲洗后，一般能如实反映组织切片的真实色调，因此除可作幻灯片使用外，还可作彩卷扩印时色彩还原的标准参照。通常情况下，彩色照片扩印往往颜色失真，相同的彩卷多次扩印时色调也多不一致，而且背景常有蓝色或绿色。到照像馆扩印彩照时，应以彩色反转片或原有的相同组织相同染色方法的彩照作为参照，并建议用彩色补偿滤片（CC滤片）消掉背影杂色，使无色的背景调为纯白色。通过实践，证明经过这种处理的彩色照片质量明显提高。
正确安装胶卷：向照相机内装卷时，常出现的失误是胶卷没有挂上，致使按下自动曝光装置上的“曝光键”后，胶卷并未转动，胶片并未感光，且因一般情况下，自动曝光装置并未因胶卷未挂上有任何异常的警示，故浪费大量精力与时间。正确的装卷方法如下：打开照相机背壳，将胶卷药膜面朝内装在倒卷轴上，拉动片头至摄取卷轴端，因后者上有数条纵沟，有时须将片头剪窄，以确保片头能够插入纵沟，并且不能使片头从另一纵沟伸出来，以手指将胶片边孔套按在摄取卷轴下端的齿轮齿上，按动自动曝光装置上的“曝光”键，确实见到胶片向前卷动到摄取卷轴时，才关闭照相机背，再按动一次“曝光”键，注意倒卷轴应随着转动。
核查显微镜及其摄相装置各键钮状态：Olympus New Vanox上的键钮颇多。这里仅指出几点：
①依据胶卷上的ISO/ASA值设定胶卷速度（film speed）。
②依据胶卷品牌及型号设定倒易失效补偿值（reciprocity failure compensation），此值一般在胶卷盒上没有标明，但在各种摄相装置说明书上均可查到知名胶卷品牌的此值。
③核查摄相光路与相关各个键钮接通状态，当接通后，自动曝光装置控制面板上的“安全”灯将亮起来。
２常用显微摄影技术细节
摄影者对显微摄影装置的调整：包括两目镜瞳孔间距的调整和个人屈光不正的校正。前者指将两目镜的距离按个人的瞳孔间距进行调整，拉动目镜或捻转瞳孔间距调节螺旋。校正屈光时应转动目镜筒上的屈光度调节环，使物镜视野中心的“十”字由单线调成双线，达到完全清晰，并且左右眼应分别调整。每个拍摄者都不宜省略这一步。
物镜与摄相目镜不同组合的选择：摄影目镜除放大功能外，并不具备空间分辨功能，只有物镜才具有空间分辨力。在一般条件下，对组织切片厚度在20 μm以下者，应尽量选择较高倍物镜，例如欲放大实物50倍时，选择“20×”物镜配以“