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液相色谱（LC）
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主题：【求助】求文献一篇“高效液相色谱法同时测定微量全血中维生素A和E”，不甚感激！

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zouxizhen
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发表于：2011/09/07 15:08:47 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上头给了一篇“液相色谱法同时测定微量全血中维生素A和E”，说要我们按这个文献用液相来做生物分析，无奈啊。但是只给了摘要，想全面的评估一下是否可行，也请各位大侠帮忙评估一下可行性，谢谢！
摘要如下：

摘要： [目的]建立反相高效液相色譜法(RP-HPLC)同時測定微量全血樣品中維生素A和E的方法. [方法]取全血50μl,用無水乙醇沉淀蛋白,再加入正已烷漩渦提取維生素A和E,取一定量正己烷層經氮氣流揮干,殘渣加甲醇溶解后用高效液相色譜法分析,標準曲線法定量.對血樣的提取條件和色譜柱選擇、流動相比例、流速、柱溫等實驗條件進行了優化,確定了最佳分析條件.本法色譜分離條件為:分離柱為Zorbax C8色譜柱(4.6 mm×15 cm,5μm);流動相為甲醇-水(98+2);流速為0.70ml/min;柱溫為50℃;紫外檢測波長:維生素A為325 nm,維生素E為292 nm. [結果]維生素A和E標準曲線的相關系數均大于0.999;相對標準偏差(RSD)＜5%.對于50μl全血,本法的檢出限維生素A為0.02μg/ml;維生素E為0.08μg/ml.維生素A和E的加標回收率分別為93.2%～104%和80.4%～84.9%. [結論]所建立的方法快速、簡便、靈敏、準確,已成功地測定了微量全血中維生素A和E.
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2011/9/7 19:35:09 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议楼主按给出的条件先试一下
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耐士科技
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2011/9/7 23:11:23 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以联系我，我有这篇文献的，格式不对，传不上来，看你短信
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有水有渝
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2011/9/8 7:54:51 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼上的可以压缩后上传，如果有一样的文献，那楼主不是没有做方法学验证的必要了，文章也就失去了意义？
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zouxizhen
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2011/9/8 10:16:30 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
建议楼主按给出的条件先试一下


没有一样的色谱柱，用C18柱走不出来，在购买中ING
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zouxizhen
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2011/9/8 10:20:51 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
楼上的可以压缩后上传，如果有一样的文献，那楼主不是没有做方法学验证的必要了，文章也就失去了意义？

一般实验我们都不做方法验证的，只有GLP实验才做方法验证，如果可行，我就可以直接用文献中的方法了罗。你所说的“文章也就失去了意义？”是指？有些不太明白。
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zouxizhen
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2011/9/8 10:23:01 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 耐士化工(SH102364) 发表:
可以联系我，我有这篇文献的，格式不对，传不上来，看你短信


加了，等你验证呢，谢谢！
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有水有渝
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2011/9/8 14:37:29 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zouxizhen(zouxizhen) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
楼上的可以压缩后上传，如果有一样的文献，那楼主不是没有做方法学验证的必要了，文章也就失去了意义？

一般实验我们都不做方法验证的，只有GLP实验才做方法验证，如果可行，我就可以直接用文献中的方法了罗。你所说的“文章也就失去了意义？”是指？有些不太明白。


我以为你要发表论文呢。维生素A和E我做过，是饲料中的，对色谱柱的要求瓶不是很高，用岛津和月旭的250mm的C18都可以做的出来。
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