主题:【讨论】【华山论剑第五十八集】如何优化液质的梯度洗脱程序?

浏览0 回复22 电梯直达
xiaowang268
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wufenyut
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论坛版主招募|新窦
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原文由 forshell(forshell) 发表:
我最近也在头疼LC梯度优化的问题,已经把梯度放的最缓了还是分不开。。。按道理这个柱子是可以分开我的物质的。求高手指点

能否具体说说你做的物质以及所用的梯度程序和柱子
otsleogo
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如果液相色谱梯度洗脱玩的比较透的话,质谱应该没什么问题,直接讨论质谱还真不好说。
主要就是避免基质效应吧,还有就是多残留的分离度要满足了。
如果样品前处理净化的不够好的话,最好在保留时间后加几分钟高有机相的梯度来冲洗柱子,以免前一针的残留在下一针的进入质谱里边。这样做可以延长质谱的寿命,同时也可以减轻下一针的基质效应,更对色谱柱有保护作用。就是费些时间和流动相,当然相比几百万的质谱来说,这些还是值得的。
hlf_1026
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pfizer2001
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有一本书 讲梯度洗脱的 还有方法开发的书,好好看看就可以了!这个梯度洗脱刚开始肯定是高比例的水相走到低比例,然后不断的缩短范围,梯度洗脱很重要,其实质谱的条件参数很好优化的,但是液相方面梯度优化跟柱子有关,好的柱子很快就能分好了,但是柱子不行也很难的,不过现在都是UPLC的柱子,也一般不错的!多组分分析重要,单组份分析不那么重要!
色谱是一门试验科学所以 梯度洗脱也是不断的摸索,你也可以根据梯度洗脱的方程去优化,有DRYLAB 但是很少有人用,我的意见是,你要明白你液相的死体积,然后根据所需要的峰分开的程度去推断,这样一般都能达到要求的,还有,做液质的,柱子一定要好,不好的话 ,你的大部分时间会浪费在分离上的!
该帖子作者被版主 nankingee3积分, 2经验,加分理由:感谢分享
starvivi
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palb
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原文由 pfizer2001(pfizer2001) 发表:
有一本书 讲梯度洗脱的 还有方法开发的书,好好看看就可以了!这个梯度洗脱刚开始肯定是高比例的水相走到低比例,然后不断的缩短范围,梯度洗脱很重要,其实质谱的条件参数很好优化的,但是液相方面梯度优化跟柱子有关,好的柱子很快就能分好了,但是柱子不行也很难的,不过现在都是UPLC的柱子,也一般不错的!多组分分析重要,单组份分析不那么重要!
色谱是一门试验科学所以 梯度洗脱也是不断的摸索,你也可以根据梯度洗脱的方程去优化,有DRYLAB 但是很少有人用,我的意见是,你要明白你液相的死体积,然后根据所需要的峰分开的程度去推断,这样一般都能达到要求的,还有,做液质的,柱子一定要好,不好的话 ,你的大部分时间会浪费在分离上的!
请教一下,您说的是什么书?
银月风铃
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我最近在做抗生素的检测,选用的梯度洗脱就是从高有机相到低有机相,最后加个高有机相方便连续进样。。洗脱的效果还好,不过感觉不是很彻底,冲柱子的时候看图谱还有残留。不知道要怎么改进了。。
m3040153
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