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主题：请问一下高效液相色谱仪可不可以用来分离蛋白质？

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vivianwang
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发表于：2006/03/07 13:40:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
小女子所在的实验室有一填充物C18的HPLC,请问一下能否用来分离蛋白质？蛋白质分子是不是太大了？
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2006/3/7 21:04:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以的，只是配样要小心，不要让蛋白质堵了柱子。
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xiangquan
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2006/3/7 21:23:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分子量不能太大，
C18柱子的填料孔径选择300埃
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longly
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2006/3/7 21:57:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用氨基柱吧，但好贵的，要一万多块钱一支！C18是分离不了大分的。但肽就可以，做检测的话，你可以把它先酶切了再上C18柱。
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rubysl
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2007/12/5 16:23:51 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以选择凝胶柱分离蛋白
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myj602
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2008/3/26 19:38:10 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以用300埃的足够，不过就是贵一点
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愚爸爸
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2008/3/27 10:13:29 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议用专门的蛋白分离柱，，
还有你液相的泵流速等参数都需要根据样品改变，
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高卧东山
littlewing
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2008/4/9 23:20:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
天，又顶上来一个陈年老帖
C18 300A其实也不能做大分子的蛋白，还是应该用专用柱
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terryhong01
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2009/6/6 19:54:57 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用凝胶柱做蛋白，根据分子量选择合适的柱子，流动相也简单，效果也可以。用C8和C18做蛋白挺危险的，我们单位一老兄用C8柱做蛋白样，一根柱子（15cm）的，用了半年柱压由1000升高到2500，管路还堵过。所以最好别用。
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richies
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2009/6/9 15:40:11 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
60A的硅胶柱,分子量一般最大只能到2000

100A的,估计能到5000-7000

300A的,能到20000-30000

再大分子的蛋白,就不能用反相硅胶柱来分离了

你可以用体积排阻色谱来做,就是凝胶色谱GPC,日本TSK的柱子比较常见
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terry_tao
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2010/4/27 13:47:11 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以分析，但是效果不是很好。慎重慎重！
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手机版： 请问一下高效液相色谱仪可不可以用来分离蛋白质？
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